SPEED DUO FELV-FIV SPEED FELV SPEED FIV
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DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 1 Speed® Duo FeLV-FIV Speed® FeLV Speed® FIV
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 2 Français ................................................. P 3 English ................................................... P 6 Espanioles.............................................. P 9 Italiano................................................... P 12 Português ............................................... P 15 Manipulation...........................................P 19 2
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 3 USAGE IN VITRO UNIQUEMENT FRANÇAIS INTERET CLINIQUE Le virus de la leucose féline (FeLV) et le virus de l'immunodéficience féline (FIV) sont deux rétrovirus de répartition mondiale. Le diagnostic différentiel entre le FeLV et le FIV est cliniquement difficile car les symptômes sont très variables et ils sont précé- dé d’une phase asymptomatique plus ou moins longue ( existence de porteurs sains). Les tests Speed® font appel à des anticorps monoclonaux et polyclonaux diri- gés contre un épitope de la capside P27 du FeLV (détection du FeLV) et à un pepti- de synthétique reproduisant un site antigénique immunodominant de la glycopro- téine transmembranaire GP 40 de l'enveloppe du FIV (détection des anticorps anti FIV). II est acquis que l'infection par le FIV entraîne un Syndrome d'Immunodéficience Acquise se caractérisant par des troubles très semblables à ceux observés chez les patients infectés par le HIV. Mais le FIV est sur le plan génétique et antigénique différent du HIV, et ne peut en aucun cas infecter l'homme. PRINCIPE Speed® Duo FeLV-FIV, Speed® FeLV et Speed® FIV sont des tests qualitatifs, rapides, en une seule étape, basés sur le principe de l'immunochromatographie Pour chaque test, il suffit de déposer une goutte d'échantillon (sang total avec ou sans anticoagu- lant, sérum ou plasma). Lorsque l'échantillon traverse le papier absorbant, les anti- corps fixés aux particules colorées se lient à l'antigène P27 du FeLV (partie FeLV) et aux anticorps de chat anti FIV (partie FIV) présents dans l'échantillon. Ces complexes antigène-anticorps ainsi formés migrent sur la membrane et produi- sent une bande rose au niveau des anticorps spécifiques anti-FeLV ou au niveau du peptide synthétique pour le FIV (partie médiane de la fenêtre). Le mélange continue à migrer sur le support et atteint alors une zone de contrôle à l'extrémité de la fenêtre. A ce niveau, les particules colorées forment une bande de contrôle rose, ce qui confirme la bonne réalisation du test. PRESENTATION NOM DU PRODUIT REF/QUANTITE MATERIEL pour 1 test Speed® Duo FeLV-FIV DSP 6, DSP 12, DSP 20 1 cellule-test DSP 30, DSP 50 1 pipette Speed® FeLV LSP 6. LSP 12, LSP 20 1 flacon de réactif Speed® FIV FIV 6, FIV 12, FIV 20 1 notice 3
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 4 PROTOCOLE OPERATOIRE ⇒ POUR CHAQUE TEST PRÉVOIR : Une cellule-test, une pipette à usage unique et le flacon de réactif. 1/ DÉPÔT DE L'ÉCHANTILLON • Pour le sang total avec anticoagulant, sérum et plasma : A l'aide d'une pipette à usage unique maintenue en position verticale, déposer une goutte d'échantillon (40ml) dans le puits échantillon (circulaire). • Pour le sang total sans anticoagulant : Déposer immédiatement 2 gouttes dans le puits échantillon directement avec l'aiguille de prélèvement. 2/ DÉPÔT DU RÉACTIF • Ajouter le réactif immédiatement après le dépôt de l’échantillon • Maintenir le flacon de réactif en position verticale et ajouter 5 gouttes entières de réactif dans le puits échantillon. • Si au bout de 2 minutes, la migration se fait difficilement dans la fenêtre de lecture, rajouter 2 gouttes de réactif dans le puits échantillon. 3/ LECTURE ET INTERPRETATION DES RESULTATS : LECTURE - Lire le résultat entre 10 et 15 minutes après le dépôt de l’échantillon (durée de la migration). - UN TEST NEGATIF fait apparaître une bande rose dans la partie droite de la fenêtre de lecture (bande de contrôle) - UN TEST POSITIF fait apparaître 2 bandes roses bien distinctes dans la fenêtre de lecture. - L’absence de la bande de contrôle (dans la partie droite de la fenêtre de lecture) rend le test invalide. INTERPRETATION - Toute coloration même légère de la bande test doit être considérée comme un résultat positif. - Il peut apparaître une ombre grise à la hauteur de la bande test. A la différence d’un test positif, caractérisé par une bande bien dessinée, l'ombre est floue, d'aspect gri- sâtre et très difficilement visible. Une ombre doit être considérée comme un résultat négatif. 4
