MAX CT/GC - Becton Dickinson
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MAX CT/GC
442969
Pour le diagnostic in vitro P0212(06)
Pour utiliser avec le BD MAX System 2019-05
Français
2797
APPLICATION
Le test BD MAX CT/GC tel qu'il a été intégré sur le BD MAX System comprend l'extraction automatique de l'ADN et la réaction en
chaîne par polymérase (PCR) en temps réel pour la détection directe et qualitative de l'ADN présent dans Chlamydia trachomatis
(CT) et/ou Neisseria gonorrhoeae (GC) dans les échantillons d'écouvillonnage endocervical féminins prélevés par les cliniciens, les
échantillons d'écouvillonnage vaginal prélevés par la patiente (en milieu clinique) et les échantillons d'urine masculins et féminins.
Ce test est destiné au diagnostic d'infections urogénitales à chlamydia et/ou gonocoques chez les patients asymptomatiques et
symptomatiques.
RÉSUMÉ ET EXPLICATION DE LA MÉTHODE
L'Organisation Mondiale de la Santé estime à 130,9 millions le nombre de nouveaux cas d'infections dues à Chlamydia trachomatis
diagnostiquées chaque année.1 L'infection génitale à Chlamydia trachomatis peut causer des séquelles à long terme chez les
femmes, comme une maladie inflammatoire pelvienne, une grossesse extra-utérine, l'infertilité et des enfants à faible poids à la
naissance. L'infection asymptomatique à Chlamydia est fréquente chez les hommes et les femmes et sa détection repose souvent
sur le dépistage des populations considérées comme présentant le risque d'infection le plus élevé. Cinquante pourcent des hommes
présentant une infection à Chlamydia trachomatis sont eux aussi asymptomatiques et, en l'absence de traitement, l'infection peut
occasionner une urétrite aiguë ou une épididymite et une rectite chronique. La transmission de Chlamydia trachomatis est avant tout
sexuelle, mais peut également survenir dans la filière génitale et occasionner une conjonctivite et/ou une pneumonie à Chlamydia
chez le nouveau-né.2
La Chlamydia trachomatis est une bactérie intracellulaire stricte à Gram négatif formant des inclusions intracellulaires
caractéristiques qui, après coloration spécifique de l'antigène, peuvent être observées en culture sur cellules avec un microscope
à fluorescence.3 Les méthodes actuelles de diagnostic des infections à Chlamydia trachomatis incluent la culture et les tests
immunologiques, ainsi que la détection des acides nucléiques par hybridation ou amplification directe. Historiquement, les cultures
ont constitué la norme de référence pour le dépistage de Chlamydia trachomatis, mais les méthodes amplifiées sont de plus en plus
utilisées en raison de leur sensibilité accrue, ce qui a contribué à une hausse du nombre de cas d'infection signalés.
L’Organisation mondiale de la santé estime que 78,3 millions de nouveaux cas curables d’infections dues à la Neisseria
gonorrhoeae sont diagnostiqués chaque année.1 L'infection chez les femmes est souvent asymptomatique et, en l'absence de
traitement, peut provoquer une maladie inflammatoire pelvienne, l'infertilité, une grossesse extra-utérine et des douleurs pelviennes
chroniques. Chez les hommes, des symptômes d'urétrite aiguë et de dysurie amènent normalement les personnes atteintes à suivre
un traitement avant l'apparition de séquelles graves. La transmission de Neisseria gonorrhoeae est avant tout sexuelle, mais peut
également survenir dans la filière génitale et occasionner une conjonctivite chez le nouveau-né.
Neisseria gonorrhoeae est un diplocoque oxydase-positif à Gram négatif qui peut être observé dans les frottis de Gram colorés
réalisés à partir de pertes urétrales, habituellement au sein des neutrophiles. La culture de Neisseria gonorrhoeae peut s'avérer
difficile car cet organisme survit peu de temps en dehors de l'hôte et se montre très sensible aux conditions environnementales
défavorables comme la déshydratation du milieu ou les températures extrêmes.
1
PRINCIPES DE LA MÉTHODE
L'échantillon est prélevé sur la patiente à l'aide de la BD MAX UVE Specimen Collection Kit (trousse de prélèvement d'échantillons)
et transporté au laboratoire d'analyse dans les conditions de délai et de température déterminées permettant de préserver l'intégrité
des acides nucléiques cibles. L'échantillon est brièvement vortexé puis chauffé sur le BD Pre-warm Heater (bloc de préchauffage)
afin de dissoudre le mucus, d'homogénéiser la matrice et de lyser les organismes cibles. Après le refroidissement automatique, les
BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (tubes de tampon échantillon) sont rebouchés à l'aide d'un bouchon à membrane. Une liste
de travail est créée et le BD MAX UVE Sample Buffer Tube (tube de tampon échantillon), la BD MAX CT/GC Unitized Reagent
Strip (barrette réactive unitarisée) et la BD MAX PCR Cartridge (carte de PCR) sont chargés sur le BD MAX System. Le BD MAX
System automatise la préparation de l'échantillon en incluant la lyse de l'organisme cible, l'extraction et la concentration d'ADN,
la réhydratation des réactifs et l'amplification et la détection des acides nucléiques cibles en utilisant une PCR en temps réel. Le
BD MAX System interprète automatiquement les résultats. Le test comprend également un contrôle du traitement de l'échantillon
qui est présent dans le tube d'extraction. Le contrôle du traitement de l'échantillon surveille les étapes d'extraction de l'ADN, les
étapes de cycle thermique, l'intégrité des réactifs et la présence de substances inhibitrices.
