LA BESNOITIOSE BOVINE : ACTUALITES EPIDEMIOLOGIQUES ET DIAGNOSTIQUES. STRATEGIES DE CONTRÔLE.
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LA BESNOITIOSE BOVINE : ACTUALITES EPIDEMIOLOGIQUES ET DIAGNOSTIQUES. STRATEGIES DE CONTRÔLE. Ph. JACQUIET1, J.P. ALZIEU2, E. LIENARD1, R. MALAVIEILLE2, A. SALEM1, C. GRISEZ1, F. PREVOT1, J.P. BERGEAUD1, X. DESCLAUX2, Ph. DORCHIES1, M. FRANC1 . 1 : Laboratoire de Parasitologie, ENV Toulouse 2 : LVD de l’Ariège, Foix FNGDS, Maisons-Alfort, 26 octobre 2010
FACE A L’EMERGENCE DE LA BESNOITIOSE BOVINE… • Savoir reconnaître précocement les signes cliniques de la besnoitiose bovine • Comment apprécier l’importance de la besnoitiose dans un troupeau ? • Quelles solutions peut-on proposer pour enrayer l’inquiétante progression de la maladie ?
LE CYCLE MONOXÈNE DE BOVIN À BOVIN DOMINANT : L’IMPORTANCE DE LA TRANSMISSION VECTORIELLE. Cycle hétéroxène Reproduction sexuée chez le chat Chats ? Cycle homoxène Transmission entre bovins Oocystes Rôle des insectes hématophages non sporulés Transmission horizontale ? Kystes tissulaires Oocystes Transmission verticale : non Kystes tissulaires sporulés Cysts Kystes Cysts N° 3 3
LE CYCLE DE BESNOITIA BESNOITI (2) Formation des kystes à bradyzoïtes dans les fibroblastes et histiocytes de divers tissus conjonctifs.
LE CYCLE DE BESNOITIA BESNOITI (3) Kystes (0,5 à 1 mm / 2 mm) dans le derme, tissus sous-cutanés, fascia et même dans certaines muqueuses Persistance chez le bovin jusqu’à dix ans
LA BESNOITIOSE BOVINE : L’INFECTION TRÈS FRÉQUENTE, LA MALADIE PLUS ALEATOIRE. Le plus souvent asymptomatique… ? temps contamination Phase fébrile – phase des oedèmes – phase chronique Tachyzoïtes dans le sang Bradyzoïtes dans les kystes N° 7
LES SYMPTOMES DE LA BESNOITIOSE BOVINE 1 . LA PHASE FEBRILE (3 à 10 jours) • Epiphora • Jetage séreux • Hyperthermie (40 – 41°C) • Etat congestif marqué ( BPIE, FCO, CORYZA GGX) N° 8
LA BESNOITIOSE BOVINE = TABLEAU CLINIQUE ET LESIONNEL TRES PARTICULIER 1 – La phase fébrile (3 à 10 jours) Tableau congestif extrêmement marqué
Phase fébrile Apparition soudaine 41 – 42°C Anorexie Arrêt de la rumination Chute de la production de lait Photophobie Epiphora Diagnostic différentiel : -fièvre catarrhale -coryza gangréneux Attention : -Dans la plupart des cas, la sérologie est encore négative !!! - Nécessité d’un test PCR (tachyzoïtes dans le sang)
LA BESNOITIOSE BOVINE = TABLEAU CLINIQUE ET LESIONNEL TRES PARTICULIER 2 – La phase d’Œdèmes (1 à 2 semaines) •Oedèmes du fanon et en régions déclives •Peau chaude et douloureuse •Anorexie •Adénomégalie superficielle
Phase des oedèmes Température normale Hypertrophie des nœuds lymphatiques Oedèmes de la tête, des membres… Peau chaude, épaissie et douloureuse
LES SYMPTOMES DE LA BESNOITIOSE BOVINE 2 . LA PHASE D’OEDEMES (1 à 2 semaines) • Oedèmes en zones déclives • Température normale • Démarche difficile • Peau chaude et douloureuse ( FCO, EHRLICHIOSE) N° 13
Spermatozoïdes normaux Photos : Varda Shkap Besnoitiose chez un taureau : spermatozoïdes affectés
Phase de sclérodermie
LA BESNOITIOSE BOVINE = TABLEAU CLINIQUE ET LESIONNEL TRES PARTICULIER 3 – La phase de dépilations et de sclérodermie Epaississement cutané avec hyperkératose Très marqué sur la tête et l’encolure
LES SYMPTOMES DE LA BESNOITIOSE BOVINE 3 . LA PHASE DE DEPILATIONS ET DE SCLERODERMIE • Épaississement cutané durable « Peau d’éléphant » • Crevasses • Dépilations • Amaigrissement ( GALES, Carence en Zn) N° 19
LES SIGNES CUTANES DE SCLERODERMIE PEUVENT REGRESSER ET LAISSER PENSER A UNE GUERISON… … erreur ! On ne guérit jamais d’une besnoitiose… Et on reste un réservoir pérenne de kystes !
