SITUATION DE LA BORRELIOSE DE LYME AU MAGHREB - Semantic ...
←
→
Transcription du contenu de la page
Si votre navigateur ne rend pas la page correctement, lisez s'il vous plaît le contenu de la page ci-dessous
SITUATION DE LA BORRELIOSE
DE LYME AU MAGHREB
A. BOUATTOUR1*, A.GHORBEL2, A CHABCHOUB2 ET D. POSTIC3
1
Laboratoire de Microbiologie Vétérinaire, groupe Entomologie Médicale,
Institut Pasteur de Tunis, BP 74, 1002 Tunis Belvédère, Tunisie. ali.bouattour@pasteur.rns.tn
2
Service de pathologie médicale des équidés et des carnivores,
Ecole Nationale de Médecine Vétérinaire, 2020 Sidi Thabet Tunisie.
3
Centre National de Référence des Borrelia, Institut Pasteur Paris.
*
Auteur correspondant
RESUME ABSTRACT
La borréliose de Lyme due à Borrelia burgdorferi sl Many epidemiological studies were conducted for studying
compte aujourd’hui parmi les maladies émergentes dont Lyme borreliosis (LB) which represents a new global public
l’importance fait l’objet d’une attention croissante, par- health problem. It is now the most common vector-borne
ticulièrement dans les régions endémiques (Amérique du disease in Europe and North America. The causative agent
Nord et Eurasie). Borrelia burgdorferi sl is a bacterial species complex
Au Maghreb, quelques cas séro-cliniques de la borréliose comprising 12 delineated and named species.
de Lyme ont été décrits, ce qui a poussé certaines équipes In North Africa, few studies based on clinical and
à mener des investigations épidémiologiques relatives à serological features, have suggested that LB could occur.
cette pathologie au cours de ces dernières années. La col- Indeed, recent studies conducted in Tunisia, Algeria and
lecte des tiques, réalisée dans les sous-bois des régions Morocco have shown that Ixodes ricinus is present in cooler
humides du Maghreb (Tunisie, Algérie et Maroc), a per- and humid area of these regions. These studies also
mis de récolter Ixodes ricinus. La prévalence de l’infec- revealed that this species is a vector of B. burgdorferi sl with
tion par Borrelia burgdorferi sl, évaluée par IFI, varie de high prevalence of infection. Using IFI and PCR tests, the
50% à 60% chez les Ixodes adultes; elle est de 30 à 40 % mean rate of Borrelia-infection ranged from 50 to 60 % in
chez les nymphes et elle est inférieure à 2,5% chez les I. ricinus adult collected in Tunisia and Morocco and from
larves. Ces taux ont été également confirmés par PCR. Les 30 to 40% in nymphs; in contrast, the prevalence in larvae
souches véhiculées par ces Ixodes se sont révélées (PCR- is less than 2.5 %. Several strains of B. burgdorferi were
RFLP et séquençage) en majorité B. lusitaniae (Poti B2 et isolated from adult and nymph I. ricinus collected in
Poti B3) et très rarement B. garinii, B. burgdorferi ss et Tunisia and Morocco. The identification of these strains
B. valaisiana. Des anticorps anti-Borrelia ont été retrou- and DNAs directly extracted from Ixodes was done by PCR-
vés exceptionnelemant chez des sujets tunisiens et maro- RFLP and sequence analysis. The results showed that
cains testés par ELISA. Les rares sérums positifs ont été B.lusitaniae (genotypes Poti B2 and Poti B3) is the
également confirmés par Western-Blot. predominant species circulating in I. ricinus in Tunisia
and Morocco, B. garinii and B. burgdorferi ss and B
lusitaniae were also present but very rare. These results
provide the evidence for the existence of B. burgdorferi sl
in North Africa; however, the impact of LB in the human
population seem to be negligible and the seroprevalence of
Borrelia in forest workers (considered as population at
high risk) in Tunisia is less than 4%.
Mots clefs : Borrelia burgdorferi, Borrelia lusita- Key words: Borrelia burdorferi, Borrelia
niae, Ixodes ricinus, Prévalence de l’infection, lusitaniae, Ixodes ricinus, Prevalence of infection,
Maghreb, Tunisie, Maroc, Borréliose de Lyme. North Africa, Tunisia, Morocco, Lyme borreliosis.
