Ingenierie et Biologie Synthétique - James N. Sturgis, Laetitia Houot Luminy, 2016 - (LISM) CNRS UMR7255

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Ingenierie et Biologie Synthétique - James N. Sturgis, Laetitia Houot Luminy, 2016 - (LISM) CNRS UMR7255
Ingenierie et Biologie Synthétique

                            James N. Sturgis,
                             Laetitia Houot

                           Aix-Marseille Université,
                              Marseille, France

                              Luminy, 2016

J.N. Sturgis (Luminy)               SynBio             CASEXTC13L   1 / 53
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Sujets
1   Introduction
       Organization
       Ingénierie
       L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie
       Applications et technologies de la Biologie Synthetique
2   Quelques experiences cléf
      Repressilator
      Genome transplantation
      Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines
3   iGEM
      Standards
      Composants
      Open source
      Examples

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Introduction   Organization

Organization de l’enseignement

                                     Quelques cours formels (3),
                                     Présentation orale de l’analyse d’un
                                     projet de biologie synthétique,
                                     Présentation d’un poster sur vos projets
                                     de biologie synthétique.

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Introduction   Organization

Evaluation
Pratique
     Présentations orales le 27 fevrier et 6 mars
     Affiches presentée le 24 avril dans le grande hall

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Introduction   Organization

Evaluation
Pratique
     Présentations orales le 27 fevrier et 6 mars
     Affiches presentée le 24 avril dans le grande hall

Présentations orales
    En groupes de 2 à 4 étudiants.
    Sélection d’un projet parmis ceux proposé.
    Présentation du contexte.
    Présentation des resultats.

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Introduction   Organization

Evaluation
Pratique
     Présentations orales le 27 fevrier et 6 mars
     Affiches presentée le 24 avril dans le grande hall

Présentations orales
    En groupes de 2 à 4 étudiants.
    Sélection d’un projet parmis ceux proposé.
    Présentation du contexte.
    Présentation des resultats.

Structure de l’affiche
     En groupes de 2 à 4 étudiants.
     Definition du sujet et de l’enjeu societal ou scientifique.
     Spécification des characteristiques, ou comment faire et expertise requis.
     Comment mettre en oeuvre le projet, composants et strategies
     Enjeux de Bio-ethique, Bio-securité et Bio-safety.
     Notation sur suport visuel et discours d’explicaiton.

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Introduction   Organization

Projects

Beaucoup du travail est consacré aux projets, ce qui a posé problème par
le passé. On va essayer de vous aider a comprendre cette demarche
multidisciplinaire.
    Présentation d’un projet (30 janvier)
    Analyse de projets (jusqu’au 6 mars)
    Construction d’un projet sur thème libre (jusqu’à 24 avril)

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Introduction   Ingénierie

C’est quoi un ingénieur?

La Biologie Synthetique est une domaine d’ingénierie plustot que de
science . . .
               “Scientists study the world as it is; engineers create
                          the world that has never been.”
                              Theodore von Kármán
                        (Ingénieur Aerospatial 1881-1963)

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Introduction   Ingénierie

C’est quoi un ingénieur?

La Biologie Synthetique est une domaine d’ingénierie plustot que de
science . . .
               “Scientists study the world as it is; engineers create
                          the world that has never been.”
                              Theodore von Kármán
                        (Ingénieur Aerospatial 1881-1963)

                     “What I cannot create I do not understand”
                                 Richard Feynman
                               (Physicien 1918-1988)

. . . mais est-ce important?

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Introduction   Ingénierie

Achimède: ingénieur ou scientifique?

                             Savant de Syracuse 287 avJC – 212 avJC
                                     Mathematicien : Trétises comme
                                     “l’Arénaire”, “La quadrature de la
                                     parabole” . . .
                                     Ingenieur : les defenses de Syracuse, les
                                     mirroirs d’Archimède
                                     Scientifique : la poussé d’Archimède et
                                     la résolution de l’énigme de Heiron II.