LA BESNOITIOSE BOVINE = TABLEAU CLINIQUE ET LESIONNEL TRES PARTICULIER 4 – La phase terminale Si survie • Perte progressive du pelage • Emaciation irréversible • Decubitus fréquent Valorisation faible à nulle à l’abattoir Euthanasie inévitable
LA BESNOITIOSE BOVINE = TABLEAU CLINIQUE ET LESIONNEL TRES PARTICULIER 4 – La phase terminale Evolution jusqu’à un état catastrophique → Cachexie → Modification des aplombs des membres → Lésions de décubitus Euthanasie pour abréger les souffrances
LA BESNOITIOSE BOVINE DONNEES D’EPIDEMIOLOGIE
EPIDEMIOLOGIE DE LA BESNOITIOSE BOVINE EN FRANCE • Atteinte clinique CAS DE BESNOITIOSE EN FONCTION DE préférentielle des L'AGE (LEGRAND, 2003) jeunes bovins de 300 275 plus de 2 ans EFFECTIFS DE CAS 250 CLINIQUES • Pas de 200 prédisposition 150 raciale particulière 100 60 50 12 • Mâles plus 0 sévèrement Moins de 2 Entre 2 et 4 4 ans et plus atteints ans ans AGE • Expression aléatoire dans les élevages sédentaires MAIS maximale dans les cheptels transhumants ← Insectes piqueurs ← Regroupement de cheptels de statuts sanitaires différents
UNE SAISONNALITE DE PLUS EN PLUS ELARGIE… UNE GRANDE SAISONNALITE DES CAS CLINIQUES (En Ariège, avant les années 2000 ) (LEGRAND, 2003) 30 Nombre de cas 25 20 1995 15 1996 10 1997 1998 5 0 t r r ût in il ai s e ill e ie ie r ar br ju av m ao nv vr ju em m fé ja pt se
Saisonnalité étendue des cas cliniques en PACA à partir de 2005 Source : FRGDS PACA
LA BESNOITIOSE : UNE MALADIE VECTORIELLE • Démontrée expérimentalement • Transmission mécanique – ≠ de la FCO (transmission biologique avec multiplication dans le vecteur) – Piqûres multiples et repas interrompus pour assurer la transmission du parasite • Les espèces impliquées : – Taons, mouches d’étable ou stomoxes – Autres ?
Taon Haematobia irritans Stomoxe
Repas sanguins de stomoxes sur bovin Transmission vectorielle : Démontrée expérimentalement Maximum de cas cliniques pendant la saison d’activité des Tabanides Rôle des stomoxes très probable en stabulation, période d’activité plus longue
Dynamique saisonnière des populations de Stomoxys calcitrans (plaine de la Garonne)
EXISTE-T-IL DES BOVINS PLUS DANGEREUX QUE D’AUTRES ? • OUI !, démontré expérimentalement • OUI !, la richesse du derme en kystes à bradyzoïtes varie d’un individu à l’autre Les sujets ayant connu une phase clinique présentent une densité très supérieure en kystes à bradyzoïtes, en particulier dans la peau !!