A r c h s . I n s t . P a s t e u r T u n i s , 2004, 8 1 (1-4) 13SITUATION DE LA BORRELIOSE DE LYME AU MAGHREB INTRODUCTION EPIDEMIOLOGIE DE LA BORRELIOSE Inconnue il y a deux décennies, la borréliose de DE LYME Lyme compte aujourd’hui parmi les maladies émer- 1- ESPÈCES DE BORRELIA EN CAUSE gentes qui prennent de l’importance particulièrement Les spirochètes constituent l’un des 11 Phyla des dans les régions endémiques de l’hémisphère nord. Eubactéries décrits sur la base des ARN ribosomaux. Elle sévit dans les milieux tempérés, humides et boi- Ils appartiennent à l’ordre des Spirochetales au sein sés d’Amérique du Nord, d’Europe, de Russie, de desquels la famille des Spirochetaceae comporte 4 Chine et du Japon. C’est une anthropoonose sylvestre genres dont Borrelia. B. burgdorferi. Décrite initiale- dont l’agent causal, le spirochète Borrelia burgdorfe- ment comme une espèce unique, elle correspond en ri sensu lato (B. burgdorferi sl), est transmis par des fait à un complexe nommé Borrelia burgdorferi tiques du genre Ixodes. Borrelia circule dans les sensu lato comprenant actuellement 12 espèces géno- zones endémiques parmi la faune vertébrée sauvage. miques. En pénétrant dans ces foyers, l’homme ou les ani- En Europe, 6 espèces génomiques ont été décrites. B. maux domestiques peuvent être contaminés lors burgdorferi sensu stricto, B. garinii et B. afzelii exer- d’une piqûre de tique infestante. cent un pouvoir pathogène certain pour l’Homme et Jusqu’à présent, seulement trois espèces de Borrelia les animaux10,11. Les rares isolements de B. lusita- ont été décrites comme pathogènes pour l’homme; il niae12,13 et de B spielmani14,15, à partir de produits s’agit de B. afzelii responsable préférentiellement des pathologiques humains, font de ces deux espèces des manifestations cutanées tardives, B. garinii respon- pathogènes potentiels, alors que la pathogénicité de sable préférentiellement de symptômes neurolo- B. valaisiana16 n’est pas encore démontrée. giques et B. burgdorferi sensu stricto engendrant pré- Au Maghreb (Tunisie, Algérie et Maroc), les études férentiellement des manifestations articulaires1. menées au cours de ces dernières années ont permis Chacune de ces trois espèces donne lieu à l’érythème d’isoler quatre espèces de Borrelia chez les tiques migrant, manifestation précoce et la plus fréquente de Ixodes ricinus : B. lusitaniae avec ses divers géno- la maladie. types (Type PotiB2, Type TD12, Type PotiB3 et Type Sur le continent africain, la borréliose de Lyme ne MT26) qui représente environ 97% des souches iso- semble être décrite qu’en Afrique du Nord. En effet, lées, B. garinii et B. burgdorferi ss5,6,7,17. Cette derniè- un cas d’encéphalite aiguë à B. burgdorferi a été re n’a été isolée qu’au Maroc7 alors qu’en Tunisie, une signalé chez un enfant algérien2 et deux cas de bor- souche de B. valaisiana a été détectée chez I. ricinus réliose de Lyme ont été diagnostiqués chez deux récolté à Ain Draham (résultat non publié). patients marocains sédentaires chez qui, la maladie se Le cycle naturel de B. burgdorferi fait intervenir dif- manifestait par une paralysie faciale3. En Tunisie, férents stades d’I. ricinus et plusieurs hôtes réser- Aoun et al. 4 ont décrit29 cas de borréliose de Lyme voirs. dont la symptomatologie est dominée par des signes 2- LES VECTEURS neurologiques et articulaires. Ces cas ont été égale- La chaîne épidémiologique de la borréliose de Lyme ment confirmés par ELISA4. Les travaux récents menés comprend trois maillons essentiels : la bactérie dans le cadre de projets de recherche financés par le (Borrelia burgdorferi sl), le réservoir naturel et habi- Secrétariat d’Etat à la Recherche Scientifique de tuel (rongeurs, oiseaux, reptiles) et l’arthropode vec- Tunisie et la Communauté Européenne ont permis de teur qui est représenté essentiellement par les tiques déterminer la prévalence de l’infection d’I. ricinus par du genre Ixodes (vecteurs primaires) ou d’autres Borrelia, les espèces de Borrelia véhiculées par ces espèces de tiques (vecteurs secondaires). Bien que vecteurs ainsi que la séroprévalence de l’infection d’autres arthropodes puissent héberger B. burgdorfe- chez les forestiers de certaines régions de Tunisie5,6. Il ri, leur rôle vecteur reste mineur ou incertain. en est de même au Maroc7,8. Par ailleurs, l’impact de Les principaux vecteurs sont des tiques du genre cette zoonose sur les animaux domestiques reste très Ixodes appartenant toutes au groupe I. ricinus. peu étudié particulièrement en Tunisie9 , mais égale- L’espèce vectrice dépend de la situation géogra- ment dans le monde. phique du foyer. Ainsi aux Etats-Unis, sur la côte Est 14 A r c h s . I n s t . P a s t e u r T u n i s , 2004