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Introduction   Ingénierie

Le travail d’un ingénieur

    Definir le problème à resoudre ou chose a construire.
    Comprendre le problème ou ses aspets essentiels.
    Spécifier les normes de performance requises.
    Trouver des solutions potentiels et en choisi le meilleur.
    Construire un prototype.
    Essayer le prototype et l’ameilliorer.
    Livrer une solution qui respecte des normes de performance.

      Ré-iterer jusqu’a la perfection l’obtention des spécifications.
     Augmenter efficacité avec composants et systèmes réutilizables

   J.N. Sturgis (Luminy)               SynBio                    CASEXTC13L   8 / 53
Introduction   Ingénierie

Le travail d’un ingénieur

Ou se cache la science?
    Definir le problème à resoudre ou chose a construire.
    Comprendre le problème ou ses aspets essentiels.
    Spécifier les normes de performance requises.
    Trouver des solutions potentiels et en choisi le meilleur.
    Construire un prototype.
    Essayer le prototype et l’ameilliorer.
    Livrer une solution qui respecte des normes de performance.

         Ré-iterer jusqu’a la perfection l’obtention des spécifications.

    J.N. Sturgis (Luminy)                SynBio                  CASEXTC13L   8 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

C’est quoi la Biologie Synthetique

Wikipedia janvier 2017
La biologie synthétique est un domaine scientifique et biotechnologique
émergeant qui combine biologie et principes d’ingénierie, dans le but de
concevoir et construire (« synthétiser ») de nouveaux systèmes et fonctions
biologiques.

    J.N. Sturgis (Luminy)              SynBio                                      CASEXTC13L         9 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

C’est quoi la Biologie Synthetique

Wikipedia janvier 2017
La biologie synthétique est un domaine scientifique et biotechnologique
émergeant qui combine biologie et principes d’ingénierie, dans le but de
concevoir et construire (« synthétiser ») de nouveaux systèmes et fonctions
biologiques.

Moi janvier 2017
La biologie synthétique est un domaine de l’ingénierie dont le but est de
concevoir et construire (“synthétiser”) de nouveaux systèmes biologiques.

    J.N. Sturgis (Luminy)              SynBio                                      CASEXTC13L         9 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

L’ingenierie préhistorique
Bio-ingénierie a une longue histoire

Agriculture                                           Industrie Agro-alimentaire

Les plantes et animaux
domestiqués sont très différentes
de leurs parents. Cela a commencé
il-y-a 12000 ans . . .

     J.N. Sturgis (Luminy)                   SynBio                                     CASEXTC13L          10 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

L’ingenierie préhistorique
Bio-ingénierie a une longue histoire

Agriculture                                           Industrie Agro-alimentaire

Les plantes et animaux                                . . . de meme les bactéries et
domestiqués sont très différentes                     champignons ont été domestiqués
de leurs parents. Cela a commencé                     il y a 7500 les premiers fromages
il-y-a 12000 ans . . .                                ont été fabriqués.

     J.N. Sturgis (Luminy)                   SynBio                                     CASEXTC13L          10 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

L’ingenierie du 19ème
Industrie de produits biologiques

Diastase                                               Rennet

En 1816 Kirchhoff décrit la
saccharification de l’amidon à
partir d’un composant du gluten
de blé . . .
     J.N. Sturgis (Luminy)                    SynBio                                     CASEXTC13L          11 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

L’ingenierie du 19ème
Industrie de produits biologiques

Diastase                                               Rennet

En 1816 Kirchhoff décrit la                            . . . En 1872 Christian Hansen
saccharification de l’amidon à                         développe un procédé industriel
partir d’un composant du gluten                        pour préparer de Rennet à partir
de blé . . .                                           de caillettes de veaux.

     J.N. Sturgis (Luminy)                    SynBio                                     CASEXTC13L          11 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

L’ingenierie du debut 20ème

                                                    1914 Werk Röhm & Haas
                                                    Darmstadt premiers lessives à
                                                    enzyme (. . . stabilité et
                                                    substrats)
                                                    1919 Weizmann, Production
                                                    de Acetone et n-butanol à
                                                    partir d’amidon (Clostridium
                                                    acetobutylicum)
                                                    (. . . rendement)
                                                    1955 Upjohn, cortisone par
                                                    hemi-synthese.

