Sélection de lignées d'Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d'une absinthe typée

 
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Sélection de lignées d'Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d'une absinthe typée
P l a n t e s     a r o m a t i q u e s                e t     m é d i c i n a l e s

       Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L.
       adaptées à la fabrication d’une absinthe typée
       Annabelle BERTHET1, Ambra MARCOLLI1, Benoit BACH2, Pierrick REBENAQUE2 et Nicolas DELABAYS1
       1
         Institut Terre Nature Environnement (inTNE), HEPIA, HES-SO/Genève, 1254 Jussy, Suisse
       2
         Haute école de viticulture et œnologie, Changins, 1260 Nyon, Suisse
       Renseignements: Annabelle Berthet, tél. +41 22 546 68 47, e-mail: annabelle.berthet@hesge.ch, www.hesge.ch/hepia

       Champ de grande absinthe, Artemisia absinthium, au Mont-de-Travers (NE).

       Introduction                                                          fabrication et la commercialisation de l’absinthe, mais
                                                                             uniquement pour un usage personnel. La tradition
       La grande absinthe, Artemisia absinthium L., espèce                   clandestine ainsi que la forte variabilité de la composi-
       de la famille des Astéracées, est une herbacée vivace                 tion chimique des plantes produites au Val-de-Travers
       originaire du bassin méditerranéen (Lamarti et al.                    poussent de nombreuses distilleries à utiliser des
       1996). En Suisse, elle pousse principalement dans les                 plantes importées. Pourtant, des caractéristiques sen-
       Alpes et au sud du pays. Espèce médicinale (Anonyme                   sorielles spécifiques – bien qu’encore peu décrites –
       2017), elle est utilisée depuis deux siècles, en associa-             sont recherchées chez A. absinthium, principalement
       tion avec d’autres plantes, pour l’élaboration du spiri-              l’amertume et des arômes typiques. La sélection de
       tueux nommé «absinthe», originaire du Val-de-Travers                  plantes avec un profil chimique assurant ces qualités
       (NE). Sa distillation fut interdite entre 1908 et 2005 à              organoleptiques, mais présentant parallèlement un
       cause de la présence de thuyone, une molécule jugée                   taux de thuyone réduit et stable, est un enjeu impor-
       à l’époque responsable de crises de folie meurtrières                 tant en vue de la production d’une absinthe typique,
       (Luauté et al. 2005). Aujourd’hui, la boisson est à nou-              distincte des anisés classiques.
       veau autorisée, mais sa teneur en thuyone ne doit pas                     Comme la plupart des plantes produisant des huiles
       dépasser 35 mg/l.                                                     essentielles, les populations d’A. absinthium déve-
           La culture de la grande absinthe a recommencé                     loppent des chémotypes variables, notamment en fonc-
       dans notre pays depuis une quinzaine d’années; cepen-                 tion de leur origine géographique (Chialva et al. 1983).
       dant, les souches locales ne sont plus cultivées pour la              Une étude récente (Nguyen et al. 2018) confirme qu’il

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Sélection de lignées d'Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d'une absinthe typée
Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée | Plantes aromatiques et médicinales

                                                                               La grande absinthe (Artemisia absinthium)
existe effectivement de nombreux chémotypes d’A. ab-                           est la plante emblématique entrant dans

                                                                      Résumé
sinthium L. différents, mais que, pour la plupart d’entre                      la composition de l’absinthe, une boisson
eux, il est encore difficile d’expliquer leur relation avec                    alcoolisée traditionnelle produite
leur origine géographique et écologique. En 2013, Bai-                         dans le Val-de-Travers (NE). Depuis la levée
len (2013) a montré que la plupart des plantes de                              de l’interdiction de ce spiritueux
grande absinthe cultivées dans des conditions contrô-                          il y a une quinzaine d’années, sa culture
lées ont exprimé un profil chimique plus simple, com-                          a progressivement repris dans notre pays.
prenant moins de composés que celui des plantes culti-                         Aujourd’hui, les producteurs locaux
vées en plein champ.                                                           recherchent des plantes offrant
    De fait, les parts génétique et environnementale                           des caractéristiques sensorielles spécifiques,
qui déterminent les spécificités chimiques de l’ab-                            présentant parallèlement, pour des raisons
sinthe, et leurs interactions éventuelles, ne sont pas                         légales, un taux de thuyone réduit et stable.
encore clairement définies à ce jour. Dans le cadre de                         A cette fin, plusieurs lignées d’A. absinthium
la sélection d’un écotype pour la distillation, il est né-                     ont été cultivées en parallèle et comparées.
cessaire de comprendre les facteurs gouvernant son                             Les lignées étudiées ont présenté
profil chimique, ce dernier influençant directement ses                        d’importantes variations phénologiques,
qualités organoleptiques. Parallèlement, il est égale-                         morphologiques, phytochimiques et
ment nécessaire de comprendre encore plus spécifique-                          organoleptiques. En particulier, des teneurs
ment les facteurs influençant la production de thuyone,                        variables en thuyone ont été observées
sa concentration étant l’un des principaux éléments                            entre les accessions et des liens entre
limitant pour la commercialisation de l’absinthe.                              ces teneurs et les caractéristiques organolep-
Pour une espèce comme A. absinthium, un tel pro-                               tiques des diverses plantes ont été mis
gramme de sélection ne peut s’inscrire que dans un                             en évidence. L’espèce offre une diversité
processus plus large de domestication de l’espèce                              génétique intéressante, à même de justifier
(Delabays 1992). Aujourd’hui, des observations pré-                            un programme d’amélioration en vue
cises sont encore nécessaires sur sa biologie, son écolo-                      de la création de lignées adaptées
gie, et plus généralement sur la variabilité qu’offrent                        à la production d’absinthe.
les populations naturelles et les quelques variétés culti-
vées. La présente étude porte sur la mise en culture
et la comparaison de plusieurs lignées d’A. absinthium;          sions d’A. absinthium L., d’origines diverses (tab. 1), ont
elle vise à la description et la sélection d’écotypes            été cultivées sur deux parcelles expérimentales.
adaptés aux conditions pédoclimatiques du Val-de-                    Dans la première parcelle (parcelle 1) ont été plan-
Travers et intéressants pour la distillation. Plus globale-      tées cinq accessions provenant de marchands grainiers
ment, elle s’inscrit dans une démarche de conservation           ou de jardins botaniques: Jelitto, Graine de vie (abrégée
d’un patrimoine agricole et culturel.                            Gdv), Germinance, Agrosemens et Valais.
    Dans cette étude, dix accessions d’A. absinthium                 Concernant l’accession Valais, un lot de plantes
ont été cultivées dans les mêmes conditions pédoclima-           fleuries, récolté en 2013 et fourni par un producteur,
tiques et comparées sur les plans phénologique, mor-             a été utilisé pour les analyses chimiques. Les plantes de
phologique et chimique, ceci dans le but de déterminer           la parcelle d’étude n’ayant pas fleuri, nous avons inté-
la part de ces variations attribuables à une composante          gré ce lot avec l’hypothèse que la thuyone et les com-
génétique.                                                       posés chimiques en général présentent des concentra-
                                                                 tions très différentes entre les stades végétatif et gé-
Des essais                                                       nératif. Aussi, il nous a paru préférable d’utiliser un
de comparaison d ’accessions                                     échantillon plus vieux, mais en fleurs, plutôt qu’un
                                                                 échantillon plus frais, mais prélevé au stade végétatif.
Matériel et méthode                                                  Dans la deuxième parcelle (parcelle 2), avec un ca-
                                                                 lendrier de culture différent (cf. paragraphe suivant),
Parcelle d’étude et matériel végétal                             ce sont trois autres lots de graines, provenant de la ré-
La parcelle se trouve sur la commune de Boveresse (Val-          gion du Val-de-Travers, qui ont été comparés: Poutres,
de-Travers/NE). Sise à 739 m d’altitude, elle ne présente        Sauvage et Boveresse. Ces lignées ont été collectées
pas de dénivelé, ni d’ombrage particulier. Neuf acces-           dans des jardins, en nature ou encore dans un ancien                  