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 5 RECOMMANDATIONS => STABILITÉ / CONSERVATION 24 mois à température ambiante à partir de la date de fabrication. La date de péremption est indiquée sur le kit et sur chaque sachet de cellule test. Stocker à température ambiante, entre 2 et 30°C. Eviter d’exposer le test à de trop fortes températures ou à des températures inférieures à 0°C. => ECHANTILLONS • Réalisation du test dans la journée : conserver sérum, plasma, sang total à tempé- rature ambiante. • Réalisation du test de 24 à 72 heures: conserver les échantillons à 4-8°C (réfrigéra- teur). => PRÉCAUTIONS DE MANIPULATION •Afin d'obtenir une migration correcte de l'échantillon placer la cellule test sur une surface plane et horizontale. • Pour un dépôt correct de l'échantillon et du réactif, maintenir le flacon compte- gouttes de réactif et les pipettes en position verticale. • Réalisation du test extemporanée (lors de la visite) : réaliser le test sur une goutte de sérum, de plasma ou de sang total de préférence avec anticoagulant. • Si la réalisation du test est reportée au-delà de 4 heures : il est recommandé de réaliser le test sur le surnageant du sang sédimenté (la centrifugation n’est pas néces- saire). La conservation du sang total suivant ces conditions, peut conduire à des hémolyses partielles non visibles à l’œil nu, qui peuvent rendre le test plus difficile à interpréter. => AUTRES RECOMMANDATIONS - Certains échantillons peuvent ralentir la migration sur la membrane. Dans ce cas, ajouter 2 gouttes supplémentaires de réactif dans les 2 minutes qui suivent le dépôt de l’échantillon. - Durant la réalisation du test, la fenêtre de lecture peut montrer une très légère coloration rose qui n’a aucune conséquence sur la qualité du résultat. - Si la lecture est difficile au bout de 10 min, attendre 5 min de plus pour confirmer le résultat. - Ne pas mélanger les réactifs de lots différents. - Laisser les réactifs venir à température ambiante avant usage. - Utiliser une pipette neuve pour chaque test. - Ces recommandations constituent un guide, aucune méthode de diagnostic ne pou- vant prétendre être précise à 100%. Ainsi, le vétérinaire devra toujours tenir compte de l’historique et de l’examen clinique de l’animal pour prendre une décision. - Ce test a pour but d’aider le vétérinaire praticien dans le diagnostic de la Leucose Féline et/ou de l’immunodéficience féline. Le diagnostic final reste la prérogative et la responsabilité du vétérinaire traitant. Bio Veto Test ne peut être tenu responsable des conséquences liées à une mauvaise utilisation ou une mauvaise interprétation des résultats donnés par ce test. 5
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 6 USE IN VITRO ONLY ENGLISH CLINICAL BACKGROUNG Feline Leukaemia Virus (FeLV) and Feline Immunodeficiency Virus (FIV) are two retroviruses distributed worldwide. The clinical diagnosis of each disease is very dif- ficult because signs are so variable or may even be non-existent (healthy carrier state). Laboratory tests are therefore, essential in making a diagnosis. It is not uncom- mon for cats to be infected with both viruses and for this state to predispose the cat to other infections e.g. FIP. The differential diagnosis between FIV and FeLV is clinically difficult. Using a test like Speed® Duo is often the only way to differentiate between these two illnesses in suspect cats. Speed® Duo uses specific antibodies directed against the P27 capsid epitope of FeLV antigen and a synthetic peptide reproducing the transmembrane antigenic immunodominant site GP40 of FIV. TEST PRINCIPLE Speed® Duo FeLV/FIV, Speed® FeLV and Speed® FIV are rapid immunochromato- graphic tests for the detection of FeLV antigen and FIV antibody in feline blood. As the sample flows through the absorbent pad, the labelled