À la suite de la lyse des cellules, les acides nucléiques libérés sont capturés sur des billes magnétiques d'affinité. Les billes, liées
aux acides nucléiques, sont lavées dans le tampon de lavage et les acides nucléiques sont élués par chauffage dans le tampon
d'élution. L'ADN élué est neutralisé à l'aide d'un tampon de neutralisation, et transféré dans le Master Mix pour réhydrater les
réactifs de PCR. Après la reconstitution, le BD MAX System dépose un volume fixe de solution prête pour la PCR contenant les
acides nucléiques extraits dans la BD MAX PCR Cartridge. Les microvalves de la BD MAX PCR Cartridge sont scellées par le
système avant de commencer la PCR pour contenir le mélange d'amplification, empêchant ainsi l'évaporation et la contamination.
Les cibles d'ADN amplifiées sont détectées par des sondes d'hydrolyse (TaqMan), marquées à une extrémité par un colorant
fluorescent (fluorochrome) et à l'autre extrémité par un fragment inhibiteur. Des sondes marquées avec différents fluorophores
servent à détecter les amplicons des analytes cibles et le contrôle de traitement de l'échantillon dans trois canaux optiques
différents du BD MAX System. Quand ces sondes sont à leur état natif, la fluorescence du fluorophore est inhibée à cause de la
proximité de l'inhibiteur. Cependant, en présence de l'ADN cible, les sondes s'hybrident à leurs séquences complémentaires et
sont hydrolysées par l'activité 5'–3' exonucléase de l'ADN polymérase à mesure que le brin naissant le long de la matrice d'ADN
est synthétisé. Il en résulte que les fluorochromes sont séparés des molécules inhibitrices et qu'une fluorescence est émise.
Le BD MAX System surveille ces signaux à chaque cycle et interprète les données à la fin de la réaction afin de fournir des résultats
de test qualitatifs pour chaque analyte (autrement dit, positifs ou négatifs).
RÉACTIFS ET MATÉRIAUX
RÉF. Contenu Quantité
BD MAX CT/GC Master Mix (B1)
Master Mix déshydraté pour PCR contenant l'ADN polymérase, les nucléotides et les sondes et 24 tests
amorces moléculaires spécifiques de CT/GC, ainsi que les sondes et amorces spécifiques au contrôle (2 x 12 tubes)
de traitement de l'échantillon.
BD MAX CT/GC
442969 Barrettes réactives unitarisées contenant tous les réactifs liquides et les embouts de pipette jetables 24 tests
nécessaires au traitement de l'échantillon et à l'extraction d'ADN.
BD MAX CT/GC Extraction Tubes (B2)
24 tests
Culot déshydraté contenant des billes magnétiques d'affinité à l'ADN, des réactifs de protéase et un
(2 x 12 tubes)
contrôle de traitement de l'échantillon
Bouchons à membrane 25
ÉQUIPEMENT ET MATÉRIAUX REQUIS MAIS NON FOURNIS
• BD MAX System (N° réf. BD 441916)
• BD Pre-warm Heater Kit (BD Heater et BD MAX Rack) (N° réf. BD 443159)
• BD MAX PCR Cartridges (N° réf. BD 437519)
• BD MAX UVE Specimen Collection Kit (N° réf. BD 443376)
• BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (N° réf. BD 443420)
• Vortex Genie 2 (VWR*, N° réf. 58815-234) ou équivalent
• Gants jetables, sans poudre
AVERTISSEMENTS ET PRÉCAUTIONS
• Le test BD MAX CT/GC est pour le diagnostic in vitro.
• Si les écouvillons vaginaux ou endocervicaux prélevés par la patiente ne sont pas immédiatement transférés dans un
BD MAX UVE Sample Buffer Tube, ils doivent être transférés dans les 2 heures suivant le prélèvement et conservés à une
température comprise entre 2 °C et 30 °C. Les échantillons du premier jet d'urine conservés à une température comprise entre
2 °C et 30 °C doivent être transférés du godet de prélèvement dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube dans les 4 heures
suivant le prélèvement ou dans les 24 heures, s'ils sont conservés à une température comprise entre 2 °C et 8 °C.
• Ne pas utiliser les réactifs et/ou les matériaux au-delà de la date de péremption.
• Ne pas utiliser la trousse si l'étiquette qui scelle la boîte extérieure est déchirée à la livraison.
• Ne pas utiliser les réactifs si les sachets de protection sont ouverts ou déchirés à l'arrivée.
• Ne pas utiliser les réactifs s'il n'y a pas de dessiccatif ou si le dessiccatif est ouvert dans les sachets de réactifs.
• Ne pas retirer le dessiccatif des sachets de réactifs.
2
• Refermer immédiatement les sachets de protection des réactifs avec la fermeture à glissière après chaque utilisation. Retirer
l'air des sachets avant de les refermer.
• Protéger les réactifs contre la chaleur et l'humidité. Une exposition prolongée à l'humidité peut affecter les performances
du produit.
• Ne pas utiliser les réactifs si le sachet d'aluminium est ouvert ou endommagé.
• Ne pas mélanger les réactifs provenant de sachets différents et/ou de trousses et/ou de lots différents.
• Ne pas interchanger ni réutiliser les bouchons pour ne pas les contaminer et fausser ainsi les résultats.
• Vérifier le remplissage des barrettes réactives unitarisées (s'assurer que les liquides sont au fond des tubes) (voir la figure 2).
• Vérifier les barrettes réactives unitarisées pour s'assurer que tous les embouts de pipette sont présents (voir la figure 2).
• Procéder avec prudence pour utiliser les solutions chimiques afin de ne pas compliquer la lecture du code à barres des tubes
Master Mix et Extraction.
• Une bonne technique de laboratoire est essentielle pour que ce test soit réussi. La haute sensibilité analytique de ce test exige
de prendre un soin extrême pour préserver la pureté de tous les matériaux et des réactifs.
