Institut Paul Lambin Haute Ecole Léonard de Vinci - Travaux pratiques de chimie à l'attention des élèves de - Haute Ecole Léonard De Vinci
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Haute Ecole Léonard de Vinci
Institut Paul Lambin
Associé à l’Université Catholique de Louvain
Travaux
pratiques
de
chimie
à
l’attention
des
élèves
de
l’enseignement
secondaire.
Haute Ecole Léonard de Vinci
Institut Paul Lambin
Associé à l’Université Catholique de Louvain
Avant-‐propos
:
L’Institut
Paul
Lambin
(IPL),
membre
de
la
Haute
Ecole
VINCI,
propose
des
formations
de
type
court
(bachelier)
dans
cinq
disciplines
différentes
:
la
chimie,
la
biologie
médicale,
la
diététique,
l’imagerie
médicale
et
l’informatique
de
gestion.
Le
département
de
chimie
de
l’IPL
possède
les
infrastructures
et
l’appareillage
nécessaire
à
la
formation
de
techniciens
chimistes
et
met
depuis
plusieurs
années
ces
infrastructures
et
cet
appareillage
à
disposition
des
écoles
secondaires
qui
souhaitent
réaliser
des
travaux
pratiques
de
chimie
dans
le
domaine
de
la
chimie
analytique.
Les
professeurs
intéressés
sont
dans
un
premier
temps
invités
à
se
familiariser
aux
infrastructures
et
à
l’utilisation
du
matériel
mis
à
disposition.
Par
la
suite,
ils
réalisent
sous
leur
responsabilité
et
de
manière
autonome
les
manipulations
de
leur
choix
avec
leurs
élèves
selon
un
calendrier
à
convenir.
Un
professeur
de
l’IPL
est
toujours
présent
et
disponible
pour
répondre
aux
problèmes
qui
pourraient
survenir
mais
celui-‐ci
n’encadre
pas
directement
les
élèves.
Huit
analyses
chimiques
différentes
sont
proposées
(cf.
page
suivante).
Les
six
premières
s’adressent
davantage
aux
élèves
de
l’enseignement
technique
et
de
qualification
(environ
12
élèves
maximum
en
binôme)
et,
les
deux
dernières,
aux
élèves
de
l’enseignement
général
(environ
24
élèves
maximum
en
binôme).
La
participation
financière
demandée
aux
écoles
pour
couvrir
les
frais
de
matériel
et
la
consommation
des
produits
est
de
2,5
euros
par
élève
(un
minimum
de
35
euros
est
demandé
par
demi-‐journée
et
par
type
d’analyse,
quel
que
soit
le
nombre
d’étudiants
impliqués).
Durée
des
ateliers:
3
heures
/
analyse
Lieu
:
Institut
Paul
Lambin,
Laboratoires
A222
et
A223,
43
Clos
Chapelle-‐aux-‐Champs,
1200
–
Bruxelles,
à
proximité
du
métro
ligne
1B
(station
Alma).
Renseignements
et
inscriptions
:
Daniel
Legendre
daniel.legendre@vinci.be
02-‐764
46
72
2.
Analyses
:
1.
Dosage
du
contenu
en
alcool
d’une
boisson
par
Chromatographie
en
Phase
Gazeuse
(GC-‐FID)
Le
dosage
est
réalisé
en
établissant
une
droite
d’étalonnage
à
l’aide
de
solutions
étalons
d’éthanol
de
concentration
connue
et
d’un
standard
interne,
le
butan-‐1-‐ol.
2.
Dosage
du
toluène
dans
l’essence
par
Chromatographie
en
Phase
Gazeuse
(GC-‐FID)
Le
dosage
est
réalisé
en
établissant
une
droite
d’étalonnage
à
l’aide
de
solutions
étalons
de
toluène
de
concentration
connue
et
d’un
standard
interne,
le
nonane.
3.
Identification
et
dosage
du
principe
actif
d’un
médicament
par
HPLC
Le
principe
actif
d’un
médicament
est
identifié
par
son
temps
de
rétention
et
dosé
en
établissant
une
droite
d’étalonnage
à
l’aide
de
solutions
étalons
du
principe
actif
de
concentration
connue
et
d’un
standard
interne,
la
phénacétine.
+ +
4.
Dosage
des
ions
Na
et
K
dans
une
eau
minérale
par
photométrie
de
flamme
+ +
Les
ions
Na
et
K
sont
dosés
en
établissant
une
droite
d’étalonnage
à
l’aide
de
solutions
étalons
contenant
des
concentrations
connues
en
NaCl
et
KCl.
5.
Dosage
du
fer
par
titrage
potentiométrique
2+
Le
titrage
du
Fe
est
réalisé
à
l’aide
d’une
solution
de
dichromate
de
potassium
de
concentration
connue
en
utilisant
une
électrode
de
référence
au
calomel
et
une
électrode
indicatrice
de
platine.
6.
Dosage
de
deux
composés
organiques
par
spectroscopie
infrarouge
-‐
Les
composés
dosés
sont
la
cyclohexanone
et
le
DMF.
Dans
un
premier
temps,
les
spectres
IR
de
ces
composés
sont
pris
et
analysés.
Le
dosage
se
fait
ensuite
sur
base
du
pic
d’absorption
du
carbonyle
de
ces
composés
en
établissant
une
droite
d’étalonnage
à
l’aide
de
solutions
étalons
contenant
des
concentrations
connues
en
cyclohexanone
et
en
DMF.