FeLV antibody-dye conju- gate binds to any P27 FeLV antigen present and the labelled synthetic FIV peptide (GP40)-dye conjugate binds to any FIV antibodies present in the sample. These anti- gen/antibody complexes move by capillary action along the pad and are captured within the test regions of each device, indicated by a pink fine in those areas. The appearance of a second pink coloured line in the control region indicates that the test has been carried out correctly. KIT COMPONENTS & STORAGE Speed® FeLV : single FeLV testing - Speed® FIV: single FIV testing Speed® Duo FeLV : combined FeLV & FIV testing Kit of 6 tests Kit of 20 tests Kit of 50 tests 6 single test devices 20 single test devices 50 single test devices 6 single-use pipettes 20 single-use pipettes 50 single-use pipettes 1 bottle of reagent 1 or 2 bottles 3 or 5 bottles of reagent of reagent 1 notice 1 notice 1 notice STORE AT ROOM TEMPERATURE (2-30°C). 6
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 7 PROCEDURE => FOR EACH TEST YOU NEED : 1 test device, 1 single-use pipette and the reagent dropper bottle. 1/ADD THE SAMPLE - Serum, plasma, whole blood with anticoagulant : With a single-use pipette add one (1) drop of sample to each sample well keeping the pipette vertical. - Whole blood without anticoagulant (immediate testing) : Add immediately two drops directly from the syringe to each sample well. 2/ ADD THE REAGENT: - Hold the dropper bottle in a vertical position and add five (5) drops of reagent to each sample well. - If no migration is observed within 2 minutes, add two extra drops of reagent to each sample well. 3/ READING AND INTERPRETATION OF RESULTS: Wait 10 minutes for migration and read. The control line must always appear to validate the assay procedure. Observe the appearance of pink lines in the reading window. The control line (right hand corner of the reading window) must always appear to validate the assay procedure. If no control line appears, the test should be repeated with a fresh test unit. NEGATIVE TEST: Any test showing only the control line is a negative result. POSITIVE TEST: Any test showing two distinguishable pink coloured lines indicates a positive result, regardless of the colour intensity of the test line (can be fainter than the control line). Some shadow can appear by the positive line on the membrane. As a positive line is characterized by a well-drawn pink colour line (even if the pink colour is faint), a shadow must be considered as a negative result. 7
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 8 PRECAUTIONS => SHELF LIFE: 24 months at room temperature (from manufacturing date). The expiration date is written on each box and cell test. Store at room temperature, between 2 to 30°C. Keep the test away from excessive heat or freezing. => CONSERVATION OF SAMPLES : - Within 24 hours: store serum, plasma, whole blood at room temperature. - Between 24 to 72 hours: store samples at 4-8°C (refrigerator). - Conservation of whole blood may induces partial haemolysis that will produce a red background interfering with reading results. => PRECAUTIONS : - In order to get a correct migration of the sample, place the cell on a horizontal surface. - In order to add correctly the sample and the reagent always hold vertically the pipette or the dropper bottle. - Whole blood: we recommend using anticoagulated whole blood. => OTHER RECOMMENDATIONS: - Some particular samples can retain migration. In that case, add two more drops of reagent. - The reading window may show a light pink background coloration with no influ- ence at all on the quality of the results. - If reading is difficult after 10 min of migration, wait 5 more to confirm the result. - Do not mix reagents from different batch number. - Let the reagents come to room temperature when usually stored at 2-8°C. - Use a new pipette for each test. The recommended actions above are a guideline, as no test is 100% accurate in all times and under all conditions. Therefore, the veterinarian should interpret all test results in the light of the patient’s clinical examination, and historical information. This kit is intended to help the practitioner in the diagnosis of FeLV and/or FIV infec- tions. The definitive diagnosis remains the veterinarian’s prerogative and responsi- bility. Bio Veto Test can not be held responsible for the consequences of misuse or misinterpretation of the results given by the test. 8