A. BOUATTOUR ET COLL. et dans le Centre, le vecteur principal est Ixodes sca- dans les stations les plus humides (étage bioclima- pularis18 alors que sur la côte Ouest, c’est I. pacificus tique humide, sous-étage supérieur et inférieur à qui joue ce rôle19. hiver tempéré) avec les valeurs de pluviométrie les En Europe, le vecteur principal est I. ricinus20. Enfin plus importantes (de 900 à 1500 mm/an). De plus, en Afrique du Nord, I. ricinus est la seule espèce elles sont situées en altitude (600 à 700 m) et les tem- incriminée dans la transmission de la borréliose de pératures y sont relativement faibles. Quant au cou- Lyme5,6, 7,17. Dans cette région, la faune de tiques vert végétal, il correspond à une végétation forestière retrouvées sur le bétail est formée de 15 espèces de chênes liège et de chênes zeen. Le sous-bois est appartenant à 6 genres. Parmi ces espèces I. ricinus certes souvent dégradé par le déboisement et le sur- occupe les biotopes forestiers des zones humides21. pâturage et envahi alors par des espèces non appré- 3- BIOLOGIE D’IXODES RICINUS ciées du bétail telles que la fougère aigle (Pteridium Le cycle de vie d’I. ricinus est triphasique. A chacun aquilinum). La présence des bovins (où cette espèce des trois stades évolutifs, larve, nymphe et adulte, les a été trouvée) ainsi que d’une litière épaisse de tiques doivent se nourrir de sang d’un hôte pour feuilles mortes de chênes, constituant un microclimat effectuer leur mue. Ce repas sanguin est pris à humide et frais et donc un abri convenable pour les chaque stade sur un hôte indivudiellement différent. Ixodes, sont deux facteurs favorables à la présence de Le parasitisme des trois stades n’est pas inféodé à une cette espèce dans ces forêts21,22,23. espèce particulière de vertébrés. En effet, I. ricinus 4- LES RÉSERVOIRS est une tique dite télotrope : aux stades immatures, Une espèce animale est considérée comme réservoir les hôtes peuvent être aussi bien des reptiles que des lorsqu’elle participe significativement à la circulation oiseaux ou des mammifères, alors que les femelles du spirochète dans la nature. L’animal réservoir per- semblent se gorger préférentiellement sur de grands met non seulement la multiplication mais également mammifères. Ce cycle correspond donc à une suc- la persistance de la bactérie dans son organisme pen- cession de phases libres (digestion, mue, quête dant une longue durée24. Les tiques vectrices qui se d’hôtes et ponte au sol) et de phases parasitaires, gorgent sur cet animal réservoir acquièrent ainsi l’in- dites phases trophiques, de courte durée. fection par les spirochètes. En Tunisie, les hôtes préférentiels des adultes de cette Les borrélies sont maintenues dans la nature par un tique sont les bovins ; mais, elle parasite également cycle complexe de transmission zoonotique qui fait les ovins et les caprins qui pâturent dans les sous- intervenir une large variété de mammifères, d’oi- bois. En dehors du bétail, I. ricinus parasite aussi les seaux et de reptiles hôtes et de tiques essentielle- autres grands mammifères qui fréquentent son bioto- ment du genre Ixodes comme vecteurs. Ainsi, plus de pe. Nous l’avons ainsi observé, en nombre réduit, sur 300 espèces de vertébrés ont été identifiées comme des sangliers chassés dans les forêts du Nord tuni- étant des hôtes de cette tique mais moins que 50 de sien22. Ces adultes sont actifs en fin septembre jus- ces espèces sont impliquées dans l’écologie de B. qu’au mois de mars (automne-hiver). Les immatures burgdorferi. Les rongeurs ont été identifiés comme d’I. ricinus fréquentent les mêmes biotopes que les réservoirs de B. burgdorferi ss et de B. afzellii, alors adultes, entre avril juqu’au mois d’août, mais infestent que les oiseaux sont des réservoirs de B. valaisiana essentiellement les lézards, plus particulièrement et B. garinii20,25. Psammodromus algirus qui est très fréquent dans ces En Tunisie, lors d’une étude récente, nous avons biotopes22 ; mais, nous l’avons également observé sur montré que le lézard, Psammodromus algirus, joue certains oiseaux comme le merle noir (Turdus meru- le rôle réservoir de B. lusitaniae (Dsouli et al. sous la). press). Il est bien connu que le facteur limitant le plus impor- tant dans la distribution d’I. ricinus est l’humidité. Les LES FORMES CLINIQUES CHEZ LES trois stades de cette tique ne survivent que peu de ANIMAUX temps si l’hygrométrie baisse en-dessous de 70 %. La borréliose de Lyme est une zoonose et les borré- Ainsi au Maghreb, cette espèce n’est récoltée que lies sont maintenues dans la nature par un nombre Tome 8 1 (1-4) 15
SITUATION DE LA BORRELIOSE DE LYME AU MAGHREB
important de différentes espèces animales. fragments biopsiques (peau surtout en cas d’érythè-
Cependant, la plupart des infections semblent inap- me migrant, à la périphérie de celui-ci, en cas d’acro-
parentes. Chez les animaux domestiques, cette mala- dermatite ou de lymphome) de biopsie synoviale. La
die est décrite essentiellement chez les chevaux, les culture est réservée aux laboratoires spécialisés car
bovins et les chiens. elle est longue (3 à 4 semaines ou plus), délicate,
Chez les chevaux et les bovins, les symptômes les onéreuse et son rendement est extrêmement faible (0
plus fréquents sont : la perte de poids, la boiterie, la à 10 %). De ce fait, elle n’est pas utilisée en diagnos-
fièvre et le gonflement des articulations entraînant tic de routine29.