                                                    Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021       33
Plantes aromatiques et médicinales | Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée

          séchoir (tab. 1) et présentent l’intérêt d’être potentiel-                  d’eau ou de produit phytosanitaire. Seul un désher-
          lement bien adaptées aux conditions pédoclimatiques                         bage manuel a été réalisé un mois après la plantation.
          de cette région.
                                                                                      Parcelle 2
          Dispositif expérimental et itinéraire de culture                            La deuxième parcelle (parcelle 2) a été mise en place
          Parcelle 1                                                                  par le producteur en 2018. Elle est située sur le même
          Les cinq accessions ne provenant pas du Val-de-Travers                      site, et jouxte directement la parcelle 1 décrite précé-
          (tab. 1) ont été semées en chambre climatique entre                         demment. Il s’agit d’un essai en bande sans répétition.
          le 7 et le 15 novembre 2017, puis les plants ont été pro-                   Chaque accession est semée sur une surface d’environ
          gressivement acclimatés (tab. 2) pour être plantés le                       4 m2 et désherbée une fois à la main. Il n’y a pas eu
          11 mai 2018 sur la parcelle d’essai, à une densité de                       d’autre intervention sur la culture avant la récolte des
          plantation de 6,25 plants/m2 (40 x 40 cm). La parcelle 1                    échantillons, effectuée en septembre 2018 en vue des
          est subdivisée en deux parties: la première (parcelle                       analyses chimiques. Ces accessions ayant été plantées
          1a) a été dévolue aux observations phénologiques et                         au printemps 2018 sans subir de vernalisation, elles
          morphologiques, la seconde (parcelle 1b) a été dédiée                       n’ont pas fleuri dans le cadre de ce travail et n’ont donc
          aux mesures des taux de thuyone et aux analyses sen-                        pas été intégrées à l’étude de la phénologie et de la
          sorielles.                                                                  morphologie. Le matériel végétal analysé pour les ac-
              La parcelle 1a est un dispositif totalement rando-                      cessions Boveresse, Poutres et Sauvage est composé
          misé à cinq répétitions, chaque parcelle élémentaire                        uniquement de feuilles.
          étant composée de quatre plantes alignées sur un rang.
          Il en est de même pour la parcelle 1b, mais chaque par-                     Accessions supplémentaires
          celle élémentaire est ici composée de cinq plantes. A la                    Deux accessions supplémentaires ont été ajoutées aux
          plantation, un apport de compost de 0,2 m3/are a été                        analyses chimiques au cours de l’étude (tab. 1). La pre-
          effectué, ainsi qu’un arrosage abondant. Durant le reste                    mière est l’accession Grisons, du semencier UFA, qui
          de la culture, il n’y a eu aucun autre apport de fumure,                    était initialement prévue dans le plan expérimental
                                                                                      mais qui n’a pas germé. La deuxième est l’accession
                                                                                      Pontarlier, qui provient d’un lot de semences prélevé
          Tableau 1 | Liste des dix accessions d’Artemisia absinthium L.
          étudiées: n°, nom, origines géographique et de production.                  sur une souche trouvée dans un jardin dans la ville
                                                                                      du même nom. Ces deux accessions ont été intégrées
           No     Nom                   Origine          Production                   à l’étude grâce à des lots de plantes fleuries fournis par
           1      Graine de vie (Gdv)   Allemagne        Semencier Pharmasaat         un distillateur, qui les a récoltés en août 2017 et conser-
           2      Grisons               Grisons (CH)     Semencier UFA                vés pendant une année dans un séchoir traditionnel.
           3      Valais                Valais (CH)      Nature (Jardin botanique)
                                                                                      Ne présentant pas de répétition, ces lots ont été utilisés
                                                                                      dans les analyses GC-MS et CCM à titre d’observation,
           4      Jelitto               Allemagne        Semencier Jelitto
                                                                                      et dans l’analyse sensorielle au même titre que les
           5      Germinance            Pays-Bas         Semencier DeBolster
                                                                                      autres accessions.
           6      Agrosemens            Pays-Bas         Semencier DeBolster
           7      Pontarlier            Pontarlier (F)   Jardin privé
                                                                                      Mesures et observations
           8      Poutres               Boveresse (CH)   Séchoir privé
                                                                                      Phénologie et morphologie (parcelle 1a)
           9      Sauvage               Boveresse (CH)   Nature
                                                                                      Pour le suivi de la phénologie, une fiche de relevé,
           10     Boveresse             Boveresse (CH)   Jardin privé
                                                                                      basée sur le travail de Delabays (1997) sur Artemisia
                                                                                      annua, a été élaborée, permettant de déterminer les
          Tableau 2 | Résumé de l’itinéraire de culture des plants d’Artemisia        stades d’intérêt, soit les stades C0 à C7 de la floraison,
          absinthium cultivés dans le cadre des essais 1 et 2 de cette étude.         avec une attention particulière pour les stades 51, 59,
                                                                                      60-61 et 65 de l’échelle BBCH. Les relevés sont effec-
           Lieu                     Informations
                                                                                      tués tous les deux à cinq jours, de fin juin à fin août, sur
           Chambre climatique       22°C; jour/nuit 16 h/8 h; HR 65%
                                                                                      20 plantes par accession. La date d’apparition des
                                    -1°C à -2°C/semaine pour atteindre                stades choisis est relevée pour chacune de ces plantes,
                                    T°C jour/nuit de 10°C/5°C et durée de 10 h/14 h
                                                                                      ainsi que le nombre de jours écoulés depuis le semis. Le
           Serre hors-gel           Lullier (GE)
                                                                                      nombre moyen de jours est calculé pour chaque échan-
           Plein air                Thielle (NE)
                                                                                      tillon (cinq plantes). Ils sont ensuite comparés à l’aide
           Pleins champs            Boveresse (NE)
                                                                                      d’outils statistiques (test t).