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 9 PARA USO IN VITRO ESPANOL INTERES CLINICO Los virus de la leucemia felina (FeLV) y de la inmunodeficiencla felina (FIV) son 2 retrovirus de difusion mundial. Los podemos hallar tanto en gatos aparentemente sanos como en animales enfermos. En la actualidad aproximadamente un gato de cada 4, se encuentra infectado por uno de esos dos virus. El diagnostico diferential entre FIV y FeLV es clínicamente dificultoso. Speed® Duo y Speed® FeLV utilizan anticuerpos mono-clónales y poli- clónales contra antigeno capsular P27 del virus de la leucemia felina (FeLV) y un péptido sintético que repro- duce el receptor GP40 del virus de la inmunodeficiencla, Speed® FIV y Speed® Duo. PRINCIPIO Speed® Duo, Speed® FeLV y Speed® FIV son unos tests cualitativos rápidos, de un solo paso, muy sencillo de utilización basados en la técnica de la inmunocromato- grafia en sándwich. Para realizar cada test basta con colocar 1 gota de muestra (suero, plasma o sangre) en cada pocillo. A medida que la muestra se desplaza por la tira absorbente, los anticuerpos y anti- genos presentes se conjugan con partículas coloreadas. Los inmunocomplejos, se mueven por capilaridad a lo largo de la tira, formando una banda de complejo inmovilizado en la región del test, indicando la presencia del antigeno FeLV o la presencia de anticuerpos anti FIV. Una segunda banda (control) ubicada a la derecha de la banda nos indica que el test se realizó correctamente. PRESENTACION PRODUCTOS REF/CANTIDAD CONTENIDO Speed® Duo FeLV+FIV DSP 6, DSP 20, DSP 50 1 placa / test Speed ® FeLV LSP 6. LSP 20, LSP 50 1 pipeta / test Speed ® FIV FIV 6, FIV 20, FIV 50 1-2-5 gotero con reactivo 9
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 10 PROCEDIMIENTO 1/ AGREGE DE MUESTRA • Colocar 1 gota de muestra directamente en del pocillo del test con una pipeta desechable. (1 gote en e/pocillo en del Speed® Duo). • Si la muestra es de sangre fresca, puede agregar directamente 2 golas con la aguja. 2/ COLOQUE EL REACTIVO • Coloque el gotero en posición vertical y agregue 5 gotas enteras de reactivo en la muestra. 3/ RESULTADO • Espere 10 minutos y lea et resultado. • Observe la aparición de bandas rosas en la ventana. • La linea de control siempre debe aparecer para validar et procidimiento del ensayo. • En el caso. de que no aparezca la linea de control se deberá realizar un nuevo ensayo con una nueva plaça. Nota : La ventana de lectura puede presentar una coloración rosa suave que no interfiere con el resultado del test. PROCAUCIONES • Para realizar el test coloque la placa sobre una superficie plana para lograr una correcta migración de la muestra. • No mezcle componentes de distintos lotes. • Utilice una nueva pipeta para cada test. 10
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 11 CONSERVACION => ESTABILIDAD 24 MESES A TEMPERATURA AMBIENTE (2-30° C). La fecha de caducidad aparece en la caja del kit y en cada blister de plaça inmunocromatogràfica => OBTENCIÓN Y CONSERVACIÓN DE LAS MUESTRAS Sangre : Si el test se realiza dentro de las 4 horas de obtención de la muestra, esta se puede conservar a temperatura ambiante. Si se realiza entre 4 y 24 horas, se debará conservar a 4°- 8° C. Recomendamos que se utilice et sobrenadante para evitar problemas por la hemólisis. Suero o plasma : de 24 hs hasta 7 dias. Conservar a 4°C - 8°C para tiempos mayo- res se deberán conservar a - 20°C. RECOMENDACIONES Las acciones recomendadas anteriormente son sólo una guía, ya que ningún ensayo es 100% preciso todo el tiempo y en todas las condiciones. Por lo tanto, el veteri- nario deberá interpretar el resultado tomando en cuenta la exploración clínica y el historial del paciente. El ensayo tiene como finalidad ayudar al veterinario en el diagnóstico de la leucemia felina y de la inmunodeficiencla felina. El diagnóstic definitivo es una prerrogativa y responsabilidad del profesional actuante. Bio Veto Test no se puede responsabilizar de las consecuencias del mal uso o error en la interpretación de los resultados obtenidos con el ensayo. 11