une rigidité chez l’animal. Dans les cas chroniques, Réaction de polymérisation en chaîne (PCR): la
des signes neurologiques telles que dépression et mise au point de la PCR a ranimé l’espoir d’une
encéphalite ont été notées chez les chevaux et des détection spécifique et rapide de B. burgdorferi sl
avortements chez les bovins26,27. dans les divers prélèvements (biopsie cutanée, LCR,
Chez le chien, la forme aiguë est caractérisée par de urine, liquide articulaire,…..) suivie d’une identifica-
la fièvre, de l’inappétit et de l’asthénie. Dans la forme tion de l’espèce en cause. Les connaissances récentes,
chronique, les manifestations cliniques sont domi- notamment celles isssues du séquençage du génome
nées par des troubles articulaires qui se traduisent par de ce spirochète, ont été utilisées pour sélectionner
des boiteries intermittentes migratoires touchant plusieurs séquences cibles pour l’amplification. Parmi
essentiellement le carpe28. celles-ci, citons le gène fla codant la flagelline30, le
Enfin, chez tous ces animaux, l’infection est souvent gène ospA31, le gène rpoB32, le gène rrs codant la sous-
suivie d’apparition d’anticorps anti-Borrelia. De nom- unité 16S33 et l’espace intergénique compris entre le
breux sujets piqués par des tiques infestées ne déve- gène codant la sous-unité 5S (rrf) et la sous-unité 23S
loppent jamais de borréliose mais deviennent séro- (rrl) de l’ARN ribosomal34.
positifs. 2- DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE INDIRECT
Actuellement, le diagnostic biologique indirect est
TECHNIQUES DE DIAGNOSTIC DE LA basé sur la mise en évidence d’anticorps; les
BORRELIOSE DE LYME recherches d’antigènes de B. burgdorferi sl ou l’ex-
Les résultats de la culture sont souvent décevants et ploration de la réponse immunitaire cellulaire spéci-
les techniques de biologie moléculaire restent encore fique n’ont pas d’application diagnostique de routine.
peu utilisées dans le diagnostic de routine. Par consé- Plusieurs méthodes sont employées ; certaines sont
quent, le diagnostic biologique de la borréliose de quantitatives (comme l’immunofluorescence indirecte
Lyme repose essentiellement sur la recherche des (IFI) et les techniques immunoenzymatiques (ELISA,
anticorps spécifiques. EIA)) et dont le but est de mettre en évidence la pré-
1- DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DIRECT sence d’anticorps à des taux significatifs ; d’autres
La recherche des spirochètes peut être effectuée dans sont qualitatives (Western blot) dont le but est d’étu-
différents prélèvements pathologiques (biopsie cuta- dier la nature des anticorps et ainsi confirmer les
née, liquide synovial ou mieux biopsie synoviale et résultats obtenus lors de la mise en oeuvre des
liquide céphalo-rachidien (LCR)) en fonction de la méthodes quantitatives35.
forme clinique observée. Cependant, cette sérologie présente de nom-
Examen direct: il concerne uniquement le LCR ou le breuses limites du fait :
liquide synovial qui sont examinés au microscope à •de la multiplicité des coffrets diagnostiques dis-
fond noir mais le test n’a jamais été rapporté positif. ponibles sur le marché et de la très grande inéga-
Mise en culture: l’isolement des Borrelia peut être lité de leurs performances,
réalisé en milieu spécial BSKH (milieu de Kelly modi- • du défaut de sensibilité de certains coffrets,
fié par Stoenner et Barbour, Harvard), incubé à 34°C. surtout en début de la maladie,
La croissance est de type microaérophile, avec un • de la fréquence des réactions croisées lors d’in-
temps de génération de 6 à 12 heures. La plus gran- fections virales, bactériennes ou parasitaires,
de chance de succès repose sur l’ensemencement de notamment en IgM.
16 A r c h s . I n s t . P a s t e u r T u n i s , 2004A. BOUATTOUR ET COLL.
Le test d’IFI : les borrélies, obtenues à partir de cul- donc recommandée pour confirmer un test de dépis-
tures riches sont fixées sur des lames pour IF. Les lames tage (ELISA ou IFI) positif ou douteux. En effet, le
sont mises à incuber avec les sérums à tester, puis les Western-blot permet une analyse qualitative des anti-
anticorps anti-Borrelia sont révélés par un anti-sérum corps. C’est, cependant, une méthode coûteuse et
fluorescent. Cette méthode est encore très utilisée pour techniquement délicate quant à la production de lots
la recherche des anticorps dans le sérum, le LCR et de bandes homogènes. Si les critères de positivité du
éventuellement dans le liquide articulaire. Elle est bien Western blot ne font pas encore l'objet d'un consen-
adaptée au diagnostic de routine; elle est peu coûteu- sus en Europe , des recommandations ont été édic-
se et peut être utilisée pour de petites séries. tées37 à la suite de nombreux travaux menés notam-
Cependant, elle est subjective, non automatisable et ment par le Consortium Européen38.