  34      Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021
Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée | Plantes aromatiques et médicinales

    Les caractères morphologiques observés sont la pi-           sélectionnés; la troisième était une séance d’évaluation
losité, le découpage des feuilles et le port de la plante.       utilisant la méthodologie sensorielle du profil sensoriel
Ces caractères ont été observés de manière qualitative           (Quantitative Descriptive Analysis, QDA), appliquées
en relevant leur variation à l’intérieur des accessions et       sur 11 descripteurs: 6 termes olfactifs et 5 attributs
entre les accessions.                                            gustatifs. Les dégustateurs devaient évaluer chaque
                                                                 échantillon sur chaque descripteur à l’aide d’une
Analyses chimiques: teneurs en thuyone                           échelle linéaire continue avec pour extrémité à gauche
et détermination des chémotypes (parcelles 1b et 2)              «intensité absente» (= note de 0) et pour extrémité à
La détermination des teneurs en thuyone des diffé-               droite «intensité très forte» (= note de 10). Un panel
rentes accessions a été effectuée par SPME-GC-MS,                d’experts composé de 11 personnes a participé à l’en-
selon la méthode de Bach et al. (2016). Les parties              semble des dégustations. Ce groupe est entraîné à
du matériel végétal utilisées sont les sommités fleu-            l’analyse sensorielle depuis deux à huit ans à raison
ries et les feuilles pour les accessions Gdv, Jelitto, Va-       d’une séance hebdomadaire d’environ 90 minutes.
lais, Grisons et Pontarlier, et uniquement les feuilles          Pour la génération de vocabulaire, quatre produits
pour les accessions Germinance, Agrosemens, Poutres,             représentatifs de l’ensemble des produits finaux (Gdv,
Sauvage et Boveresse. Le séchage a été effectué dans             Grisons, Valais, Jelitto) ont été servis en même temps
un séchoir traditionnel, soit à l’abri de la lumière et à        à une température ambiante (20°C ± 1°C) dans des
température ambiante, durant un mois. L’analyse a été            verres INAO transparents avec 10 ml par produit, puis
effectuée sur des macérats alcooliques (24 heures) qui           recouverts d’un couvercle en plastique. Le même pro-
ont été préalablement centrifugés à 10 000 rpm pen-              tocole de service a été appliqué pour le profil sensoriel
dant dix minutes.                                                des dix accessions. Cependant, pour le profil sensoriel,
     La caractérisation des chémotypes a été réalisée par        les produits ont été présentés en monadique, c’est-à-
chromatographie sur couche mince (CCM), sur les huiles           dire l’un après l’autre, avec un code à trois chiffres. Ils
essentielles (HE) obtenues par distillation par entraîne-        ont été dégustés selon un plan en carré latin de Wil-
ment à la vapeur, avec l’appareillage préconisé par la           liams afin que chaque dégustateur évalue les produits
pharmacopée européenne. Les HE sont diluées dans                 dans un ordre différent et qu’il n’y ait donc pas d’effet
du toluène (1/10), de même que le témoin (thuyone                d’ordre. Les données ont été saisies grâce au logiciel
pure), qui est testé à deux concentrations: t1 = 1/10
et t2 = 0,5/10. 1 ul a été déposé sur une plaque à gel de
silice HPTLC 60 F254 (Merck), à l’aide d’un Nanomat 4            Tableau 3 | Liste des descripteurs discriminants sélectionnés
(Camag). La solution de migration est composée de                et leur définition, ainsi que la modalité sensorielle utilisée.
toluène et d’acétate d’éthyle (93/7). Après trempage
                                                                                                                                Modalité
durant 10 secondes dans une solution de révélation                Descripteur           Définition
                                                                                                                                sensorielle
composée de 100 ml d’acide acétique glacial, de 2 ml
                                                                                        Echantillon ayant une forte intensité
d’acide sulfurique (95–97%) et de 1 ml d’anisaldéhyde             Intensité olfactive                                           Nez
                                                                                        olfactive
(98%), la plaque est chauffée pendant 10 secondes à
                                                                                        Relatif aux odeurs citronnées,
110°C.                                                            Citronnelle                                                   Nez
                                                                                        d’anti-moustique
                                                                                        Relatif aux odeurs poivrées, cumin,
                                                                  Epicé                                                         Nez
Analyses sensorielles                                                                   cannelle
En vue de l’analyse sensorielle, une distillation hydroal-        Fruité                Relatif aux odeurs de pomme, poire      Nez
coolique a été réalisée pour chacune des accessions.                                    Relatif aux odeurs de menthe fraîche,
                                                                  Menthe, fraîcheur                                             Nez
Deux grammes de plante sèche, issus des cinq unités ex-                                 mentholées
périmentales, sauf pour Grisons, Valais et Pontarlier, qui                              Relatif aux odeurs de savon
                                                                  Savonneux                                                     Nez
n’ont qu’un échantillon, sont mis à macérer 24 heures                                   de Marseille
dans 100 ml d’alcool de bouche (96%). Les macérats sont           Intensité             Echantillon ayant une forte intensité
                                                                                                                                Bouche
ensuite mélangés à 100 ml d’eau distillée, distillés pen-         aromatique            aromatique