• Si d'autres tests de PCR à tube ouvert sont effectués dans la même zone du laboratoire, prendre soin de ne pas contaminer le
test BD MAX CT/GC, tous réactifs supplémentaires requis pour les tests et le BD MAX System. Toujours éviter la contamination
microbienne et par désoxyribonucléase (DNase) des réactifs. Mettre des gants neufs avant de manipuler les réactifs et les cartes.
• Pour éviter la contamination de l'environnement par des amplicons, ne pas briser les BD MAX PCR Cartridges après l'utilisation.
Les scellés des BD MAX PCR Cartridges sont conçus pour empêcher la contamination.
• Le laboratoire doit régulièrement contrôler l'environnement afin de limiter les risques de contamination croisée.
• La réalisation du test BD MAX CT/GC en dehors des intervalles de temps et de température recommandés pour le transport et
la conservation des échantillons peut produire des résultats invalides. Les tests qui n'ont pas été réalisés dans les intervalles de
temps de stabilité spécifiés doivent être répétés avec un nouvel échantillon.
• Des contrôles supplémentaires peuvent être testés conformément aux directives ou aux exigences locales, régionales et/ou
nationales ou aux organismes d'accréditation.
• Toujours manipuler les échantillons comme s'ils étaient infectieux et conformément aux méthodes de sécurité du laboratoire
telles que celles décrites dans le document M29 du CLSI4 et dans le document intitulé Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories.5
• Porter des vêtements de protection et des gants jetables pour manipuler tous les réactifs.
• Se laver soigneusement les mains après avoir utilisé le test.
• Ne pas pipeter avec la bouche.
• Ne pas fumer, boire ni manger dans les endroits où les échantillons ou réactifs de la trousse sont manipulés.
• Mettre au rebut les réactifs non utilisés et les déchets conformément aux règlements nationaux et locaux.
• Consulter le Manuel d'utilisation du BD MAX System6 et le Manuel d'utilisation du BD Pre-warm Heater (bloc de préchauffage)7
pour obtenir des avertissements, des précautions et des méthodes supplémentaires.
CONSERVATION ET STABILITÉ
Stabilité de l'échantillon
Les échantillons du premier jet d'urine doivent être transférés du godet de prélèvement dans le BD MAX UVE Sample Buffer
Tube dans les 4 heures suivant le prélèvement lorsqu'ils sont conservés entre 2 °C et 30 °C ou dans les 24 heures suivant le
prélèvement lorsqu'ils sont conservés entre 2 °C et 8 °C. Les écouvillons endocervicaux prélevés par le médecin et les échantillons
d'écouvillonnage vaginal prélevés par les patientes doivent être transférés immédiatement (de préférence) ou dans les deux heures
suivant le prélèvement dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube, lorsqu'ils sont conservés entre 2 °C et 30 °C. Les échantillons
d'urine et d'écouvillonnage présents dans les BD MAX UVE Sample Buffer Tubes doivent être conservés à une température
comprise entre -20 °C et 30 °C au cours du transport et du stockage. Les protéger de toute exposition à une chaleur excessive.
Tableau 1 : Stabilité des échantillons avant le transfert dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube
Température de transport et/ou de conservation
Stabilité de l'échantillon Type d'échantillon
2 à 30 °C 2 à 8 °C
Avant le transfert dans le BD MAX UVE Urine 4 heures 24 heures
Sample Buffer Tube Écouvillonnage vaginal/endocervical 2 heures 2 heures
Les échantillons d'urine ou d'écouvillonnage présents dans les BD MAX UVE Sample Buffer Tubes peuvent être transportés et
conservés pendant 5 jours (maximum) à une température comprise entre 2 °C et 30 °C ou jusqu'à 30 jours à une température de
-20 °C, avant le pré-chauffage.
3
Tableau 2 : Stabilité des échantillons transférés dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube avant le préchauffage
Température de transport et/ou de conservation
Stabilité de l'échantillon Type d'échantillon
2 à 30 °C -20 °C
Dans le BD MAX UVE Sample Buffer Urine et écouvillonnage vaginal/
5 jours 30 jours
Tube (avant le préchauffage) endocervical
Une fois préchauffés, les échantillons précédemment conservés à une température comprise entre 2 et 30 °C (voir le tableau 2)
peuvent être conservés 5 jours supplémentaires à une température comprise entre 2 et 30 °C ou 30 jours supplémentaires à
-20 °C (voir le tableau 3) avant le test sur le BD MAX System. Une fois préchauffés, les échantillons précédemment conservés à
-20 °C (voir le tableau 2) peuvent être conservés 5 jours supplémentaires à une température comprise entre -20 °C et 30 °C (voir le
tableau 3) avant le test sur le BD MAX System.
REMARQUE : la stabilité combinée de l'échantillon [avant le préchauffage (tableau 2) et après (tableau 3)] ne peut dépasser
un total de 35 jours.
Tableau 3 : Stabilité de l'échantillon dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube après le préchauffage
Température de conservation
Stabilité de l'échantillon Type d'échantillon
2 à 30 °C -20 °C
Après le préchauffage Urine et écouvillonnage vaginal/
5 jours 30 jours
(précédemment conservé entre 2 °C et 30 °C) endocervical
Après le préchauffage Urine et écouvillonnage vaginal/
5 jours 5 jours
(précédemment conservé à -20 °C) endocervical
Stabilité du réactif
Les composants du BD MAX CT/GC sont stables entre 2 °C et 25 °C jusqu'à la date d'expiration indiquée. Ne pas utiliser les
composants au-delà de la date d'expiration.
Les BD MAX CT/GC Master Mix et Extraction Tubes (tubes de mélange réactionnel et d'extraction) sont fournis dans des sachets
scellés. Resceller immédiatement les sachets après ouverture pour protéger les produits de l'humidité. Les tubes de réactifs sont
stables pendant un maximum de 7 jours entre 2 °C et 25 °C après avoir été ouverts puis rescellés dans le sac.