non standardisée. Elle est sensible mais manque de Dans une enquête sérologique menée sur 25 chiens
spécificité particulièrement dans le sérodiagnostic de la au Maroc, Jouda 8 a révélé que 25 % des sérums tes-
borréliose chez le chien et ce en raison de l’exposition tés par Western-blot réagissaient contre les antigènes
de cet animal à nombreux pathogènes qui montrent de B. garinii, B. afzelli et B. lusitaniae.
des réactions croisées avec B. burgdorferi, notamment
Treponema spp, Brachyspira sp., Leptospira spp36. DETECTION DES BORRELIA
Le test ELISA : plusieurs types de préparations anti- CHEZ LES TIQUES
géniques sont utilisées pour ce test. Ils diffèrent par : Dans les études épidémiologiques de la borréliose de
• la nature des antigènes utilisés, Lyme, plusieurs méthodes sont employées pour la
• le mode de préparation de ceux-ci, détection, l’identification et la caractérisation de B.
• la ou les souches, d’une ou de plusieurs burgdorferi sl chez les tiques. La prévalence de
espèces de B. burgdorferi sl d’où sont issus les Borrelia chez les tiques correspond au nombre de
antigènes. spécimens porteurs de Borrelia par rapport à la
L’ELISA permet de tester de grandes séries de prélè- population examinée.
vements avec une lecture finale automatisée et objec- 1- L’EXAMEN DIRECT
tive. Les tests ELISA sont donc bien adaptés aux Le principe de cette méthode est d’observer directe-
études épidémiologiques. Ils sont plus sensibles que ment, à l’aide d’un microscope à fond noir, les spiro-
l’IFI, mais présentent des inégalités de performance, chètes dans les intestins des tiques vivantes récoltées
selon la nature de l'antigène et surtout selon son à jeun. Ainsi, dans une goutte de PBS à 1% déposée
mode de préparation. De ce fait, spécificité et sensi- sur une lame porte-objet, on évacue le contenu intes-
bilité varient grandement selon les coffrets et selon tinal (les borrélies se localisent essentiellement au
les formes cliniques de la maladie37. niveau de l’intestin moyen) de la tique après avoir
L’ELISA reste le test de référence pour le diagnostic percé l’extrémité postérieure de la tique par une lame
de la maladie de Lyme puisqu’il permet de suspecter de bistouri. Le produit obtenu est observé entre lame
un diagnostic d’infection précoce (recherche des IgM) et lamelle au microscope à fond noir. Les spirochètes
et de déceler les infections tardives (dosage des Ig G sont reconnus par leur forme hélicoïdale. C’est un
totales). Toutefois, même avec un ELISA sensible, les examen rapide, simple, très peu coûteux mais qui
anticorps (IgM et IgG) peuvent n’être détectables présente l’inconvénient d’être non spécifique.
qu’après la troisième semaine alors qu’il existe une 2- LES TECHNIQUES
suspicion clinique de la maladie. D’IMMUNOFLUORESCENCE (IF)
Une étude sérologique réalisée par le test ELISA chez IFI : le contenu intestinal des tiques à tester est étalé
303 individus travaillant dans le milieu forestier des dans les puits des lames d’immunofluorescence, puis
régions humides de la Tunisie, a révélé la présence fixé à l’acétone. Sur chaque étalement de tique, on
d’anticorps anti-B. burgdorferi avec une séropréva- fait agir un immunsérum de lapin immunisé contre
lence de 4,9 % (travail en cours). les borrélies. La révélation des anticorps fixés sur les
Western blot : la technique d'immuno-empreinte éventuelles borrélies se fait par l’intermédiaire d’un
permet d’affirmer la spécificité des anticorps et est conjugué anti-immunoglobulines de lapin marqué à
Tome 8 1 (1-4) 17SITUATION DE LA BORRELIOSE DE LYME AU MAGHREB la fluorescéine. La présence de Borrelia dans les la digestion, par une enzyme de restriction des pro- tiques se traduit par une fluorescence jaune-vert pré- duits de PCR, nous permet d’identifier les différentes dominante à la périphérie de ces spirochètes. espèces par comparaison à des souches témoins IFD : la présence de Borrelia, sur les étalements de déterminées auparavant. tiques, peut être révélée directement par des immu- En Tunisie, pour la détermination de la prévalence de noglobulines anti-Borrelia marquées par l’isothiocya- Borrelia chez les tiques, nous avons procédé à l’am- nate de fluorescéine. Par ce test, la moyenne de la plification génomique de l’espace intergénique (spa- prévalence de B. burgdorferi chez les Ixodes récoltés cer) situé entre les deux copies des gènes rrl-rrf