dant 50 minutes, puis réduits à 15% vol.                          Amertume              En référence à la quinine               Bouche
    L’analyse sensorielle des dix accessions d’A. absin-                                Relatif à la perception de chaud,
                                                                  Alcooleux/brûlant                                             Bouche
thium L. s’est déroulée en trois phases. La première a                                  de brûlant liée à l’alcool

permis de générer du vocabulaire pour élaborer une                Fraîcheur             Relatif à la perception de fraîcheur
                                                                                                                                Bouche
                                                                  (anis, menthol)       liée au menthol ou à l’anis
liste de descripteurs discriminants (tab. 3); la deuxième
a permis d’entraîner les dégustateurs sur les termes              Volume/Gras           Relatif à l’épaisseur en bouche         Bouche
                                                                                                                                              

                                                    Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021              35
Plantes aromatiques et médicinales | Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée

          FIZZ (Biosystèmes, Couternon, France) et traitées par                 rait une sélection visant une meilleure homogénéité.
          le logiciel R avec les packages FactoMineR et Senso-                  Les accessions Germinance et Agrosemens sont restées
          MineR (R Development Core Team 2007).                                 au stade végétatif, seuls quelques individus ont montré
              En ce qui concerne les traitements statistiques                   des signes d’initiation florale. En revanche, l’accession
          du profil sensoriel, une analyse de la variance (ANOVA)               valaisanne n’a montré aucun signe d’initiation florale.
          à deux facteurs (juge et produit) a été réalisée pour                 Ces résultats indiquent que les modalités de la vernali-
          chacun des descripteurs afin de mettre en évidence                    sation ne sont pas identiques pour les diverses acces-
          des différences significatives entre les accessions. Une              sions: Valais nécessite probablement des températures
          analyse en composantes principales (ACP) a ensuite                    inférieures à 5°C pour initier sa floraison. De même,
          été réalisée, afin de positionner graphiquement les                   Germinance et Agrosemens, toutes deux originaires
          accessions selon les descripteurs significatifs à la suite            des Pays-Bas, requièrent apparemment une vernalisa-
          de l’ANOVA à deux facteurs. Une classification ascen-                 tion plus longue, ou à des températures plus basses,
          dante hiérarchique (CAH) a permis de regrouper les                    pour pouvoir effectuer une floraison complète.
          accessions selon leurs ressemblances organoleptiques.                     En ce qui concerne la couleur et la pilosité, une
          Des analyses de corrélation ont également été effec-                  seule lignée s’est distinctement différenciée des autres:
          tuées afin de mesurer l’intensité de la relation entre                Valais est nettement plus poilue que les autres, ce qui
          les données analytiques (concentrations en thuyone                    lui confère une couleur blanchâtre plus marquée.
          notamment) et les données sensorielles.                                   Concernant le découpage des feuilles, il existe une
                                                                                grande hétérogénéité de morphologies au sein des
          Résultats et discussion                                               accessions, comme au sein des individus eux-mêmes.
                                                                                Une typologie de découpage de feuille bi-pennatisé-
          Phénologie et morphologie                                             quée a été établie afin d’effectuer une comparaison
          Parmi les quatre accessions observées pour leur phéno-                sur ce critère (fig. 1). Les quatre types définis sont: bi-
          logie, seules deux ont atteint le stade floraison: Gdv                pennatiséquée à lobes fins (type 1), à lobes palmés
          et Jelitto. Les résultats du test t montrent que Jelitto est          (type 2), à lobes larges (type 3) et à lobes allongés
          significativement plus précoce que Gdv (p = 0,017), d’en              (type 4). Dans les accessions allemandes Gdv et Jelitto,
          moyenne 11 jours pour le stade de récolte (C5). Nos ob-               les deux seules à avoir fleuri, on retrouve plus souvent
          servations révèlent une certaine hétérogénéité dans                   des feuilles de type 1 (lobes fins) et de type 4 (lobes al-
          le développement phénologique au sein de chaque ac-                   longés). On observe aussi des feuilles de type 2 (lobes
          cession: l’écart entre le premier et de le dernier individu           palmés) et de type 3 (lobes larges), mais en proportion
          à arriver au stade C5 est de 28 jours pour l’accession Gdv            moindre. Ce sont les deux seules lignées à présenter de
          et de 31 jours pour l’accession Jelitto. Cette hétérogé-              manière presque équivalente tous les types de décou-
          néité, problématique pour la qualité de récolte, justifie-            page. Cela s’explique probablement par le fait qu’elles