   J.N. Sturgis (Luminy)             SynBio                                     CASEXTC13L          12 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

la Revolution ADN

                                    Les modification biologiques sont le resultat de mutations
                                    et la sélection. Avant modifications naturelles, depuis
                                    mutations induites (de facon dirigées ou non).
                                        Structure de l’ADN et le code génétique (1953 NP
                                        1959, 1962, 1968),
                                        Structure des protéines et enzymes (1960 NP 1954,
                                        1962, 1972),
                                        Les enzymes de restriction (1970 NP 1978),
          ADN Sculpture
                                        La PCR (1986 NP 1993),
 jardins botaniques Dublin, Eire.

                                        Sequencage des génomes (1976, 1995, 1996, 2001
                                        (NP 1980, 2002))

       J.N. Sturgis (Luminy)                             SynBio                                     CASEXTC13L          13 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

Quelques applications actuelles
Riz à thiamine
Le riz est tres pauvre en thiamine (vitamine B6) ce qui
cause des problèmes de nutrition. Un riz OGM avec plus de
thiamine à été développé.

Bio-ethanol de bagasse
               L’industrie de sucre génère beaucoup des decets dificiles a
               valorizer. Fermentation de la bagasse avec levures OGM
               pour la production de bio-ethanol.

Essence d’Algues
Les resources renouvelables sont important pour lutter
contre la rechauffement climatique. Developpement
d’algues OGM riches en hydrocarbures.
     J.N. Sturgis (Luminy)             SynBio                                     CASEXTC13L          14 / 53
Introduction   L’histoire de la Biologie Synthetique et Bio-ingénierie

Bio-ingenierie

Vieux approche avec nouveaux outils. . .
La bio-ingenierie d’aujourdhui est dans la continuité du 20ème siecle . . .
     Ameilioration des enzymes pour les bio-procedes.
     Selection des organismes avec meilleurs propriétés ou rendement.
     Ameilioration de plantes et des aliments.
. . . mais avec l’aide des technologies de l’ADN.

Nouveaux approches . . .
    Synthèse de nouveaux organismes resultant de l’ingenierie
     Synthèse de nouveaux materiaux,
     Nouveaux domaines d’application.

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Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Applications, disciplines et outils

    J.N. Sturgis (Luminy)             SynBio                                   CASEXTC13L            16 / 53
Introduction    Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Applications: Medecine, Industrie, Environnement, Science

                                Medicine
                                    Diagnostique
                                          Therapeutique

                                Industrie
                                    Industrie chimique
                                          Bio-materiaux

                                Environnement
                                     Agriculture
                                          Bio-remèdiation

                                Science
                                     Nouveaux outils
   J.N. Sturgis (Luminy)             SynBio                                    CASEXTC13L            17 / 53
Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Outiles et technologies: Sequencage d’ADN et omiques
Techniques d’analyse haut-débit
    Sequencage d’ADN
    Structure des protéines
    Analyse du génome, transcriptome, protéome, interactome,
    métabolome, fluxome.

    J.N. Sturgis (Luminy)               SynBio                                   CASEXTC13L            18 / 53
Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Outiles et technologies: Synthèse et assemblage d’ADN

   J.N. Sturgis (Luminy)             SynBio                                   CASEXTC13L            19 / 53
Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Outiles et technologies: Biologie des systèmes
Wikipedia janvier 2017
La biologie des systèmes est un domaine académique qui cherche à intégrer différents niveaux
d’informations pour comprendre comment fonctionnent des systèmes biologiques. En étudiant
les relations et les interactions entre différentes parties du système biologique (organites, cellules,
systèmes physiologiques, réseaux de gènes et de protéines permettant la communication des
cellules), le chercheur tente de découvrir un modèle de fonctionnement de la totalité du système.

     J.N. Sturgis (Luminy)                       SynBio                                   CASEXTC13L            20 / 53
Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Outiles et technologies: Modelization et CAD

Les ordinateur aujourd’hui permettent de concevoir des systèmes bien plus
complexe que auparavant, si il est possible de les utiliser dans les processus
de conception et validation.

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Outiles et technologies: Ingenierie des systèmes

Integration des aspets techniques, humaines et le cycle de vie du produit et
son developpement dans le processus d’ingenierie.