de au Maroc a été de 47,8%7, alors que la prévalence de Borrelia burgdorferi sl31. La prévalence de B. burg- l’infection par Borrelia, déterminée par IFI chez les I. dorferi sl, chez les adultes, nymphes et larves d’I. rici- ricinus récoltés au Nord de la Tunisie, est de 55,2% nus récoltés au Nord-Ouest du pays, est respective- chez les adultes, 43 % chez les nymphes et 0% chez ment de 53,1 ; 33,3 ; et 2,6 %6. Au Maroc, en utilisant les larves6. la même technique, Sarih et al.7 ont rapporté une pré- 3- L’ISOLEMENT ET LA CULTURE DE valence de Borrelia de 35% chez Ixodes. BORRELIA La digestion enzymatique, par les enzymes de restric- Les tiques vivantes subissent en premier lieu un lava- tion Mse I et Dra I des produits obtenus par amplifi- ge à l’alcool 70° pendant 10 min, puis un rinçage à cation (PCR-RFLP), a permis d’identifier B. lusitaniae l’eau distillée stérile. Sous la hotte, la tique est ensui- et B. garinii chez les Ixodes collectés aussi bien en te coupée en petits morceaux avec une lame de bis- Tunisie qu’au Maroc ainsi que B. burgdorferii ss au touri stérile, et introduite dans un tube contenant du Maroc5, 6, 7,8. BSK-H (Sigma) additionné d’antibiotiques (la rifampi- cine, le 5- fluoro-uracile, la fosfomycine….) afin CONCLUSION d’éviter les contaminations. La culture est incubée à Les résultats des travaux menés ces dernières années, 34°C et controlée de façon hebdomadaire par un exa- notamment en Tunisie et au Maroc, confirment la min (entre lame et lamelle) au microscope à fond présence de Borrelia burgdorferi sl dans les pays du noir pour observer le développement des spiro- Maghreb. Ces Borrelia, principalement l’espèce B. chètes. lusitaniae, sont véhiculées par la tique Ixodes ricinus En Tunisie, l’ensemencement de 311 I. ricinus dans avec des prévalences élevées. Cependant, le nombre du BSK-H a permis l’isolement de 15 souches de B. de cas cliniques ainsi que la séroprévalence de la bor- lusitaniae et d’une souche de B. garinii5. De même, réliose de Lyme chez les citoyens à risque, restent Sarih et al.7 ont pu isoler 26 souches de B. burgdor- faible. Il en est de même chez les animaux domes- ferii sl à partir de 218 I. ricinus récoltés à Taza au tiques chez qui aucune pathologie compatible n’a été Maroc. rapportée jusqu’à présent dans ces pays. Ceci pour- 4- LA TECHNIQUE DE PCR-RFLP rait être attribué d’une part à la faible densité des La réaction de polymérisation en chaîne (PCR) qui Ixodes vecteurs, comparée à celle observée en permet l’amplification spécifique de séquences Europe ou aux Etats Unis, et d’autre part au fait que nucléotides cibles est également utilisée pour la ces tiques véhiculent essentiellement B. lusitaniae détection de l’ADN de B. burgdorferi sl chez les dont la pathogénicité ne semble pas être importante. tiques. Pour cela, l’ADN est extrait de chaque tique à Néanmoins, une épidémio-surveillance continue et tester. Différentes méthodes permettent cette extrac- une prise en charge des cas suspects apporteront des tion : kit Quiagen, extraction au phénol chloroforme, informations nécessaires pour mieux comprendre lyse à la protéinase K…. l’impact de cette maladie dans ces régions. Plusieurs amorces disponibles permettent une ampli- fication spécifique des nucléotides cibles, caractéris- tiques de B. burgdorferi sl. La caractérisation de l’es- pèce génomique de Borrelia burgdorferi est réalisée par RFLP. Le profil de restriction obtenu à la suite de 18 A r c h s . I n s t . P a s t e u r T u n i s , 2004
A. BOUATTOUR ET COLL.
REFERENCES D. Grimont. (1992). Delineation of Borrelia
1- Van Dam A.P., Kuiper H., Vos K., burgdorferi sensu stricto, Borrelia garinii sp. nov.,
Widjojokusumo A., Dejongh B.M., Spanjaard and group VS461 associated with Lyme borrelio-
L., Ramselaar A.C.P., Kramer M.D. and J. sis. Int. J. Syst. Bacteriol., 42: 378-383.
Dankert (1993). Different genospecies of 11- Canica M. M., Nato F., Du Merle L., Mazie J. C.,
Borrelia burgdorferi are associated with distinct Baranton G. and D. Postic. (1993). Monoclonal
clinical manifestations of Lyme borreliosis. Clin. antibodies for identification of Borrelia afzelii sp.
Infect. Dis., 17: 707-717. Nov. associated with late cutaneous manifesta-
2- Rousselle C., Floret D., Cochat P., Regnier F. tions of Lyme borreliosis. Scand. J. Infect. Dis.,
et C. Wright (1989). Encéphalite aigüe à 25 : 441-448.