                                                                                                          Figure 1 | Différentes morphologies
                                                                                                          de découpage de feuilles d’Artemisia
                                                                                                          absinthium L. prélevées sur
                                                                                                          un individu de l’accession Gdv.
                                                                                                          Ces quatre feuilles représentent
                                                                                                          les quatre types de découpage définis
                                                                                                          dans cette étude, à savoir: à lobes
                                                                                                          fins (type 1), à lobes palmés (type 2),
                 Type 1          Type 2                      Type 3             Type 4                    à lobes larges (type 3) et à lobes
                                                                                                          allongés (type 4).

  36      Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021
Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée | Plantes aromatiques et médicinales

sont phénologiquement plus avancées. Dans les acces-               volatil, ne se soit pas retrouvée en quantité suffisante
sions hollandaises Germinance et Agrosemens, on ne                 pour être détectée avec ce protocole en CCM, appli-
retrouve que le type 3 (lobes larges) et le type 4 (lobes          qué sur des HE extraites sans solvant. La thuyone pure,
allongés).                                                         quant à elle, est bien distinguable, et la variation de
    En ce qui concerne le port de la plante, toutes les            sa concentration (t1 = 1/10; t2 = 0,5/10) est bien visible.
accessions présentent une très forte variabilité interne,          La CCM pourrait se révéler être un outil intéressant
qui ne permet pas de tirer de conclusions sur la compa-            d’évaluation semi-quantitative de la concentration
raison des accessions entre elles: généralement buis-              en thuyone dans les différentes accessions d’A. absin-
sonnantes, elles présentent des rameaux montants à                 thium L. A cette fin, il conviendrait encore d’affiner la
dressés.                                                           méthode pour permettre de rendre visible la thuyone,
    Globalement, nos observations révèlent donc une                par exemple en utilisant des solvants comme le xylène,
importante variabilité, aussi bien entre accessions qu’au          ou en augmentant les concentrations.
sein de ces dernières, ce qui présage d’un fort potentiel
de sélection et d’amélioration.                                    Analyse sensorielle
                                                                   A la suite du profil sensoriel réalisé sur les dix acces-
Analyses chimiques                                                 sions, l’ANOVA à deux facteurs a montré un résultat                                                                     

Teneurs en thuyone
                                                                 Taux de beta-thuyone (mg/l AA)

La figure 2 expose les taux de thuyone relevés dans les                                           90
macérats alcooliques des différentes accessions. Compte                                           80
tenu des conditions expérimentales (manque de répéti-                                             70
                                                                                                  60
tions avec certaines lignées et hétérogénéité des va-                                             50
riances), seules deux accessions, Gdv et Germinance,                                              40
présentent une différence de concentration statistique-                                           30
                                                                                                  20
ment significative (selon la méthode non paramétrique                                                                              B        B       B        B        B         B
                                                                                                  10
de KrusKal-Wallis, seuil alpha à 5%). Les résultats obte-                                                                A         A        A       A        A        A
                                                                                                   0
nus suggèrent cependant une variation importante de
                                                                                                         )

                                                                                                                  is)

                                                                                                                        v

                                                                                                                              to

                                                                                                                                        e

                                                                                                                                                 s

                                                                                                                                                           e

                                                                                                                                                                   s

                                                                                                                                                                            e

                                                                                                                                                                                      s)
                                                                                                        er

                                                                                                                                                 en

                                                                                                                                                                 re
                                                                                                                        Gd

                                                                                                                                       ag

                                                                                                                                                         ss

                                                                                                                                                                           nc

                                                                                                                                                                                     on
                                                                                                                             lit
                                                                                                             ala
                                                                                                       rli

                                                                                                                                                                 ut
                                                                                                                                                        re
                                                                                                                                                m

                                                                                                                                                                          ina
                                                                                                                                       uv
                                                                                                                             Je

                                                                                                                                                                                    ris
                                                                                                   ta

la teneur en thuyone entre les accessions, et donc un                                                                                                         Po
                                                                                                                                                      ve
                                                                                                             (V

                                                                                                                                            se
                                                                                                                                   Sa

                                                                                                                                                                      rm

                                                                                                                                                                                (G
                                                                                                  on

                                                                                                                                                    Bo
                                                                                                                                            ro
                                                                                                  (P