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Disciplines: Ingénierie métabolique

    Modifie l’efficacité du metabolisme ou la regulation,
    Nouveaux produits avec nouveaux enzymes,
    Nouveaux systèmes de régulation.

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Introduction   Applications et technologies de la Biologie Synthetique

Disciplines: Protocellules

Réiterer l’origine de la vie en créant un système vivant ultra-simple et
ultra-reduit a partir de molécules non-vivants. Nous ne sommes pas la
encore!

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Disciplines: Circuits régulation

                                     Maitriser le vivant avec des régulations
                                     imposées.
                                     Créer des nouveaux circuits de
                                     régulation dans le vivant.
                                     Manipuler le developpement et la
                                     communication via les circuits de
                                     régulation.

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Disciplines: Systèmes biologiques orthogonaux

                             Créer des choses vivants completement
                             non-naturelles . . .
                                     Protéines avec des acides aminés
                                     non-naturels
                                     Modifications du code génétique (4
                                     bases etc.)
                                     Remplacer certains atomes avec
                                     d’autres...

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Disciplines: Génomes minimales

                                Reduire et modifiér les génomes . . .
                                        Cellule minimal comme chassis pour
                                        developpement
                                        Construction de nouvelles organismes
                                        par transplantation génomique

               Craig Venter

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Disciplines: Bio-nanosciences

                                     Utiliser le vivant pour faire les
                                     nano-sciences
                                     Fabrication de nouvaux nano-materiaux
                                     Conception de Nano-bots

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Bio-ethique, Bio-securité et Bio-safety

                                     Est ethique?
                                     Est dangereux?
                                     Comment prévenir des problèmes?

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Quelques experiences cléf

Le programme aujourd’hui

                                                           Le repressilator - une circuit de
                                                           control novateur
                                                           Transplantation des génomes -
                                                           le recodage de la biologie
                                                           L’ingénierie métabolique -
                                                           synthese d’artemesin.

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Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Une des experience princeps de la biologie synthetique.

                                                                Conception d’un oscillator - que
                                                                faut il pour un osciallator et
                                                                comment le faire de facon
                                                                biologique.
Nature: 20 janvier 2000
                                                                Modelisation - les propriétés
 “A synthetic oscillatory network of                            réquis pour un oscialator quelles
     transcriptional regulators”                                paramètres sont importants.
 Michael Elowitz & Stanislas Leibler
                                                                Réalisation - la construction du
                                                                repressilator.
                                                                Evaluation - testing de la
                                                                construction.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                       CASEXTC13L   31 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator

                                                                Une signal qui oscille, la couleur
                                                                des bactéries E. coli qui
Oscillator éléctronique                                         expriment la GFP.

                                                                Une oscillator a besoin d’une
                                                                boucle de retroaction inhibitive
                                                                avec un delai temporel (la
                                                                capacitance dans une circuit
                                                                éléctronique).
     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   32 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator biologique

                                            On connais un certain nombre de repressors
                                            qui sont capable d’inhiber la transcription de
Circuit d’une repressor                     gènes en liant sur les site operator de l’ADN.

                                                    L’operon lac et LacI lie sur lacO et
                                                    inhibe la transcription de lacZ
                                                    L’operon tet et TetR qui lie sur tetO et
                                                    inhibe la transcription de tetA
                                                    L’operon λPR qui est inhibé par λcI.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                   CASEXTC13L    33 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator biologique

Circuit d’une repressor                     On connais un certain nombre de repressors
                                            qui sont capable d’inhiber la transcription de
                                            gènes en liant sur les site operator de l’ADN.

                                                    L’operon lac et LacI lie sur lacO et
                                                    inhibe la transcription de lacZ
                                                    L’operon tet et TetR qui lie sur tetO et
                                                    inhibe la transcription de tetA
                                                    L’operon λPR qui est inhibé par λcI.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                   CASEXTC13L    33 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator biologique

Circuit d’une repressor                     On connais un certain nombre de repressors
                                            qui sont capable d’inhiber la transcription de
                                            gènes en liant sur les site operator de l’ADN.