Tableau 4 : Stabilité du réactif
Composants de la trousse Température Stabilité
Master Mix
Sachet scellé (non ouvert) 2 à 25 °C jusqu'à la date de péremption indiquée
Sachet ouvert (rescellé) 2 à 25 °C 7 joursa
Tube Extraction
Sachet scellé (non ouvert) 2 à 25 °C jusqu'à la date de péremption indiquée
Sachet ouvert (rescellé) 2 à 25 °C 7 joursa
Barrette réactive unitarisée 2 à 25 °C jusqu'à la date de péremption indiquée
a Lorsque l'indicateur d'ouverture du sachet a été brisé, refermer soigneusement le sachet contenant le dessiccatif avec la fermeture à glissière après
chaque utilisation et le conserver à la température appropriée.
MODE D'EMPLOI
Transport/préparation des échantillons
Les échantillons ne doivent être prélevés qu'à l'aide de la BD MAX UVE Specimen Collection Kit et conformément aux instructions
de la notice de cette BD MAX UVE Specimen Collection Kit. Porter des gants propres pour manipuler les composants et
les échantillons de la BD MAX UVE Specimen Collection Kit. Si les gants entrent en contact avec l'échantillon, en changer
immédiatement pour éviter de contaminer d'autres échantillons. Pour les échantillons qui ne sont pas encore transférés dans le
BD MAX UVE Sample Buffer Tube, préparer les échantillons pour le test en respectant les instructions ci-dessous.
Transfert de l'échantillon d'urine dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube :
REMARQUE : l'urine doit être transférée du godet de prélèvement dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube dans les
4 heures suivant le prélèvement lorsqu'elle est conservée à une température comprise entre 2 et 30 °C ou dans les
24 heures suivant le prélèvement lorsqu'elle est conservée à une température comprise entre 2 et 8 °C.
1. Déboucher le BD MAX UVE Sample Buffer Tube. Utiliser une pipette de transfert graduée pour mélanger doucement
l'échantillon d'urine dans le godet et en transférer environ 1 mL dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube.
REMARQUE : utiliser les graduations présentes sur la pipette de transfert comme guide. Ne pas remplir le tube de manière
excessive ou insuffisante.
2. Jeter la pipette de transfert dans un récipient pour déchets à risque biologique.
4
REMARQUE : la pipette de transfert est destinée à être utilisée avec un seul échantillon.
3. Bien serrer le bouchon du BD MAX UVE Sample Buffer Tube.
4. Inverser le BD MAX UVE Sample Buffer Tube 3 à 4 fois afin d'assurer un mélange correct de l'échantillon et du réactif.
5. Apposer sur le BD MAX UVE Sample Buffer Tube une étiquette mentionnant l'identification du patient, ainsi que la date et
l'heure de prélèvement.
REMARQUE : veiller à ne pas oblitérer les codes à barres du tube.
6. Passer à la section relative à l'utilisation du BD Pre-warm Heater.
Transférer les échantillons d'écouvillonnage endocervical ou vaginal dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube :
REMARQUE : les écouvillons doivent être transférés de la gaine de l'écouvillon dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube
immédiatement (de préférence) ou dans les 2 heures suivant le prélèvement lorsqu'ils sont conservés à une température
comprise entre 2 °C et 30 °C.
REMARQUE : se reporter à la figure 1 pour obtenir un résumé du processus de transfert de l'échantillon d'écouvillonnage.
1. Déboucher le BD MAX UVE Sample Buffer Tube et insérer complètement l'écouvillon dans le tube, de manière à ce que
l'embout atteigne le fond du tube.
2. En saisissant l'écouvillon par le bouchon, briser soigneusement la tige de l'écouvillon au niveau de la marque pré-limée. Veiller
à ne pas éclabousser ou contaminer le contenu du tube.
3. Bien serrer le bouchon du BD MAX UVE Sample Buffer Tube.
4. Apposer sur le BD MAX UVE Sample Buffer Tube une étiquette mentionnant les informations relatives au patient et à la
date/l'heure de prélèvement.
REMARQUE : veiller à ne pas oblitérer les codes à barres du tube.
5. Passer à la section relative à l'utilisation du BD Pre-warm Heater.
Figure 1 : Transfert des échantillons d'écouvillonnage dans le BD MAX UVE Sample Buffer Tube
1. Insérer complètement l'écouvillon dans 2. Briser doucement la tige au niveau de la
le tube, de manière à ce que l'embout marque pré-limée.
atteigne le fond du tube.
3. Bien reboucher le tube. 4. Apposer sur le tube l'étiquette indiquant
les informations relatives à la patiente.
5
Utilisation du BD Pre-warm Heater
(Se reporter au Manuel d'utilisation du BD Pre-warm Heater7 pour obtenir les instructions d'utilisation.)
1. Sélectionner l'option dans l'écran Série > Liste de travail.
2. Saisir le code à barres de chaque BD MAX UVE Sample Buffer Tube dans le champ Tube échantillon à l'aide du lecteur de
code à barres avec l'ID d'examen du patient.
3. Saisir le numéro du lot de la trousse dans l'écran Série > Inventaire trousse pour le BD MAX CT/GC (pour la traçabilité du lot)
en scannant le code à barres avec le lecteur.
REMARQUE : s'assurer que le suivi du numéro de lot est activé dans l'écran Configuration > Système
4. La liste de travail en attente est désormais mise à jour et affiche une case à cocher permettant de planifier l'étape de
préchauffage.
5. Planifier le préchauffage de l'échantillon en cochant la case de la liste de travail en attente.
6. Utiliser la fenêtre de visualisation sur l'étiquette du BD MAX UVE Sample Buffer Tube pour s'assurer que l'échantillon d'urine ou
d'écouvillonnage a été ajouté au tube.