                                                                                                                                                                   Ge
                                                                                                                                        Ag

potentiel pour la sélection de lignées adaptées.
                                                                   Figure 2 | Taux de thuyone des macérats alcooliques
                                                                   de dix accessions d’Artemisia absinthium (moyennes + ETM, n = 5;
Chémotypes                                                         sauf pour Pontarlier, Valais et Grisons, avec n = 1) (les lettres
Au niveau des profils chimiques des HE, les analyses               indiquent les différences significatives selon le test de Kruskal-
par CCM ont permis de mettre en évidence trois ché-                Wallis, au seuil de 5%).
motypes distincts (fig. 3). Les accessions allemandes
Jelitto et Gdv, ainsi que l’accession Pontarlier, forment
le premier chémotype. L’accession Valais, seule lignée
issue d’une récolte en nature, présente un second
profil, plus diversifié. Enfin, l’accession Grisons révèle
un troisième chémotype, présentant moins de com-
posés visibles. A noter cependant que les plantes
de cette accession, utilisées pour l’extraction de l’HE,
ont été stockées durant une année dans un séchoir
traditionnel, contre un mois pour les autres lignées.
Une partie des molécules a probablement été perdue
au fil du temps.
    Le témoin, bien visible en rose sur les plaques et
testé à deux concentrations, est l’alpha-thuyone. Sur                          Accession no                        4     1         2                         3        7
les plaques révélées, on ne distingue pas de thuyone
                                                                   Figure 3 | Chromatographie en couche mince présentant, de gauche
dans les HE de ces cinq accessions. Cependant, les ana-
                                                                   à droite, le témoin alpha-thuyone (à deux concentrations: 1/10 pour
lyses par SPME-GC-MS ont montré que les macérats                   t1, 0,5/10 pour t2), puis les huiles essentielles des accessions Jelitto
en contenaient tous, certes dans des proportions va-               (n°4), Gdv (n°1), Grisons (n°2), de nouveau le témoin, les accessions
riables. Il est probable que la thuyone, un terpène très           Valais (n°3), Pontarlier (n°7) et, enfin, une troisième fois le témoin.

                                                    Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021                                                           37
Plantes aromatiques et médicinales | Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée

          significatif pour le facteur produit au seuil de 5% pour                          Relation entre taux de thuyone et analyse sensorielle
          les descripteurs «intensité olfactive» (p-valeur = 0,04),                         Des analyses de corrélation ont été effectuées afin
          «fruité» (p-valeur = 0,01) et le terme «volume/gras»                              de mesurer une relation entre les concentrations en
          (p-valeur = 0,05). Ces résultats montrent que les dégus-                          thuyone de ces dix accessions et les caractéristiques
          tateurs ont différencié les produits sur ces trois des-                           organoleptiques, notamment l’intensité de l’«amer-
          cripteurs d’un point de vue organoleptique. Afin de                               tume» et la «fraîcheur en bouche». Le coefficient de
          réaliser l’ACP, les attributs significatifs au seuil de 15%,                      corrélation «r» entre la concentration en beta-thuyone
          et qui montrent donc seulement une tendance, tels                                 et l’«amertume» est égal à 0,765 (p-valeur = 0,01), et,
          que «épicé» (p-valeur = 0,15), «menthe fraîche» (p-va-                            entre la concentration en alpha-thuyone et l’«amer-
          leur = 0,06) et «intensité aromatique» (p-valeur = 0,13),                         tume», le coefficient «r» est égal à 0,642 (p-valeur
          ont été ajoutés aux trois précédents descripteurs.                                = 0,045). Pour la sensation de «fraîcheur en bouche»
              Le graphique en étoile représente les moyennes                                et la concentration en beta-thuyone, le coefficient «r»
          des dix accessions pour les 6 descripteurs significatifs                          est à égal à 0,701 (p-valeur = 0,02). Ces résultats in-
          au seuil de 15% (fig. 4). L’accession Valais apparaît                             diquent une corrélation significative et positive entre
          comme significativement plus intense sur les notes de                             les concentrations en alpha- et beta-thuyone et l’amer-
          «fruité» (moyenne de 4 sur 10, contre une moyenne                                 tume, ainsi qu’entre la beta-thuyone et la sensation de
          globale de 2 sur 10 pour les autres accessions).                                  fraîcheur en bouche.
              En ce qui concerne l’ACP, l’axe 1 représente 53,22%
          de la variabilité et oppose principalement les accessions                         Discussion générale
          Sauvage et Grisons, décrites par les attributs «intensité
          olfactive», «volume/gras» et «épicé», au produit Valais,                          Les accessions d’A. absinthium comparées dans nos es-
          caractérisé par le descripteur «fruité» (fig. 5).                                 sais, pour la plupart préparées et cultivées en parallèle,
              Le second axe de l’ACP représente 28,48% de la                                soit dans des conditions environnementales homo-
          variabilité et oppose les accessions Grisons et Valais à                          gènes, ont présenté d’importantes variations phénolo-
          l’accession Jelitto, décrite comme moins intense aro-                             giques, morphologiques, phytochimiques et organo-
          matiquement et présentant moins de volume/gras en                                 leptiques. A l’évidence, sur ces différents points, l’es-
          bouche.                                                                           pèce offre une diversité génétique intéressante, à
                                                                                            même de justifier un programme de sélection, voire
                                                                                            d’amélioration en vue de la création de lignées adap-
                                                                                            tées à la production d’absinthe. En particulier, des
                                     Intensité olfactive (N)**                              teneurs variables en thuyone ont été observées entre
                                              7                                             les accessions et des liens entre ces teneurs et les carac-
                                              6                                             téristiques organoleptiques des diverses plantes ont été
                                              5                                             mis en évidence. Par exemple, lors de la dégustation des
           Volume/Gras (B)**                                         Intensité
                                              4                      aromatique (B)*        distillats, la beta-thuyone apparaît corrélée, d’une part,
                                              3
                                                                                            à l’amertume et, d’autre part, à la fraîcheur en bouche.
                                              2
                                                                                            Afin de confirmer ces premiers résultats, de futures
                                              1
                                                                                            analyses avec d’autres accessions pourraient avoir lieu.
                                                                                                Aujourd’hui, des essais complémentaires, incluant
                                                                                            une base élargie d’accessions, mériteraient d’être réali-
              Fruité (N)**                                           Epicé (N)*
                                                                                            sés. Parallèlement, l’influence des facteurs environ-
                                                                                            nementaux et agronomiques sur la qualité phytochi-
                                                                                            mique et organoleptique des plantes de grande ab-
                                       Menthe fraîche (N)*                                  sinthe, ainsi que leurs interactions éventuelles avec
               Poutres         Agrosemens       Germinance        Boveresse                 les facteurs génétiques aujourd’hui observés, doivent
               Sauvage         Gdv      Grisons     Valais       Pontarlier       Jelitto   encore être précisés.
          Figure 4 | Graphique en étoile des moyennes des dix accessions                        Dans la perspective d’un travail d’amélioration gé-
          sur chaque descripteur significatif pour le facteur produit au seuil              nétique de l’espèce et d’optimisation de son itinéraire
          de 15% suite à l’ANOVA à deux facteurs (juge et produit).
                                                                                            de culture, le fait de disposer d’un protocole d’analyse
          «N» signifie que le descripteur a été évalué au nez; «B» signifie
                                                                                            de la teneur en thuyone des plantes rapide et bon mar-
          que le descripteur a été évalué en bouche. ** et * indiquent que
          le descripteur est significatif au seuil de 5%, respectivement au seuil           ché constituera un atout déterminant. A cet égard, les
          de 15% pour le facteur produit suite à l’ANOVA à deux facteurs.                   expériences acquises avec les analyses en chromatogra-