                                                    L’operon lac et LacI lie sur lacO et
                                                    inhibe la transcription de lacZ
                                                    L’operon tet et TetR qui lie sur tetO et
                                                    inhibe la transcription de tetA
                                                    L’operon λPR qui est inhibé par λcI.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                   CASEXTC13L    33 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator biologique

Circuit d’une repressor

Pour une boucle negative il faut 1,3,5 . . . liens inhibitives, ici il-y en a trois.
Le delai dans le boucle vient du besoin d’accumuler les protéines et les
détruire.
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Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Modelisation

Dans chaque partie nous avons une
protéine represseur (Pj ) produit a
partir d’une ARN messager mi .

         Pj = (TetR, CI, LacI)
         mi = (cI, lacI, tetR)

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio               CASEXTC13L   35 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Modelisation

                                                                α0 niveau bas d’ARN
Dans chaque partie nous avons une
                                                                α + α0 niveau haut d’ARN
protéine represseur (Pj ) produit a
partir d’une ARN messager mi .                                  n coefficient d’Hill (degree de
                                                                co-operativité ≈ sites de liaison)
         Pj = (TetR, CI, LacI)
         mi = (cI, lacI, tetR)

Considère que la quantité de chaque
messager peut etre decrit par une
simple équation:
      dmi                            α
       dt   = −mi + α0 +          (1+pi n )

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                       CASEXTC13L   35 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Modelisation

                                                                α0 niveau bas d’ARN
Dans chaque partie nous avons une
                                                                α + α0 niveau haut d’ARN
protéine represseur (Pj ) produit a
partir d’une ARN messager mi .                                  n coefficient d’Hill (degree de
                                                                co-operativité ≈ sites de liaison)
         Pj = (TetR, CI, LacI)                           et egalement pour les protéines
         mi = (cI, lacI, tetR)
                                                                         dPi
                                                                         dt    = −β(Pi − mi )
Considère que la quantité de chaque
messager peut etre decrit par une
                                                                β durée de vie des protéines par
simple équation:
                                                                rapport aux ARN.
      dmi
            = −mi + α0 +             α                          concentrations de protéines en
       dt                         (1+pi n )
                                                                unités de KM , temps en unités
                                                                de stabilité d’ARN.
     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                             CASEXTC13L   35 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Modelisation 2

Ces equations permettent de modéliser le système de facon numerique
(informatique), ou eventuellement analytique (mathématique)

La modelisation indique bien l’importance de la stabilité des protéines sur
le resultat.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio               CASEXTC13L   36 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conception d’un oscillator biologique

      “lite” indique des protéines de stabilité réduite.
      “aav ” indique également une protéine de stabilité réduite.
      les origines de réplication “pSC101origin” et “ColE1” controlent le
      nombre de copies.
      Réalization avec oligonucleotides, PCR, enzymes de restriction etc.
     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio               CASEXTC13L   37 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Result

Des cellules clignotant

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio               CASEXTC13L   38 / 53
Quelques experiences cléf   Repressilator

Le repressilator
Conclusions

                                                                Une activité qui demande de
                                                                l’analyse du système
                                                                De la modélisation
                                                                (mathématique et informatique)
                                                                Les technologies d’ADN.
     Possible de construire nouveaux
     circuits avec nouvelles fonctions.
     Besoin de controler stabilité et
     nombres de copies pour le faire
     fonctionner.
     Demande une compréhension de
     la fonctionnement des
     composants
     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                      CASEXTC13L    39 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Le premier organisme avec une génome synthetique.

Science: 2 juillet 2010                                        Synthèse et Assemblage d’une
    “Creation of a Bacterial Cell                              génome.
     Controlled by a Chemically
                                                               Transplantation de génomes.
        Synthesized Genome”
             Gibson et al.                                     Ingénierie du génome.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   40 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Assemblage d’une génome synthetique.