OÙ LA BESNOITIOSE A-T-ELLE ETE DIAGNOSTIQUEE EN FRANCE ? CRITERES : 1. Départements présentant au moins un cheptel infecté. 2. On distingue des cas sporadiques sur cheptels isolés et des situations de foyers avec plusieurs cheptels infectés
REPARTITION GEOGRAPHIQUE DE LA BESNOITIOSE BOVINE AUTOUR DES ANNEES 90 = ENDEMIQUE = APRES 1990 = ERRATIQUE = AVANT 1990
2010 Suspicion Zone clinique d’enzootie sans confirmation sérologique Zone d’émergence Sources : et de diffusion -Ecoles Vétérinaires de Nantes et de Toulouse Cas -Laboratoires sporadiques vétérinaires départementaux…
UNE DIFFUSION EUROPEENNE ÉLARGIE POUR LA BESNOITIOSE. • Caractère invasif marqué vers l’Europe du Nord (Allemagne) mais Zone d’enzootie aussi en Zone d’émergence Espagne et en Italie (2009) • Maladie vectorielle émergente officiellement reconnue par l’EFSA (2010) La besnoitiose bovine est devenue un problème européen N° 38
LA BESNOITIOSE BOVINE - LE DIAGNOSTIC CLINIQUE - LE DIAGNOSTIC NECROPSIQUE - LE DIAGNOSTIC EXPERIMENTAL
LA BESNOITIOSE BOVINE LE DIAGNOSTIC CLINIQUE • DIAGNOSTIC DELICAT DURANT LA PHASE FEBRILE écarter br. pn inf, FCO, coryza gangreneux, ehrlichiose → dans le doute, en région infectée, toujours faire des sulfamides en première intention avec autres traitements • DIAGNOSTIC UN PEU PLUS FACILE EN PHASE D’OEDEMES écarter FCO, Ehrlichiose • DIAGNOSTIC EVIDENT EN PHASE DE SCLERODERMIE Le pronostic médical est corrélé à la précocité du diagnostic clinique
DE LA PRECOCITE DU PREMIER DIAGNOSTIC DEPEND SOUVENT L’AVENIR DU TROUPEAU Diffusion insidieuse et rapide de la besnoitiose : 7 à 12% de cas cliniques et… 66% de séropositifs en deux ans !
LA BESNOITIOSE BOVINE LE DIAGNOSTIC EXPERIMENTAL (DE LABORATOIRE) UN INTERÊT MÉDICAL PRÉCOCE TRÈS LIMITÉ ( en l’attente d’une méthode PCR) UN INTERÊT MAJEUR DANS LA GESTION SANITAIRE → définition cheptel infecté / cheptel non infecté → détection des bovins infectés (f.inapparentes) → évaluation de la prévalence (sérologie ELISA) ● choix de stratégie sanitaire
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Pour le diagnostic précoce de la besnoitiose (phase fébrile) Diagnostic moléculaire (q RT-PCR) (étude en cours) Mise en évidence de l’ADN du parasite (tachyzoïte) dans le sang circulant
Mise en évidence directe des kystes de B. besnoiti à l’autopsie
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Histologie et RT-PCR sur un prélèvement de peau Phase chronique N° 47
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Kystes sur la sclère Sous estimation très importante de la prévalence de la besnoitiose dans un cheptel Méthode de détection insuffisante Phase chronique N° 48
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Western blot Besnoitia besnoiti = test de référence (Cortes et al., 2006) « Gold standard » Lourd à mettre en œuvre, 20 euros le point Parasite en culture, purification des parasites sur colonne de chromatographie… Laboratoires spécialisés : ENV Toulouse Phase chronique N° 49
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Méthode Western Blot • Après suivi clinique : Détection plus précoce de la réponse Ac (15-21 jours après début de phase fébrile) par rapport au test ELISA Prionics 1.0, premier test étudié et validé (une à deux semaines de délai supplémentaire) • Indispensable pour confirmation initiale de l’infection par Besnoitia besnoiti dans un troupeau