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 12 DA USARE IN VITRO UNICAMENTE ITALIANO INTERESSE CLINICO II virus della Leucosi Felina (FeLV) e il virus dell'immunodeficienza felina (FIV) sono due retrovirus ad estensione mondiale. La diagnosi differenziale tra l'immunodefi- cienza felina (FIV) e la leucosi felina (FeLV) è clinicamente difficile poiché i sintomi sono molto variabili e sono preceduti di una fase asintomatica più o meno lunga. Realiccare il doppio test Speed® Duo sui gatti sospetti rappresenta il solo mecco per differenciare le due malatie. II test si appella a degli anticorpi monoclonali e policlonali diretti contro un epitope della proteina P27 della capside del FeLV ed un peptide di sintesi riproducente un sito antigenico immunodominante della glicoproteina transmembranaria GP 40 del- l'involucro del FIV sono fra i più precoci, specifi, e più presenti ad un tasso elevato durante tutto il tempo dell'infezione. E' ormai acquisito che l'infezione da virus FIV causa disturbi molto simili a quelli osservati in pazienti affetti dal virus HIV. Ma il virus FIV sul piano genetico e antigenico differisce dal virus HIV, e non pùo in alcun caso infettare l'uomo. Questo adattamento a una specie è caratteristico a tutti i retrovirus (1). PRINCIPIO I test Speed Duo, Speed FeLV, Speed® FIV è un test qualitativo valido, pratico e in ® ® una sola tappa, basato sul principio dell'immunocromatografia (o immunomigrazio- ne). Per ogni test è sufficiente una goccia di campione (sangue intero, siero, plasma). Quando il campione attraversa la carta assorbente, gli anticorpi fissati alle particel- le colorate si legano all'antigene P27 del FeLV presenti nei campione e agli anticor- pi del gatto anti FIV. Questo complesso antigene-anticorpi cosi formato migra sulla membrana e produce una banda rosa a livello degli anticorpi specifici anti FeLV e del peptide specifico FIV. Tale miscela continua a migrare sul supporto e giunge allora in una zona di controllo all'estremità della finestra. A questo punto le particelle colorate formano una banda di controllo rosa, che conferma la corretta realizzazione del test. 12
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 13 PRESENTAZIONE NOME DEL PRODOTTO RIFERIMENTO COMPOSIZIONE Speed® Duo FeLV+FIV DSP 6, DSP 20, DSP 50 1 cellula / test Speed ® FeLV LSP 6. LSP 20, LSP 50 1 pipetta / test Speed ® FIV FIV 6, FIV 20, FIV 50 1-5 fiale di reagente PROTOCOLLO OPERATIVO • è raccomandato verificare l'aspetto orrizontale della superficie di lavoro e di ricominciare il test su una superficie assolutamente orizzontale. 1/ DEPOSITO DEL CAMPIONE DA TESTARE Per sangue intero con anticoagulante, siero o plasma : Con l'aiuto di una pipetta monouso mantenuta in posizione verticale, depositare 1 goccia di campione nei/nei poccetto/i circolare/i. Per sangue intero senza anticoagulante : Depositare immediatamente 2 gocce direttamente dall'ago della siringa di prelievo nei/nei poccetto/i circolare/i. 2/ DEPOSITO DEL REAGENTE Mantere il flacone conta-gocce del reagente in posizione verticale e aggiungere 5 gocce intere di reagente nei/nei poccetto/i circolare/i. In caso di lenta migrazione, aggiungere ancora 2 gocce di reagente nei pozzetto del campione . 3/LETTURA (cf. p. 19) LASCIARE MIGRARE 10 MINUTI e osservare la presenca della banda di colore rosa nella finestra grande. La banda di colore rosa che appare alla estremità destra della grande finestra è la banda di controllo. L'assenza di questa banda di controllo invalida il test. • Tutti i test che presentano una banda di colore rosa in mezzo alla grande finestra sono positivi, anche quelli con l'intensità della colorazione debole. 13