7. Vortexer brièvement pour mélanger l'échantillon avant le chargement sur le BD Pre-warm Heater.
8. Placer le tube de BD MAX UVE Sample Buffer Tube (contenant l'échantillon) sur le BD Pre-warm Heater. La station peut
accueillir jusqu'à 24 tubes de tampon échantillon.
9. Fermer le couvercle du BD Pre-warm Heater et sélectionner « Préchauffage » dans le panneau Série > Liste de travail.
REMARQUE : vérifier que les tubes sont physiquement présents dans l'alvéole BD Pre-warm et que cette alvéole a été
chargée dans le BD Pre-warm Heater. Sélectionner ensuite OK lorsque le message Démarrer préchauffage est affiché.
Un profil spécifique de chauffage et de refroidissement du BD MAX CT/GC est lancé.
10. La durée du cycle de préchauffage s'affiche sur l'écran d'état.
11. Dans l'écran Liste de travail en attente, l'échantillon/test sélectionné est désormais affiché comme « Préchauff. terminé ».
12. Une fois l'étape de préchauffage correctement effectuée, retirer le BD MAX UVE Sample Buffer Tube du BD Pre-warm Heater
et préparer ce qui suit :
REMARQUE : porter des gants propres pour manipuler les BD MAX UVE Sample Buffer Tubes.
Échantillons d'écouvillonnage :
REMARQUE : si l'écouvillon n'est pas saisi dans le bouchon, retirer doucement l'écouvillon dans des conditions
stériles avant de le reboucher avec un bouchon à membrane perçable bleu.
a) Déboucher le BD MAX UVE Sample Buffer Tube et presser délicatement l'écouvillon contre la paroi interne du tube
pour éliminer le liquide en excès.
b) Retirer l'ensemble écouvillon/bouchon du BD MAX UVE Sample Buffer Tube et le jeter.
c) Reboucher le tube avec un bouchon à membrane bleu perçable.
Échantillons d'urine :
a) Retirer le bouchon rigide du BD MAX UVE Sample Buffer Tube et le jeter.
b) Reboucher le tube avec un bouchon à membrane bleu perçable.
13. Passer à la section Utilisation du BD MAX System pour configurer le BD MAX System Rack (portoir du système).
REMARQUE : en cas d'échec de l'étape de préchauffage, la zone d'état du minuteur du BD MAX System affiche Échec /
Refroidissement. Il est nécessaire de répéter l'étape de préchauffage avant le test sur le BD MAX System.
REMARQUE : le test BD MAX CT/GC ne peut être exécuté qu'après la réussite de l'étape de préchauffage ci-dessus.
Les échantillons ayant correctement subi le cycle de préchauffage ne doivent pas être rechauffés si un nouveau test
s'avérait nécessaire.
REMARQUE : pour les laboratoires équipés de plusieurs BD MAX System et BD Pre-warm Heater, les échantillons doivent
être testés et/ou retestés sur le BD MAX System sur lequel l'étape de préchauffage a été réalisée.
REMARQUE : consulter le tableau 3 pour connaître la stabilité de l'échantillon une fois l'étape de préchauffage correctement
effectuée et avant le test sur le BD MAX System. Équilibrer les échantillons conservés à température ambiante et
les mélanger en les vortexant brièvement avant de les tester sur le BD MAX System. Si les échantillons sont testés
immédiatement après l'étape de préchauffage, il n'est pas nécessaire de les vortexer avant le test sur le BD MAX System.
Utilisation du BD MAX System
REMARQUE : consulter le Manuel d'utilisation du BD MAX System6 où figurent des instructions détaillées
(section Fonctionnement).
REMARQUE : un tube de (1) Master Mix (B1), un (1) Extraction Tube (B2) et une (1) Unitized Reagent Strip sont nécessaires
pour chaque échantillon. Si des contrôles externes doivent être testés, il est nécessaire de disposer d'un (1) BD MAX UVE
Sample Buffer Tube et d'un (1) bouchon à membrane pour chaque contrôle (par ex., un pour le contrôle positif externe et
un pour le contrôle négatif). Sortir le nombre requis de matériaux BD MAX de leurs sachets ou boîtes de protection. Pour
conserver les sachets ouverts de Master Mix ou Extraction Tube, éliminer l'air et refermer les sachets avec la fermeture
éclair, en veillant à laisser le dessicatif dans le sachet.
1. Mettre le BD MAX System sous tension (si cela n'est pas déjà fait) et se connecter au système en entrant un
3. Retirer le nombre voulu de barrettes réactives unitarisées issues de la trousse BD MAX CT/GC. Taper doucement chaque
barrette réactive unitarisée sur une surface dure pour s'assurer que tous les liquides se trouvent au fond des tubes.
4. Retirer le nombre voulu de tubes Extraction et Master Mix de leurs sachets protecteurs. Éliminer l'air et refermer rapidement les
sachets avec la fermeture à glissière.
5. Pour chaque échantillon à tester, placer une (1) barrette réactive unitarisée sur le portoir du BD MAX System, en commençant
par la position 1 du portoir A.
6. Placer un (1) tube d'extraction (aluminium blanc) dans chaque barrette réactive unitarisée en position 1 comme indiqué Figure 2.
7. Enclencher un (1) tube Master Mix (aluminium vert) dans chaque barrette réactive unitarisée en position 2 comme indiqué à la
figure 2.
Tubes enclenchables Réservoir
à déchets Embouts de pipette
#1 #2 #3
Tube
de lyse
Tube
d'extraction
Tampon
d’élution
Tampon
de lavage
Tampon de
neutralisation
Figure 2. Clipsage des BD MAX CT/GC Master Mix et Extraction Tubes dans les barrettes réactives unitarisées
8. Placer les BD MAX UVE Sample Buffer Tube(s) dans les BD MAX System Racks correspondant aux barrettes réactives
unitarisées assemblées aux étapes 5 à 7.