 104 oligonucléotides synthétiques          Assemblage dans E. coli                  Assemblage dans S. cerevisiae

       J.N. Sturgis (Luminy)                                SynBio                                CASEXTC13L         41 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Assemblage d’une génome synthetique 2

                                     Assemblage “Gibson”

                                          1kbp à 300 kbp

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   42 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Assemblage d’une génome synthetique 3

                                     Assemblage en levure

                           les plus grandes morceaux . . .
              eviter l’expression a partir du génome en construction.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   43 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Assemblage d’une génome synthetique 4

M. mycoides genome synthétique

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   44 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Verification 1

M. mycoides JVCI-syn1.0 LacZ

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   45 / 53
Quelques experiences cléf   Genome transplantation

Génome Transplantation
Conclusions

                                                               Assemblage fastidieux mais pas
                                                               tres complexe
                                                               Besoin de modeliser
                                                               l’assemblage par ordinateur -
                                                               CAD
                                                               Possible de fabriquer les
     Possible de remplacer le génome                           génomes conçus par nous - CAD
     de certains bactéries par une
     autre.
     Pas universel . . .
     Le nouveau génome
     reprogramme le cytoplasme
     après transplantation.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                        CASEXTC13L   46 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Synthèse d’Artemisinin.

Nature: 16 avril 2006
“Production of the antimalarial drug                            Introduction de nouveaux voies
    precursor artemisinic acid in                               métaboliques.
         engineered yeast”
                                                                Control de l’organization
              Ro et al.
                                                                Modification de l’hôte
                                                                Modification de la régulation

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      47 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Synthèse d’Artemisinin.

                                                    Enzymes d’Artemisia anua
                                                    Modification de réguation direct
                                                    Modification de réguation indirect
                                                    Modification de la souche de levure

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      48 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Coordination de l’expression des enzymes.

                                                                Coordination de l’expression des
                                                                dfferentes genes sur une
                                                                message par sa structure
                                                                secondaire (7x)
                                                                Accessibilité de l’RBS
                                                                Susceptibilité à l’ARN’ase
                                                                Coordination par modifcation
                                                                des promoteurs et MS.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      49 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Control de l’organisation des enzymes.

                                                                Canaliztion des substrats par
                                                                raprochement des enzymes,
                                                                et controle de leur stochiometrie
                                                                (77x)
                                                                Système d’ecafaudage
                                                                synthétique.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      50 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Modifcation de la levure.

L’optimization de la souche pour fermention et modifications de la
régulation augmentent le rendement (mg/l de culture) 50 000 000 fois

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      51 / 53
Quelques experiences cléf   Ingénierie Métabolique et ingénierie des protéines

Ingénierie Métabolique
Conclusions.

                                                                Sélection des promoteurs
                                                                Concéption des ARN (stabilité)
                                                                Concéption des protéines
                                                                d’échafauage
                                                                Modélisation du méabolisme
     Plus que juste addition des
     enzymes
     Régulation d’organisation, et
     stochiometrie.
     Ajustement de la souche.

     J.N. Sturgis (Luminy)                          SynBio                                    CASEXTC13L      52 / 53
iGEM   Examples

Sélection de Projets
   Energy: Beilefeld 2013 Ecoelectricity
   - Electricity by modified E. coli                 Foundation: Harvard 2014 Bactogrip
   Food: UC Davis 2014 OliView -                     Environment: Bielefeld 2015 Cell free
   Biosensor for Olive Oil Quality Control           sticks it works on paper.
   Environment: Toulouse 2014                        Measurement: William and Mary
   Subtitree - save our trees.                       2015 Transcriptional noise in E. coli
   Hardware: TU Delft 2015 3D printing               Diagnostics: INSA Lyon 2016 Gotta
   of bacterial biofilms.                            detect ’em all
   Foundation: Waterloo 2015 Crispier -              Diagnostics: MIT 2016 Diagnosing
   Re-engineering CRISPR-Cas9.                       endometriosis
   Environment: Wageningen 2016                      Foundation: NTU Singapour 2016
   BeeT - Save our bees.                             Our Crispry adventure
   Nutrition: Sydney 2016 Fres(H) -                  Diagnostics: Pasteur 2016 Mos(kit)o
   Ethylene sensor                                   Therapeutics: Tel-Hai 2016 Triple C
   Foundation: Edinburgh 2016 Babbled                therapy
   - data encoding in DNA
                          Find information on site   of “igem.org”

    J.N. Sturgis (Luminy)                 SynBio                        CASEXTC13L   53 / 53
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