Borrelia burgdorferi (maladie de Lyme) chez un 12- Le Flèche A., Postic D., Girardet K., Péter O. and
enfant algérien. Pédiat., 44 : 265-269. G. Baranton. (1997). Characterization of Borrelia
3- Ouhabi H., Slassi I., El Aloui-Faris M., lusitaniae sp. nov. by 16S ribosomal DNA sequen-
Mossadaq R., Yahyaoui M. et T. Chkili (1994). ce analysis. Int. J. Syst. Bacteriol., 47: 921-925.
Paralysies faciales et maladie de Lyme. Arch. Inst. 13- Collares-Pereira M., Couceiro S., Franca I.,
Past. Maroc, 9 : 51-55. Kurtenbach K., Schäfer S. M., Vitorino L.,
4- Aoun K., Kechrid A., Lagha S., Zarrouk A. et Gonçalves L., Baptista S., Viera M. L., and C.
N. Bouzouaia. (1998). La maladie de Lyme en Cunha. (2004). First isolation of Borrelia lusita-
Tunisie, résultats d’une étude clinico-sérologique niae from a human patient. J. Clin. Microbiol.,
(1992-1996). Cahier de Santé, 8 : 98-100. 42:1316-1318.
5- Younsi H., Postic D., Baranton G. and A. 14- Richter D., Schlee D. B., Allgöwer R. and F. R.
Bouattour (2001). High prevalence of Borrelia Matuschka. (2004). Relationships of a novel
lusitaniae in Ixodes ricinus ticks in Tunisia. Eur. Lyme disease spirochete, Borrelia spielmani sp.
J. of Epid., 17 : 53-56. nov., with Its hosts in Central Europe. Appl.
6- Bouattour A., Younsi H., Aoun K., Mokni M. Environ. Microbiol., 70: 6414-6419.
et D. Postic (2003). Prévalence de Borrelia burg- 15- Wang, G. Q., A. P. van Dam, and J. Dankert.
dorferi agent de la Borreliose de Lyme chez (1999). Phenotypic and genetic characterization
Ixodes ricinus en Tunisie. Infections : Bul. Soc. of a novel Borrelia burgdorferi sensu lato isolate
Tun. Path. Inf. Année 3 (6), 21-24. from a patient with Lyme borreliosis. J. Clin.
7- Sarih M., Jouda F., Gern L. and D. Postic. Microbiol., 37:3025-3028.
(2003). First isolation of Borrelia burgdorferi 16- Wang G., van Dam A. P., Le Flèche A., Postic
sensu lato from ticks in Morocco. Vect. borne D., Péter O., Baranton G., de Boer R.,
Zoon. Dis., 3: 133-139. Spanjaard L. and J. Dankert. (1997). Genetic
8- Jouda F. (2003) : Etude écologique de Borrelia and phenotypic analysis of Borrelia valaisiana sp.
burgdorferi s. l., agent de la borréliose de Lyme nov. (Borrelia genomic groups VS116 and M19).
en Suisse et au Maroc : distribution et prévalence Int. J. Syst. Bacteriol., 47: 926-932.
d’infection chez Ixodes ricinus. Thèse es Sciences, 17- Gern L., Bouattour A., Younsi H., Jouda F.,
Fac. Sc., Université de Neuchateul, 142p. Godfroid E., Alem A., Sarih M. et D. Postic.
9- Bouattour A., Chabchoub A., Sahli J., Younsi (2002). Lyme Borreliosis in North Africa, risk assess-
H., Landoulsi F., Ghorbel A. et L. Messadi ment. Poster, presented in the IX International
(2001). Contribution à l’étude de l’effet pathogè- Conference on Lyme borreliosis and other tick-
ne après inoculation expérimentale chez le chien borne diseases, New York. August 18-22,.
de 2 souches de Borrelia (Borrelia lusitaniae et 18- Burgdorfer W. and K. L. Gage (1986). Animal
Borrelia garinii) isolées en Tunisie. Rev. Méd. experiments and ecology. Susceptibility of the
Vét., 152 (4) : 291-296. black-legged tick, Ixodes scapularis, to the lyme
10- Baranton G., Postic D., Saint Girons I., disease spirochete, Borrelia burgdorferi. Zbl.
Boerlin P., Piffaretti J. C., Assous M. and P. A. Bakt. Hyg. A. 263:15-20.
Tome 8 1 (1-4) 19SITUATION DE LA BORRELIOSE DE LYME AU MAGHREB
19- Lane R. S., and J. E. Loye. (1989). Lyme disease (Commission des Laboratoires de Référence et
in California: Interrelationship of Ixodes pacificus d’Expertise de l’Institut Pasteur). Edit. Inst
(Acari: Ixodidae), the western fence lizard Pasteur de Paris, France, 67-107.