9. Placer le nombre de BD MAX PCR Cartridge(s) requis dans le BD MAX System (voir la Figure 3).
• Chaque carte peut accueillir jusqu'à 24 échantillons.
• Le BD MAX System sélectionne automatiquement la position et la rangée sur la BD MAX PCR Cartridge pour chaque
série. Les BD MAX PCR Cartridges peuvent être utilisées à plusieurs reprises jusqu'à ce que toutes les rangées aient
été utilisées.
• Pour optimiser l'utilisation des BD MAX PCR Cartridges, avec le mode d'échantillonnage 2000, sélectionner l'Assistant de
série sous l'onglet Liste de travail pour procéder à l'attribution des rangées.
• Consulter le Manuel d'utilisation du BD MAX System6 pour plus de détails.
Figure 3 : Chargement des cartes PCR
7
10. Chargement du ou des portoirs dans le BD MAX System (voir la figure 4).
Côté A Côté B
Figure 4 : Charger le ou les portoirs dans le BD MAX System.
11. Fermer le couvercle du BD MAX System et cliquer sur pour lancer le traitement.
12. À la fin de l'analyse, vérifier immédiatement les résultats ou conserver les BD MAX UVE Sample Buffer Tubes conformément
aux conditions de température et de durée indiquées dans le tableau 3, jusqu'à ce que les résultats aient été vérifiés.
REMARQUE : si un capuchon avec septum a été endommagé pendant l'analyse, le remplacer par un nouveau avant
d'entreposer l'échantillon.
REMARQUE : avant la conservation, retirer le bouchon à membrane et le remplacer par un bouchon rigide.
REMARQUE : se reporter au tableau 3 pour connaître la stabilité de l'échantillon des BD MAX UVE Sample Buffer Tubes
préparés pour le préchauffage. Si un résultat IND (Indéterminé), UNR (Non résolu) ou INC (Incomplet) est obtenu ou en cas
d'erreur du contrôle externe, répéter le test à partir du même BD MAX UVE Sample Buffer Tube pendant cette période (voir
la section « Mode opératoire de répétition du test »).
CONTRÔLE DE QUALITÉ
Les protocoles du contrôle de qualité permettent de surveiller la performance du test. Les laboratoires doivent établir le nombre,
le type et la fréquence des matériaux de contrôle de test conformément aux directives ou spécifications des règlements locaux,
provinciaux et fédéraux ou aux réglementations nationales ou organismes d'accréditation, afin de contrôler l'efficacité de l'ensemble
du processus analytique. Pour les directives générales de contrôle de qualité, l'utilisateur peut se reporter au document CLSI MM38
et EP12.9
1. Les matériaux de contrôle externe ne sont pas fournis par BD. Les contrôles positifs et négatifs externes ne sont pas utilisés
par le logiciel du BD MAX System aux fins de l'interprétation des résultats des tests des échantillons. Les contrôles externes
sont traités comme des échantillons de patient. (Voir le tableau de la section Interprétation des résultats pour connaître
l'interprétation des résultats des tests de contrôles externes.)
2. Il est recommandé d'analyser un (1) contrôle externe positif et un (1) contrôle externe négatif au minimum tous les jours
jusqu'à obtention d'une validation de processus adéquate avec le BD MAX System dans chaque laboratoire. La réduction de la
fréquence de test de contrôle doit être conforme aux réglementations applicables.
3. Le contrôle positif externe a pour but de surveiller l'occurrence d'anomalie de réactif importante. Le contrôle externe négatif sert
à détecter la contamination du réactif ou de l'environnement (ou du transfert) par des acides nucléiques cibles.
4. Différents types de contrôles externes sont recommandés pour permettre à l'utilisateur de sélectionner les plus appropriés pour
le programme de contrôle de qualité du laboratoire.
a. Contrôle négatif externe : BD MAX UVE Sample Buffer Tube sans ajout d'organisme ou d'échantillon précédemment
caractérisé connu comme négatif. BD recommande de préparer le contrôle externe négatif avant le contrôle externe positif
afin de limiter le risque de contamination consécutif à la préparation du contrôle.
b. Contrôle positif externe : matériaux de contrôle disponibles dans le commerce [par ex., Chlamydia trachomatis sérotype H
(ATCC VR-879), Neisseria gonorrhoeae (ATCC 19424) ou échantillon précédemment caractérisé connu comme positif.
Pour la préparation des systèmes de contrôle externe, il est recommandé d'obtenir les souches auprès de l'ATCC et de les
diluer dans un tampon phosphate salin à une dilution finale de 10-6 la souche parentale de Chlamydia trachomatis sérotype H
et Neisseria gonorrhoeae. Les souches ATCC de Neisseria gonorrhoeae sont lyophilisées et doivent être réhydratées avec un
1 mL de tampon phosphate salin avant la dilution. Diluer ensuite la solution en transférant 150 µL dans un BD MAX UVE Sample
Buffer Tube, de manière à obtenir une concentration finale de 10-7 pour Chlamydia trachomatis et Neisseria gonorrhoeae.
5. Tous les contrôles externes doivent donner les résultats attendus (positif pour le contrôle externe positif, négatif pour le contrôle
externe négatif) et aucun contrôle de traitement d'échantillon incorrect (résultats Non résolu ou Indéterminé).
86. Un contrôle négatif externe fournissant un résultat positif indique une manipulation et/ou une contamination de l'échantillon.
Un contrôle positif externe qui donne un résultat négatif indique un problème de manipulation ou de préparation des échantillons.
Vérifier la technique de manipulation ou de préparation des échantillons.