LE SERODIAGNOSTIC PAR ELISA • Différentes trousses de diagnostic disponibles : – Kit Prionics : PrioCHECK® Besnoitia Ab (Se et Sp = 98%) – Kit ID Vet : ID Screen Besnoitia Indirect ® (Se et Sp = 100%) • Stratégies optimales d’utilisation : – Cas cliniques • Phase fébrile et d’oedèmes : non opérant • Phase de sclérodermie débutante : +++ – Infections inapparentes • Dans le cadre d’une enquête de séroprévalence globale
LE SERODIAGNOSTIC PAR ELISA Observations de terrain avec le Test PrioCHECK® Besnoitia Ab • Délais de détection variables après la contamination : – 4 semaines après une phase clinique aiguë – Non déterminée lors d’infections inapparentes • Cinétique d’anticorps variables selon individus : – Une probable baisse hivernale du taux d’Ac – Quelques animaux ont des titres anticorps fluctuants autour du seuil de positivité – Taux d’Ac très élevés chez les animaux atteints cliniquement et/ou porteurs de kystes oculaires
DIAGNOSTIC DE LA BESNOITIOSE BOVINE Evolution du taux d'anticorps (Priocheck Besnoitia ) chez deux bovins ayant présenté une phase clinique % d'anticorps / témoin positif 250 Phase aiguë 205 Phase aiguë 8807 200 Priocheck Besnoitia Ab 150 205 (ELISA) 100 8807 50 0 01/03/2008 01/05/2008 01/07/2008 01/09/2008 01/11/2008 01/01/2009 01/03/2009 01/05/2009 01/07/2009 01/09/2009 01/11/2009 Phase chronique dates Un minimum de trois-quatre semaines avant d’avoir une séroconversion après le début de la phase clinique N° 53
Nombre cumulé de séroconversions au cours du temps (suivi longitudinal d’un groupe de 40 séronégatifs en Ariège) 2/3 des animaux nouvellement contaminés l’ont été au printemps et au début de l’été Nombre cumulé de séroconversions 35 30 25 * 20 15 10 * 5 0 * Cas clinique 26 5 juin 22 juil. 23 sept. 4 déc. 16 mars 12 mai 16 juil 06 o ct 10 déc 23 avril mars 08. 08. 08. 08. 09. 09. 09. 09. 09. 10. 08. Dates d’analyses sérologiques
Nombre total de stomoxes capturés pour six pièges Vavoua 100 120 140 160 180 0 20 40 60 80 26/03/2008 26/05/2008 26/07/2008 2008 26/09/2008 26/11/2008 26/01/2009 0 0 0 0 0 0 26/03/2009 0 26/05/2009 Dates de piégeage 2009 0 26/07/2009 évaluée par piégeage Vavoua 26/09/2009 26/11/2009 0 26/01/2010 2010 Évolution saisonnière de la densité apparente de S. calcitrans 26/03/2010
LA BESNOITIOSE BOVINE QUELLE CONDUITE ADOPTER ?
LA SEROPREVALENCE Élément clé de la détermination du statut sanitaire d’un cheptel . Prélever tous les bovins de plus de six mois d’âge . Dépistage ELISA . Confirmation des cas douteux en Western Blot Étude en zone d’émergence récente Diversité épidémiologique selon les élevages Influence du facteur âge
Répartition des animaux positifs et négatifs par cheptel en sérologie positifs besnoitiose dans 11 élevages d'un département récemment infecté négatifs 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% Ch1 Ch2 Ch3 Ch4 Ch5 Ch6 Ch7 Ch8 Ch9 Ch10 Ch11 Tous
La situation très contrastée de 9 exploitations (A-I) voisines dans une zone d’émergence de la besnoitiose bovine 9 exploitations Nb d’animaux % d’animaux % DO extrêmes voisines analysés positifs = anticorps SEROPREVALENCE (Ax + seulement) A 67 69% 23-110% B 54 55% 21-99% C 122 46% 20-83% D 143 43% 21-151% E 158 25% 20-120% F 44 14% 25-64% G 79 5% 28-59% H 46 4% 34-88% I 35 3% 48%
Nombre d'animaux positifs et négatifs en sérologie besnoitiose selon les tranches d'âge, dans 11 élevages d'un département récemment infecté (enquête 2009-2010) 250 200 Nombre d'animaux 150 positifs 100 négatifs 50 0 < 12 mois 12 à 24 mois 24 à 48 mois 48 à 72 mois 72 à 96 mois > 96 mois Age (mois)