(Scelporus occidentalis) and Borrelia burgdorfe- 30- Johnson B.J.B., Happ C.M., Mayer L.W. and J.
ri. J. Med. Entomol. 26:272-278. Piesman (1992). Detection of Borrelia burgdor-
20- Gern L. and P.-F. Humair (2002). Ecology of feri in ticks by species-specific amplification of
Borrelia burgdorferi sensu lato in Europe, pp. the flagellin gene. Am. J. Trop. Med. Hyg., 47 (6):
149-174. In Lyme borreliosis: Biology, epidemio- 730-741.
logy and control (eds J. Gray, O. Kahl, R.S. Lane 31- Demaerschalck I., Ben Messaoud A., De Kesel
and G. Stanek), CABI Publishing. M., Hoyois B., Lobet Y., Hoet P., Bigainon G.,
21- Bouattour A. (2002). Clé dichotomique et iden- Bollen A. and E. Godfroid (1995). Simultaneous
tification des tiques (Acari : Ixodidea) parasites presence of different Borrelia burgdorferi genos-
du bétail au Maghreb. Archs. Inst. Pasteur de pecies in biological fluids of Lyme disease
Tunis, 79 (1-4) : 43-50. patients. J. Clin. Microbiol., 33 (3) : 602-608.
22- Bouattour A. (2001). Rôle de Hyalomma detri- 32- Lee S., Kim B., Kim J., Park K., Kim S. and Y.
tum dans la transmission de Theileria annulata. Kook (2000). Differentiation of Borrelia burgdor-
Thèse Doc. Biol., Fac. Sc. de Tunis, pp 257. feri sensu lato on the basis of Rna polymerase
23- Bouattour A., Ghammam M., Darghouth M., Gene (rpoB) sequences. J. Clin. Microbiol., 38
Touil M., Tahri M. et F.Ben Hamouda (2004). (7) : 2557-2562.
Séroépidémiologie de la babésiose bovine à 33- Marconi R. T. and C. F. Garon. (1992).
Babesia divergens en Tunisie. Rev. Elev. Méd. Development of polymerase chain reaction pri-
Vété des Pays Trop., 57, 1-2 mer sets for diagnosis of Lyme disease and for
24- Gern, L., A. Estrada Pena, F. Frandsen, J. S. species-specific identification of Lyme disease
Gray, T. G. T. Jaenson, F. Jongejan, O. Kahl, E. isolates by 16S rRNA signature nucleotide analy-
Korenberg, R. Mehl and P. A. Nuttall. (1998). sis. J. Clin. Microbiol., 30:2830-2834.
European reservoir hosts of Borrelia burgdorferi 34- Postic D., Assous M.V., Grimont P.A.D. and G.
sensu lato [Review]. Zbl. Bakt. 287: 196-204. Baranton. (1994). Diversity of Borrelia burgdor-
25- Kurtenbach, K., H. Kampen, A. Dizij, S. feri sensu lato evidenced by restriction fragment
Arndt, H. M. Seitz, U. E. Schaible and M. M. length polymorphism of rrf (5S)-rrl (23S) interge-
Simon. (1995). Infestation of rodents with larval nic spacer amplicons. Int. J. Syst. Bacteriol., 44
Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) is an important (4) : 743-752.
factor in the transmission cycle of Borrelia burg- 35- Wilske B. (2003). Diagnosis of Lyme Borreliosis
dorferi s. l. in German woodlands. J. Med. in Europe. Vect. Borne Zoo. Dis., 3:215-227
Entomol., 32: 807-817 36- Skotarczak B. (2002). Canine borreliosis-
26- Parker J.L. and K.K. White. (1992). Lyme bor- Epidemiology and diagnostics. Ann.Agric.
reliosis in cattle and horses : a review of the lite- Environ. Med., 9, 137-140
rature. Cornell. Vet., 82 (3) : 253-274. 37- Hauser, U., Lehnert G., Lobentanzer R. and B.
27- Lischer C.J., Leutenegger C.M., Braun U. and Wilske. (1997). interpretation criteria for standar-
H. Lutz. (2000). Diagnosis of Lyme Disease in dized Western blot for three European species of
two cows by the detection of Borrelia burgdorfe- Borrelia burgdorferi sl. J. Clin. Microbiol., 34 :
ri DNA. Vet. Rec., 146 : 497-499. 1353-1354.
28- Kornblatt A. N., Urband P. H. and A. C. 38- Roberston J., Guy E., Andrews N., Anda P.,
Steere. (1985). Arthritis caused by Borrelia burg- Granström, Hauser U., Moosmann Y., Sambri
dorferi in dog. J. Am. Vet. Med. Assoc., 186, 960- V., Schllekens J., Stanek G. and J. Gray (2000).
964. A European multicenter study of immunoblotting
29- Baranton G., Postic D., (1989). Méthode et in serodiagnostis of Lyme borreliosis. J. Clin.
laboratoire : Leptospirose-Borréliose de Lyme Microbiol., 38 : 2097-2102.
20 A r c h s . I n s t . P a s t e u r T u n i s , 2004Vous pouvez aussi lire