  38      Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021
Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée | Plantes aromatiques et médicinales

phie sur couche mince sont très prometteuses. Un tel                                 Nous adressons également nos remerciements au panel d’expert·e·s
protocole d’analyse pourra également favoriser l’auto-                               de Changins qui a participé aux séances de dégustation, ainsi qu’à Eve Danthe
                                                                                     pour l’organisation et la préparation des séances d’analyse sensorielle.
nomie des producteurs pour le contrôle des taux de
thuyone lors de la récolte et de la distillation.
                                                                                     Bibliographie
Conclusions                                                                          b Anonyme, 2017. «Assessment Report on Artemisia Absinthium L. Herba».
                                                                                       European Medicines Agency, London, UK, 30 May 2017, 8-11.
• Les différentes accessions d’Artemisia absinthium                                  b Bach B., Cleroux M., Saillen M., Schönenberger P., Burgos S., Ducruet J.
                                                                                       & Vallat A., 2016. A New Chemical Tool for Absinthe Producers,
  comparées dans nos essais révèlent l’existence, chez
                                                                                       Quantification of /-Thujone and the Bitter Components in Artemisia
  cette espèce, d’une importante variabilité génétique.                                Absinthium. Food Chemistry 213, 813–817.
• Cette variation a été observée aux niveaux                                         b Bailen M., Julio L. F., Diaz C. E., Sanz J., Martínez-Díaz R. A., Cabrera R.,
  phénologique et morphologique, et également                                          Burillo J. & Gonzalez-Coloma A., 2013. «Chemical Composition and Biological
  sur la composition chimique, avec la caractérisation                                 Effects of Essential Oils from Artemisia Absinthium L. Cultivated under
                                                                                       Different Environmental Conditions.» Industrial Crops and Products 49: 102–7.
  de trois chémotypes distincts.
                                                                                     b Berthet A., 2018. Comparaison d’accessions d’Artemisia Absinthium L. et
• Des teneurs variables en thuyone ont notamment
                                                                                       contribution à sa domestication. Travail de bachelor, hepia, Genève, 37–41.
  été observées entre les accessions et des liens entre                              b Chialva F., Liddle P.A.P. & Doglia G., 1983. Chemotaxonomy of Wormwood
  ces teneurs et les caractéristiques organoleptiques                                  (Artemisia Absinthum L.). Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und
  des diverses plantes ont pu être mis en évidence.                                    Forschung 176 (5), 363–66.
• L’espèce offre assurément un grand potentiel pour                                  b Delabays N., 1992. Notes sur la stratégie de domestication d’une plante
                                                                                       sauvage utilisée pour ses métabolites secondaires. Revue suisse d’agriculture
  la sélection, voire la création de lignées
                                                                                       24 (2), 93–98.
  intéressantes pour la fabrication d’une boisson bien                               b Delabays N., 1997. Biologie de la reproduction chez l’Artemisia annua L.
  typée et adaptées aux conditions du Val-de-Travers.                                  et génétique de la production en artémisinine. Thèse de doctorat, Université
• Dans ce contexte, la chromatographie sur couche                                      de Lausanne, 155 p.
  mince (CCM), une méthode d’analyse de la thuyone                                   b Lamarti A., Sadki I., Badoc A., Deffieux G. & Carde J.P., 1996. Obtention
                                                                                       par culture in vitro de clones d’absinthe, Artemisia Absinthium L., dénués
  rapide et relativement peu coûteuse, pourrait se                                                                                                                     
                                                                                       de thuyone. Bulletin de la société de pharmacie de Bordeaux 135, 25–44.
  révéler être un outil très pratique pour la sélection
                                                                                     b Luauté J.-P., Saladini O. & Benyaya J., 2005. «Toxicité neuropsychiatrique
  des plantes destinées à la distillation.                                            de l’absinthe. Historique, données actuelles. Annales médico-psychologiques,
                                                                                       Revue psychiatrique 163 (6), 497–501.
                                                                                     b Nguyen H. T., Tavaszi-Sárosi S., Llorens-Molina J.A., Ladányi M.
Remerciements                                                                          & Zámborine-Németh E., 2018. Compositional variability in essential, oils
Ce travail a pu être réalisé grâce à la collaboration de Christophe Racine,            of twelve wormwood (Artemisia Absinthium L.) accession grown in the same
distillateur à Môtiers, et Kevin Nebel, distillateur à Boveresse, qui ont mis          environment. Journal of Essential Oil Research 30 (6): 421–30.
à disposition leurs connaissances, leur matériel végétal ainsi que la parcelle
d’étude et le séchoir de la Maison des Chats.