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 14 RACCOMANDAZIONI => STABILATÀ E CONSERVAZIONE 24 mesi a 2-30° C (dalla data di fabbricazione) la data di scadenza è indicata sulla scatola del kit e sull’involucro di ogni cellula test. => CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI • Realizzazione del test in giornata : conservare il siero, plasma o sangue intero a temperatura ambiente. • Realizzazione del test da 24 ore a 7 giorni : conservare il siero o plasma a 4-8 °C (frigorifero). II sangue intero con anticoagulante non può essere conservato che 3 giorni a 4-8 °C Per la conservazione prolungata di siero o plasma solamente (non sangue intero), congelare a - 20°C. . => PRECAUZIONI PER LA MANIPOLAZION • Durante l'esecuzione di un test su sangue intero, se la migrazione dei globuli rossi raggiunge un terzo della finestra (zona dove si effettua la visulizzazione del test), significa che il prelievo ha delle forti possibilità di essere parzialmente emolizzato (prelievo difficile, anticoagulante non adatto, sangue intero conservato in cattive condizioni). E' raccomandato centrifugare il sangue per lavorare sul plasma. • II tempo di migrazione delle membrane FIV e FeLV non è necessariamente identico. => ALTRE PRECAUZIONI • Non mescolare reattivi provenienti da lotti di fabbricazione diversi. • Utilizzare una pipetta nuova per ogni test. Queste raccomandazioni costituiscono una guida. Nessuno metodo di diagnosi può pretendere di essere precisa al 100%. Quindi, il veterinario dovrà tenere sempre conto del cronostoria e dell'esame clinico dell'animale prima di prendere una decisione. Questo test ha lo scopo di aiutare il veterinario nella diagnosi della leucemia felina e dell'immunodeficienza felina. La diagnosi finale e la responsabilità resta però comunque sempre del veterinario che esercita. Bio Veto Test non può essere tenuta responsabile delle conseguenze legate ad una errato utilizzo o di una mal interpre- tazione dei risultati dati dal test stesso. 14
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 15 USO IN VITRO UNICAMENTE PORTUGUÊS INTERESSE CLINICO O virus da leucose felina (FeLV) e o virus da imunodeficiencia felina (FIV) são dois retrovirus com uma disseminação a nivel mundial. Em virtude da forma de evolução das respectivas doenças, qualquer um destes virus pode ser detectado em gatos aparentemente normais, bem como em gatos doentes. Actualmente corisidera-se que um gato em cada quatro são protadores de um destes virus. O diagnóstico clinico diferencial entre o FIV e o FeLV é dificil. A execução de um teste duplo em gatos doentes e suspeitos é a forma mais simples e eficaz de as distin- guir. Speed® Duo, Speed® FeLV e Speed® FIV recorrem a anticorpos monoclonais especificos do antigénio P27 da cápsula viral do FeLV e também de um peptideo sintético capaz de reproduzir a composição proteica da zona GP 40 imunodomi- nante da capsula viral do FIV. Os anticorpos anti GP40 FIV estão entre os mais precocemente produzidos, são muito especificos e apresentam uma concentração relativamente elevada, durante todo o decorrer da infecçao. PRINCIPIOS Speed® Duo, Speed® FeLV e Speed® FIV saõ testes imunológicos rápidos, qualitati- vos, baseados no principio da sandwich imunocromatogràfica. Para efectuar cada teste unicamente necessitamos de uma gota de sangue (sangue inteiro heparinizado, soro ou plasma). À medida que a amostra flui ao longo da almofada absorvente do teste, os anticorpos marcados do conjugado, unem-se ao antigénio P27 FeLV (quan- do presente, e no lado da placa referente ao FeLV e o peptidio sintético marcado une-se aos anticorpos anti FIV (quando presentes na amostra e do lado da placa referente ao FIV). Os imunocomplexos antigénios anticorpos movem-se por capila- ridade ao longo da tira formando uma linha de imunocomplexo imobilizado na zona do teste de cor rosada indicativo da presença de antigénio FeLV ou indicativo da presença de anticorpos FIV. 15
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 16 APRESENTAÇÃO NAME REF/QUANTITIES COMPONENT Speed® Duo FeLV+FIV DSP 6, DSP 20, DSP 50 1 placa/teste Speed ® FeLV LSP 6. LSP 20, LSP 50 1 pipeta / testes Speed ® FIV FIV 6, FIV 20, FIV 50 1-5 conta-gotas de reagente PROTOCOLO DE UTILIZAÇÃO => PRECAUÇÕES DE MANIPULAÇÃO • Num teste com sangue total, se a migração dos glóbulos vermelhos atingue um terço da janela (zona onde se efectua a visualização do teste) significa que a colhei- ta tem fortes hipóteses de estar parcialmente hemolisada (colheitas dificeis, anticoa- gulante não adaptado ao tipo de fluoreto, sangue total conservado em más condições). • Recomenda-se centrifugar o sangue para trabalhar o plasma ou decantá-lo. • A placa do teste deverá ser colocada sobre uma superficie horizontal e deixada imóvel. Se no espaço de 10 minutos a migração não atinge a extremidade da jane- la (a linha de controlo não aparece) recomenda-se verificar a superficie horizontal do trabalho e recomeçar o teste. • Manter as pipetas e o frasco conta gotas do reagente em posição vertical. 