DO Moyenne des animaux positifs en sérologie besnoitiose par tranche d'âge dans 11 élevages d'un département récemment infecté 100 90 80 70 60 DO en % 50 40 30 20 10 0 < 12 mois 12 à 24 24 à 48 48 à 72 72 à 96 > 96 mois mois mois mois mois 4 anx 21 anx 58 anx 68 anx 48 anx 67 anx
LE TRAITEMENT DE LA BESNOITIOSE BOVINE 1 – Une pharmacopée spécifique des plus réduites • Sulfamidothérapie Sulfadimérazine : 150 à 200 mg/kg de PV Sulfadimethoxine : 60 à 80 mg/kg de PV • Oxytetracycline LA : efficace à 200 mg/kg de PV chez … la gerbille !! • (Toltrazuril : posologie ?) 2 – L’impact des anti-inflammatoires et des diurétiques … en l’absence d’un vaccin disponible … en l’absence d’une chimio-prévention efficace
L’EXTENSION DE LA BESNOITIOSE : UN CONSTAT, DE NOMBREUSES QUESTIONS • Rôle du commerce des bovins • Rôle majeur de la transhumance • Interrogations sur le cycle biologique actuellement pas d’implication de la faune sauvage et difficultés de reproduire le cycle chez le chat • Quel rôle réel des insectes piqueurs dans la diffusion ? Rayon d’action plutôt limité (hors transport passif) Période d’activité allongée (réchauffement climatique)
QUELLES STRATEGIES DE CONTRÔLE ?
LA BESNOITIOSE BOVINE : UNE STRATEGIE DE CONTRÔLE PROPRE A CHAQUE CHEPTEL. CAS DES CHEPTELS INFECTES (1) : PRINCIPES DE BASE • Élimination des animaux malades • Élimination des animaux porteurs de kystes • Évaluation de la séroprévalence Contrôle sérologique de tous les bovins âgés de plus de 6 mois. N° 65
LA BESNOITIOSE BOVINE : UNE STRATEGIE DE CONTRÔLE PROPRE A CHAQUE CHEPTEL CAS DES CHEPTELS INFECTES (2) • SEROPREVALENCE BASSE (< 10 %) Prophylaxie sanitaire : élimination de tous les bovins séropositifs. Contrôles sérologiques à l’achat. • SEROPREVALENCE ELEVEE (> 30 %) Évolution vers la stabilité endémique en minimisant l’impact économique. Limiter les cas cliniques / Contrôle des insectes vecteurs N° 66
LA BESNOITIOSE BOVINE : UNE STRATEGIE DE CONTRÔLE PROPRE A CHAQUE CHEPTEL. CAS DES CHEPTELS INDEMNES • CONTRÔLES « INDISPENSABLES » À L’ACHAT Sur tous les bovins de plus de 5 – 6 mois d’âge (y compris engraissement) Refaire (si possible), contrôle 6 semaines plus tard. • RIGUEUR DANS LE CONTRÔLE INSECTICIDE Contrôle d’été incontournable (Tabanidés, Stomoxes). Contrôle des Stomoxes en étable / Hors sol N° 67
Conclusions • Une progression non stop en France depuis le début des années 2000 + une extension en Europe • Pertes économiques +++ en zone d’émergence récente • Des problèmes à venir de commercialisation des animaux venant de zones infectées ? • Nécessité de mesures rapides pour limiter (éradiquer ?) la besnoitiose dans les nouveaux foyers • La besnoitiose est une maladie qui s’achète : attention aux introductions !!!
Study of an infected population • 1st clinical case September 2001 • Dead animals due to besnoitiosis: 5 in 2002, 12 in 2003, 7 in 2004, 2 in 2005 • 1st sample collection October 2003 – 326 animals, 36% IIF +; 4% HP +, 16% PCR + • 2nd sample collection April 2005 – 316 animals, 70% IIF + • Among the 230 animals that we found in the population at both moments the proportion of positives evolved from 40% to 66% • Among the 86 new animals it was 76% (84% if the 18 animals introduced are not considered)
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