COMPASS Bacillus cereus Agar
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COMPASS® Bacillus cereus Agar
DOMAINE D’UTILISATION
COMPASS® Bacillus cereus Agar est un milieu gélosé, utilisé pour la détection et le dénombrement
des spores et des formes végétatives des espèces appartenant au groupe des Bacillus cereus
présomptifs dans les produits destinés à l’alimentation humaine et animale.
Recherche ou numération sont directement réalisées sans passer par les étapes de purification des
colonies, de confirmation biochimique (tests de fermentation du glucose, de Voges-Proskauer, de
réduction du nitrate et test de l’hémolyse) et/ou d’examen microscopique habituellement requises par
les protocoles des méthodes normalisées (ISO 7932 et ISO 21871 notamment).
COMPASS® Bacillus cereus Agar pour le dénombrement des Bacillus cereus présomptifs est
officiellement certifié par AFNOR Certification, sous Attestation N° BKR 23/06-02/10, dont le terme de
validité est fixé au 5 février 2014.
PRINCIPES
- Le substrat chromogénique inclu dans le milieu de culture est hydrolysé par les espèces
appartenant au groupe des Bacillus cereus ; les colonies développées présentent alors une
coloration caractéristique verte.
- Le système sélectif retenu permet l’inhibition de la majorité de la flore de contamination
secondaire.
- L’association entre le substrat chromogénique et le mélange inhibiteur de la formulation de
COMPASS® Bacillus cereus Agar permet d’obtenir le résultat directement par comptage des
colonies caractéristiques, après seulement 24 heures d’incubation, sans confirmation.
PREPARATION
- Faire fondre le milieu de base (BM130) pendant le minimum de temps nécessaire à sa
reliquéfaction totale.
- Refroidir et maintenir à 44-47°C.
- Reprendre le lyophilisat du supplément sélectif (BS069) en y ajoutant aseptiquement 1 mL d’eau
distillée stérile.
- Dans chaque flacon de 100 mL de milieu de base, ajouter stérilement 1 mL de supplément sélectif.
- Homogénéiser parfaitement.
- Couler en boîtes de Petri stériles, ceci dans le cadre de l’utilisation de COMPASS® Bacillus cereus
Agar dans un protocole de dénombrement par ensemencement en surface.
- Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert.
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BIOKAR Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France
Tél : +33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : +33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.frMODE D'EMPLOI
- A la surface du milieu pré-coulé (BM126), transférer 0,1 mL de l’échantillon à analyser et de ses
dilutions décimales.
- Etaler l’inoculum en surface à l’aide d’un étaleur stérile.
ou
- Transférer 1 mL de la suspension et, si nécessaire, de ses dilutions décimales successives dans
une boîte de Petri stérile.
- Couler environ 15 mL de milieu complet.
- Homogénéiser parfaitement et laisser solidifier sur une surface froide.
- Incuber à (30 ± 1)°C pendant 24 à 27 heures.
LECTURE
Procéder au comptage des colonies présentant une pigmentation verte caractéristique avec un
diamètre supérieur à 1 mm (protocole d’ensemencement en surface) ou 0,5 mm (protocole
d’ensemencement en profondeur) dans les boîtes en contenant 150 au maximum.
L’expression des résultats se fera conformément aux recommandations établies dans la norme NF
EN ISO 7218 (octobre 2007).
NOTA
A la surface de COMPASS® Bacillus cereus Agar, l’aspect des colonies appartenant au groupe des
Bacillus cereus peut être variable en fonction des souches rencontrées.
NOTA
En cas de doute sur l’aspect caractéristique des colonies, il est possible de confirmer l’appartenance
au groupe des Bacillus cereus en réalisant le test de l’hémolyse tel que décrit dans la norme NF EN
ISO 7932.
FORMULE-TYPE
(pouvant être ajustée de façon à obtenir des performances optimales)
Pour 1 litre de milieu :
- Peptones ........................................................................................26,0 g
- Extrait autolytique de levure.............................................................5,0 g
- Chlorure de sodium..........................................................................5,0 g
- Système sélectif .............................................................................12,7 g
- Substrat chromogénique ..................................................................0,1 g
- Agar agar bactériologique ..............................................................16,0 g
pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 6,8 ± 0,2.
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- Milieu en boîtes : gélose brun clair.
- Réponse culturale typique après 24 heures d’incubation à 30°C :
Croissance
Microorganismes Caractéristiques
(Rapport de productivité : PR)
Bacillus cereus ATCC® 11778 ≥ 50 % colonies vertes
Bacillus cereus ATCC 14579 ≥ 50 % colonies vertes
Bacillus subtilis ATCC 6633 inhibée, score 0
Escherichia coli ATCC 25922 inhibée, score 0
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Référence : BM12608 ; BM13008 + BS06908
Domaine d’utilisation : Dénombrement des spores et formes végétatives des espèces appartenant
au groupe des Bacillus cereus présomptifs.
Bacillus cereus
Colonie caractéristique
Couleur verte avec un
diamètre supérieur à 1 mm
COMPASS® Bacillus cereus Agar
Réf : BM12608
Incubation 24 heures à 30°C (surface)
Colonies caractéristiques vertes avec un diamètre supérieur à 1 mm
(activité enzymatique spécifique)
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Milieu pré-coulé en boîtes de Petri (Ø 90 mm) :
- Stocker entre 2 et 8°C, à l’abri de la lumière.
- La date de péremption est mentionnée sur l’étiquette.
Milieu prêt-à-liquéfier en flacons,
Supplément sélectif
- Stocker entre 2 et 8°C, à l'abri de la lumière.
- Les dates de péremption sont mentionnées sur les étiquettes.
Milieu complet préparé en boîtes, avec suppléments : 15 jours à 2-8°C (à titre indicatif).
PRESENTATION Code
Milieu pré-coulé en boîtes de Petri (Ø 90 mm) :
- Coffret de 20 boîtes BM12608
Milieu prêt-à-liquéfier en flacons :
- Pack de 10 flacons de 100 mL BM13008
Supplément sélectif :
- Coffret de 10 flacons pour 10 X 100 mL de milieu BS06908
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XP CEN ISO/TS 11133-2 (V 08-104-2). Janvier 2004. Microbiologie des aliments. Guide pour la préparation et la production
des milieux de culture. Partie 2 : Guide général pour les essais de performance des milieux de culture.
NF EN ISO 7932 (V 08-023). Juillet 2005. Microbiologie des aliments. Méthode horizontale pour le dénombrement de
Bacillus cereus présomptifs. Technique par comptage des colonies à 30 °C.
NF EN ISO 7218 (V 08-002). Octobre 2007. Microbiologie des Aliments. Exigences générales et recommandations.
BKR 23/06-02/10
METHODES ALTERNATIVES D’ANALYSE POUR L’AGROALIMENTAIRE
Certifié par AFNOR Certification
www.afnor-validation.org
COMPASS® est une marque de SOLABIA S.A.S..
Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce document.
Les informations et les spécifications contenues dans cette fiche technique ont été établies à la date du 2010-02-24.
Elles sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.
Code document : BK189/F/2006-06 : 7.
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