Figure 5 | Carte de représentation des dix accessions, issue de l’analyse en composantes principales avec les descripteurs significatifs
au seuil de 15% pour le facteur produit suite à l’ANOVA à deux facteurs (juge et produit). Les produits d’une même couleur appartiennent
au même groupe suite à une classification ascendante hiérarchique (CAH). Le signe «+» indique que l’accession est intense sur cet attribut
au seuil de 10%. Le signe «-» indique que l’accession n’est pas intense sur cet attribut au seuil de 10%.

                                                                        Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021                   39
Plantes aromatiques et médicinales | Sélection de lignées d’Artemisia absinthium L. adaptées à la fabrication d’une absinthe typée

          Selection of Artemisia                                       Auswahl von geeigneten                         Selezione di linee di Artemisia
          absinthium L. lines for                                      Zuchtlinien von Artemisia                      absinthium L. adattate

                                                     Zusammenfassung
Summary

                                                                                                          Riassunto
          the production of a typical                                  absinthium (L.) zur Herstellung                alla produzione di un tipico
          absinthe beverage.                                           eines klassischen Absinths.                    assenzio.
          Wormwood (Artemisia                                          Der Wermut (Artemisia                          L’assenzio maggiore (Artemisia
          absinthium) is the emblematic                                absinthium L.) ist eine Pflanze,               absinthium) è la pianta
          plant used in the composition                                die eine zentrale Rolle bei                    emblematica utilizzata nella
          of Absinthe, an alcoholic                                    der Herstellung von Absinth                    composizione dell'Assenzio,
          beverage traditionally produced                              spielt, einem traditionellen                   una bevanda alcolica tradizio-
          in Val-de-Travers (NE). Since                                alkoholischen Getränk aus                      nalmente prodotta nella Val-
          the lifting of the ban on                                    dem Val-de-Travers (NE). Seit                  de-Travers (NE). Con la revoca
          this spirit some 15 years ago,                               der Aufhebung des Verbots                      del divieto di questo liquore,
          its cultivation has gradually                                zur Herstellung des Absinths                   circa quindici anni fa, la sua
          resumed in Switzerland. Today,                               vor etwa fünfzehn Jahren, wird                 coltivazione è gradualmente
          local producers are looking                                  der Wermut in unserem Land                     ripresa nel nostro paese. Oggi,
          for plants with specific sensory                             nach und nach wieder angebaut.                 i produttori locali sono alla
          characteristics together with,                               Heute suchen lokale Produzenten                ricerca di piante con caratteristi-
          for legal reasons, reduced and                               nach Wermutpflanzen mit                        che sensoriali specifiche, ma allo
          stable thuyone content. To                                   spezifischen Duft- und                         stesso tempo e per motivi legali,
          this end, several accessions                                 Geschmackseigenschaften,                       con un ridotto e stabile tenore
          of A. absinthium, were grown                                 die zugleich aus rechtlichen                   in tujone. Per questo motivo,
          in parallel and compared. The                                Gründen einen reduzierten                      diverse linee di A. absinthium
          lines studied showed significant                             sowie stabilen Thujongehalt                    sono state coltivate in parallelo
          phenological, morphological,                                 aufweisen.                                     e confrontate. Le linee studiate
          phytochemical and organoleptic                               Zu diesem Zweck wurden                         hanno mostrato significative
          variations. In particular, varying                           mehrere Linien des Wermuts                     variazioni fenologiche,
          levels of thuyone were observed                              aus verschiedenen Regionen                     morfologiche, fitochimiche
          between accessions; and links                                gleichzeitig kultiviert und                    e organolettiche. Sono stati
          between these levels and                                     verglichen. Die untersuchten                   in particolare osservati tenori
          the organoleptic characteristics                             Linien zeigten signifikante                    variabili in tujone tra le
          of the various plants have been                              phänologische, morphologische,                 accessioni, evidenziando
          highlighted. The species offers                              phytochemische und organo-                     i legami tra questi tenori e
          an interesting genetic diversity                             leptische Unterschiede.                        le caratteristiche organolettiche
          for a breeding programm aiming                               Insbesondere wurden                            delle varie piante. Certamente,
          at the creation of lines well                                unterschiedliche Thujongehalte                 la specie offre un'interessante
          suited for the production                                    zwischen den Pflanzenlinien                    diversità genetica, capace
          of a typical Absinthe.                                       gemessen. Des Weiteren konnte                  di giustificare un programma di
                                                                       eine Verbindung zwischen                       miglioramento per la creazione
          Key words: Artemisia                                         diesen Gehalten und den orga-                  di linee adattate alla produzione
          absinthium L., domestication,                                noleptischen Eigenschaften                     di Assenzio.
          breeding, essential oil, sensory                             der verschiedenen Pflanzenlinien
          analysis, thujone                                            nachgewiesen werden.
                                                                       Die Ergebnisse lassen die
                                                                       Vemutung zu, dass der Wermut
                                                                       über eine hohe genetische
                                                                       Vielfalt besitzt, welche
                                                                       eine Selektion erfordert,
                                                                       um geeignete Zuchtlinien
                                                                       für eine optimierte Produktion
                                                                       von Absinth zu ermöglichen.

     40       Revue suisse Viticulture, Arboriculture, Horticulture | Vol. 53 (1): 32–40, 2021
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