7. Un contrôle externe fournissant un résultat de test non résolu, indéterminé ou incomplet indique une erreur de réactif ou
du système BD MAX System. Vérifier le moniteur du BD MAX System pour voir s'il y a des messages d'erreur. Voir la
section Résumé d'erreurs du système du Manuel d'utilisation du BD MAX System6 pour connaître l'interprétation des codes
d'avertissements et d'erreurs. Si le problème persiste, utiliser les réactifs d'un sachet non ouvert ou utiliser une nouvelle trousse
de test.
8. Chaque tube Extraction contient un contrôle de traitement d'échantillon qui est un plasmide contenant une séquence d'ADN
cible synthétique. Le contrôle de traitement de l'échantillon contrôle l'efficacité de la capture, du lavage et de l'élution de l'ADN
pendant les étapes de traitement de l'échantillon, ainsi que l'efficacité de l'amplification et de la détection de l'ADN pendant
l'analyse par PCR. Si le résultat du contrôle de traitement de l'échantillon n'est pas conforme aux critères d'acceptation, le
résultat de l'échantillon sera signalé comme Non résolu ; tout résultat de test positif (POS) sera toutefois rapporté et aucune
cible ne sera appelée NEG. Tout résultat Non résolu est caractéristique d'une inhibition associée à l'échantillon ou d'un
dysfonctionnement du réactif. Retester les échantillons dont le résultat est rapporté comme Non résolu conformément à la
section Mode opératoire de répétition du test, ci-après.
INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
Les résultats sont disponibles dans l'onglet Résultats de la fenêtre Résultats du BD MAX System Monitor (moniteur). Le BD MAX
System interprète automatiquement les résultats de test. Un résultat de test peut être NEG (Négatif), POS (Positif) ou UNR (Non
résolu) en fonction du statut d'amplification de la cible et du contrôle de traitement de l'échantillon. Les résultats IND (Indéterminé)
et INC (Incomplet) sont provoqués par un dysfonctionnement du BD MAX System. Les résultats sont basés sur l'algorithme de
décision suivant :
Tableau 5 : Interprétation des résultats du BD MAX CT/GC
Résultat de test
Interprétation des résultats
rapporté
CT POS ADN de Chlamydia trachomatis détecté
CT NEG Aucun ADN de Chlamydia trachomatis détecté
Non résolu – échantillon inhibiteur ou dysfonctionnement du réactif ; aucune amplification de la cible ou du
CT UNR
traitement de contrôle de l'échantillon
GC POS ADN de Neisseria gonorrhoeae détecté
GC NEG Aucun ADN de Neisseria gonorrhoeae détecté
Non résolu – échantillon inhibiteur ou dysfonctionnement du réactif ; aucune amplification de la cible ou du
GC UNR
traitement de contrôle de l'échantillon
IND Résultat indéterminé dû à un dysfonctionnement du BD MAX System (avec codes d'avertissement ou d'erreur)a
INC Analyse incomplète (avec codes d'avertissement ou d'erreur)a
a Consulter la section Dépannage du Manuel d'utilisation du BD MAX System6 pour connaître l'interprétation des codes d'avertissement et d'erreur.
MODE OPÉRATOIRE DE RÉPÉTITION DU TEST
REMARQUE : un volume suffisant est disponible pour une répétition du test à partir du BD MAX UVE Sample Buffer Tube
sur le BD MAX System. La répétition du test doit être réalisée dans les conditions de temps indiquées dans le tableau 3.
Équilibrer les échantillons conservés à température ambiante et les mélanger en les vortexant avant de les tester sur le
BD MAX System. Retester les échantillons en commençant à partir de la section Fonctionnement du BD MAX System.
REMARQUE : de nouveaux échantillons peuvent être testés en même temps que les échantillons à répéter.
RÉSULTAT NON RÉSOLU
Des résultats non résolus peuvent être obtenus si un échantillon inhibiteur ou une erreur de réactif empêche l'amplification
de la cible appropriée ou du contrôle de traitement de l'échantillon. Si le contrôle de traitement de l'échantillon ne réalise pas
d'amplification, l'échantillon sera rapporté comme UNR (non résolu) ; les résultats positifs (POS) seront rapportés et aucune cible ne
sera appelée NEG.
Le BD MAX System indique les résultats de chaque cible individuellement et un résultat UNR peut être obtenu pour une ou
plusieurs cibles BD MAX CT/GC. Si toutes les cibles présentent un résultat UNR, il est nécessaire de répéter le test. En cas de
résultats partiellement UNR, lorsqu'une ou plusieurs cibles présentent un résultat POS et que toutes les autres ont un résultat
UNR, il est recommandé de répéter le test comme indiqué ci-dessous. Dans de rares cas, des résultats incohérents peuvent être
observés lorsqu'un test répété est effectué sur les cibles générant initialement un résultat POS. Appliquer le protocole conforme aux
modes opératoires en vigueur du laboratoire.
Les échantillons peuvent être répétés à partir de leur(s) BD MAX UVE Sample Buffer Tube(s) correspondant(s), dans les délais
indiqués ci-dessus. Recommencer à la suite de la section Fonctionnement du BD MAX System.
9RÉSULTAT INDÉTERMINÉ
Des résultats indéterminés peuvent être obtenus en cas de dysfonctionnement du système. Les échantillons peuvent être répétés
à partir de leur(s) BD MAX UVE Sample Buffer Tube(s) correspondant(s), dans les délais indiqués ci-dessus. Recommencer à la
suite de la section Fonctionnement du BD MAX System. Pour l'interprétation des messages d'avertissement ou des codes d'erreur,
consulter le Manuel d'utilisation du BD MAX System6 (section Dépannage).
RÉSULTAT INCOMPLET
Des résultats incomplets peuvent être obtenus en cas d'échec de la préparation de l'échantillon ou de la PCR. Les échantillons
peuvent être répétés à partir de leur(s) BD MAX UVE Sample Buffer Tube(s) correspondant(s), dans les délais indiqués ci-dessus.