1/ DEPÓSITO DA AMOSTRA A TESTAR Com o auxilio de uma pipeta depositar uma gota da amostra no poço de recolha. NOTA : caso se utilize sangue fresco, directamente da seringa, aplicar duas gotas 2/ DEPÔSITO DO REAGENTE Coloque o frasco na posição vertical e deposite 5 gotas do reagente no poco de recolha. Se alguns minutos depois não for observada nenhuma migração, juntar outras 2 gotas de reagente. 3/ LETTURA E INTERPRETAÇAO DOS RESULTADOS (cf. p. 19) Aguarde 10 minutos (veja-se a migração do liquido) e efectue a leitura. Verifique o aparecimento de linhas de coloração rosa na janela de leitura. A cor rosa na linha de controlo deverá aparecer sempre de forma a validar o teste. Caso contrário repetir o teste com uma placa nova. 16
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 17 RECOMENDAÇÕES => ESTABILDADE/CONSERVAÇÃO 24 meses à temperatura ambiente a partir da data de fabrico. O prazo de validade encontra-se no exterior do kit e gravado em cada embalagem unitària. => CONSERVAÇÃO DAS AMOSTRAS Até 3 dias, conservar o soro, plasma ou sangue total entre 4-8°C. Tempo superior a 3 dias, somente podem ser conservados o soro e o plasma na temperatura de - 20 °C. O sangue heparinisado só pode ser conservado até 3 dias à temperatura de 4-8 °C. => RECOMENDAÇÕES Alguns soros de gatos são muito ricos em imunoglobolinas o que conduz a uma baixa de sensibilidade da banda do controlo (efeito de zona). Esta situação não modifica em rada a validade do teste. Não misturar componentes de diferentes kits. Utilize sempre uma pipeta nova para cada teste. Estas recomendações constituem únicamente um guia, sabendo que nenhum método de diagnóstico é 100 % preciso. Deste modo, recomenda-se que o médico veterinário no momento de tomar uma decisão, para além do resultado do teste de diagnóstico, tome sempre em linha de conta a anamnése assim como o exame clinico do animal. Este teste tem como objectivo auxiliar o ´médico veterinário no diagnóstico da leucose felina e da imunodeficiencia felina. O diagnóstico final será sempre uma prerogativa e uma responsabilidade exclusiva do médico veterinário. A Bio Veto Test descarta toda e qualquer responsabilidade pelas consequências inerentes a uma utilização indevida ou a uma deficiente interpretação do resultado do teste." 17
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 18 BIBLIOGRAPHIE AVRAEMAS.A et al : «Serological diagnosis of feline immunodeficience virus infection based on synthetic peptide from Env glycoproteins». Res Virol. 1993.144.209-218 MORAILLON A : «L'infection du chat par le virus de l'immunodéficience féline» Rec Med Vet 1991.170.689-699 MORAILLON A : «L'apport de la sérologie au diagnostic des maladies infectieuses du chat». Le point vétérinaire 1994.26.45-50 PAPIEROK G : «Nouvelles méthodes de diagnostic biologique des viroses Félines FeLV.FIV.PIF» (congrès Européen CNVSPA-FECAVA.PARIS. 18-20 Nov 1994) HARTMANN K., WERNER R.M., EGBERINK H., JARRETT O. : "Compovision of six in-house tests for the rapid diagnosis of feline immuno deficiency and feline leukemia virus infections". The Vet Record, Sept. 15. 2001, 317-320 GRIESSMAYR P., GREENE C.E., JARRET O., VIDAYASHANKAR A., HARTMANN K., "Comparaison de divers test de dépistage du virus de l'immunodéficience et de la leucose féline, récemment commercialisés". CNVSPA Paris Nov. 2002, Poster scientifique 18
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 19 MANIPULATION Disposable Pipette Syringe 1 sang total whole blood 2 serum serum plasma plasma 5 gouttes or 5 drops 10’ 15’ 3 + FIV FIV FeLV = FeLV ATTENTION les composants doivent être conservés à température ambiante. CAUTION the composants (cells, reagents) must be stored at room temperature. 19
DÉPLIANT DUO FeLV-FIV 25/10/07 16:56 Page 20 réf. : X PROTO M DUO V5 BIO VETO TEST 285, AVENUE DE ROME 83500 LA SEYNE SUR MER - FRANCE TEL. +33 (0)4 94 10 58 94 - FAX +33 (0)4 94 10 58 90 W E B : w w w. b v t . f r - E-MAIL : bvt@bvt.fr La Biologie au Service du Vétérinaire
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