Recommencer à la suite de la section Fonctionnement du BD MAX System. Pour l'interprétation des messages d'avertissement ou
des codes d'erreur, consulter le Manuel d'utilisation du BD MAX System6 (section Dépannage).
PANNE DE CONTRÔLE EXTERNE
Les contrôles externes doivent fournir les résultats attendus quand ils sont testés. Si les échantillons doivent être répétés à cause
d'un résultat de contrôle externe erroné, ils doivent l'être à partir de leurs BD MAX UVE Sample Buffer Tubes avec des contrôles
externes fraîchement préparés, dans les délais indiqués ci-dessus. Recommencer à la suite de la section Fonctionnement du
BD MAX System.
LIMITES DE LA PROCÉDURE
• Le test BD MAX CT/GC ne peut être utilisé qu'avec le BD MAX System par un personnel formé à cet effet.
• Le prélèvement et l'analyse des échantillons d'urine et d'écouvillonnage vaginal prélevés par la patiente avec le test
BD MAX CT/GC ne sont pas conçus pour se substituer à un examen du col et à une biopsie endocervicale à des fins de
dépistage d'infection urogénitale. La cervicite, l'urétrite, les infections des voies urinaires et les infections vaginales peuvent
résulter d'autres causes ou des infections concomitantes peuvent survenir.
• L'analyse des échantillons d'urine chez l'homme et la femme avec le test BD MAX CT/GC doit être effectuée sur des
échantillons de premier jet d'urine pris au hasard. Au cours de l'évaluation clinique, des volumes d'urine de 20 mL à 60 mL ont
été analysés pour estimer les performances du test. L'incidence de la dilution sur des volumes plus importants peut se traduire
par une moindre sensibilité du test. L'incidence d'autres variables comme un prélèvement postérieur au premier jet d'urine n'a
pas été déterminée.
• La fiabilité des résultats du test dépend de l’adéquation du prélèvement de l’échantillon. Appliquer les méthodes indiquées dans
cette notice et dans le BD MAX UVE Specimen Collection Kit. Le non-respect des instructions de prélèvement de l’échantillon
risque d’augmenter le nombre de résultats non rapportables.
• Les lubrifiants ou autres produits contenant des substances comme les carbomères peuvent augmenter le taux de résultats non
rapportables obtenu avec le BD MAX CT/GC.
• Le test BD MAX CT/GC n'a pas été validé sur les échantillons d'écouvillonnages vaginaux prélevés par les patientes chez elles.
• Une interférence avec le test BD MAX CT/GC a été observée pour la matrice d’écouvillonnage vaginal en présence d’Aquagel
(0,46 mg/mL), de gel lubrifiant McKesson (59,3 mg/mL), de mousse contraceptive VCF*/de gel contraceptif Conceptrol*/
d’Acyclovir (˃25 µL/mL), de crème vaginale anti-démangeaison/de Métronidazole (˃2,5 µL/mL) et de sang total (˃0,66 µL/mL).
• Des interférences avec le test BD MAX CT/GC ont été observées pour la matrice d'urine en présence de sang total (>0,04 % v/v).
• L'incidence d'autres variables potentielles, comme les pertes vaginales, l'utilisation de tampons et les variables de prélèvement
des échantillons, n'a pas été évaluée.
• Comme pour la plupart des tests diagnostiques, les résultats du test BD MAX CT/GC doivent être interprétés en conjonction
avec les autres données de laboratoire et cliniques à la disposition du médecin.
• Des résultats erronés peuvent survenir par suite de prélèvement, de manipulation ou de conservation d'échantillon inappropriés,
d'erreur technique, de mélange d'échantillons ou parce que le nombre d'organismes de l'échantillon est au-dessous de niveau
de sensibilité analytique du test.
• Si le résultat du test BD MAX CT/GC est IND, INC ou UNR (pour une ou plusieurs cibles), le test doit être répété.
• Un résultat positif de BD MAX CT/GC n'indique pas forcément la présence d'organismes viables. Un résultat positif est
indicateur de la présence d'ADN de Chlamydia trachomatis et/ou de Neisseria gonorrhoeae.
• Le test BD MAX CT/GC ne peut pas être utilisé pour évaluer la réussite ou l'échec d'un traitement car les acides nucléiques de
Chlamydia trachomatis et de Neisseria gonorrhoeae peuvent persister à l'issue de l'antibiothérapie.
• Des résultats faussement négatifs peuvent survenir à cause de la perte d'acide nucléique provenant de l'inadéquation
du prélèvement, du transport ou de la conservation des échantillons, ou provenant d'une lyse inadéquate des cellules
bactériennes. Le contrôle du traitement de l'échantillon a été ajouté au test pour aider à identifier les échantillons contenant des
inhibiteurs de l'amplification par PCR. Le contrôle du traitement de l'échantillon n'indique pas si l'acide nucléique a été perdu à
cause de l'inadéquation du prélèvement, du transport ou de la conservation des échantillons, ni si les cellules bactériennes ont
été lysées correctement.
• Le test BD MAX CT/GC ne doit pas être utilisé pour l'évaluation d'une agression sexuelle présumée ou pour fournir d'autres
indications médico-légales. Il est recommandé de procéder à des analyses complémentaires lorsqu'un faux positif ou un faux
négatif peut avoir des conséquences médicales, sociales ou psychologiques graves.
• Comme pour tous les tests diagnostiques in vitro, les valeurs prédictives positives et négatives dépendent fortement de la
prévalence. Les performances du test BD MAX CT/GC peuvent varier en fonction de la prévalence et de la population testée.
• Le BD MAX CT/GC nécessite d'utiliser trois (3) canaux optiques du BD MAX System ; le canal FAM (475/520 nm), le canal
ROX (585/630 nm) et le canal VIC (530/565 nm). Les performances du canal optique restant n'ont pas été établies avec ce test.
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