7.
Dosages
pH-‐métriques
Un
acide
fort
(HCl)
et
un
acide
faible
(vitamine
C
dans
une
gélule)
sont
dosés
par
titrage
pH-‐métrique.
8.
Dosage
de
la
vitamine
C
par
titrage
redox.
La
vitamine
C
contenue
dans
un
jus
de
fruits
est
dosée
par
titrage
iodométrique.
3.
Haute Ecole Léonard de Vinci
Institut Paul Lambin
Associé à l’Université Catholique de Louvain
Travaux
pratiques
de
chimie
à
l’attention
des
élèves
de
l’enseignement
secondaire
Modes
opératoires
4.
Table
des
matières.
_________________________________________________________________________
1.
Dosage
de
l’éthanol
dans
des
boissons
alcoolisées
par
GC-FID........................................ 7
1.1.
Matériel
et
produits............................................................................................................................... 7
1.2.
Préparation
des
étalons
et
de
l’échantillon
à
analyser ............................................................. 7
1.3.
Etalonnage
et
analyse
de
l’inconnue................................................................................................ 8
1.4.
Exemple
de
chromatogramme .........................................................................................................10
1.5.
Exemple
d’étalonnage.........................................................................................................................10
2.
Dosage
du
toluène
dans
l’essence
par
GC-FID......................................................................11
2.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................11
2.2.
Analyse
qualitative
de
l'essence......................................................................................................11
2.3.
Dosage
du
toluène
dans
l'essence...................................................................................................12
2.4.
Chromatogramme
de
référence ......................................................................................................14
2.5.
Exemple
d’étalonnage.........................................................................................................................15
3.
Identification
et
dosage
du
principe
actif
d’un
médicament
par
HPLC. ......................16
3.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................16
3.2.
Principes
actifs
dosés
et
standard
interne...................................................................................16
3.3.
Contrôle
d’une
pipette
automatique
de
1,000
ml......................................................................17
3.4.
Préparation
des
solutions .................................................................................................................17
3.5.
Etalonnage
et
analyse
de
l’inconnue..............................................................................................18
3.6.
Exemple
de
chromatogramme .........................................................................................................19
3.7.
Exemple
d’étalonnage.........................................................................................................................20
3.8.
Volume
occupé
par
1,0000
g
d’eau
à
différentes
températures...........................................20
4.
Dosage
des
ions
Na+
et
K+
dans
une
eau
minérale
par
photométrie
de
flamme.......21
4.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................21
4.2.
Préparation
des
étalons
et
de
l’échantillon.................................................................................21
4.3.
Etalonnage
et
analyse
de
l’inconnue..............................................................................................22
5.
Dosage
du
fer
par
titrage
potentiométrique ........................................................................24
5.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................24
5.2.
Préparation
des
solutions
de
travail .............................................................................................24
5.3.
Schéma
du
montage.............................................................................................................................25
5.4.
Dosage
de
la
solution
de
fer ..............................................................................................................25
5.5.
Exemple
de
courbe
de
titrage...........................................................................................................26
6.
Dosage
d’un
mélange
cyclohexanone/
diméthylformamide
(DMF)
par
spectroscopie
infrarouge.................................................................................................................27
6.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................27
6.2.
Enregistrement
des
spectres
IR
des
produits
purs...................................................................28
6.3.
Etalonnage
et
analyse
de
l’inconnue..............................................................................................28
6.4.
Exemple
d’étalonnage.........................................................................................................................30
7.
Dosage
d’un
acide
fort
et
d’un
acide
faible
par
titrage
pH-métrique. ..........................31
7.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................31
7.2.
Dosage
d’une
solution
d’acide
chlorhydrique ............................................................................32
7.3.
Dosage
de
la
vitamine
C
contenue
dans
une
gélule...................................................................34
8.
Dosage
de
la
vitamine
C
dans
les
jus
de
fruits
par
titrage
iodométrique. ..................37
8.1.
Matériel
et
produits.............................................................................................................................37
8.2.
Dosage
de
la
vitamine
C ......................................................................................................................38
5.
Annexes .................................................................................................................................................40
Annexe
1.
Mode
d’emploi
de
la
micro-seringue
GC ...........................................................................40
Annexe
2.
Procédure
d'analyse
sur
GC
(appareil
GC
N°
6)..............................................................41
Annexe
3.
Utilisation
des
intégrateurs. .................................................................................................42
6.
1. Dosage de l’éthanol dans des boissons alcoolisées par GC-FID
_____________________________________________________________________________________
1.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
1 erlen de 100 ml
1 berlin de 100 ml
1 ballon jaugé de 100 ml + bouchon
1 entonnoir+ filtre plissé
1 pipette Pasteur + poire
1 pipette jaugée de 5, 10, 20 et 25 ml
1 propipette
4 flacons de 50 ml + bouchons
1 seringue GC
Produits :
Solution stock d’éthanol (solution A, 5 g/100 ml d’éthanol)
Solution stock de butan-1-ol (solution B, environ 5 g/100 ml de butan-1-ol)
Les concentrations exactes sont indiquées sur les flacons.
1.2. Préparation des étalons et de l’échantillon à analyser
Préparation des étalons
Les étalons sont préparés à partir des solutions d’éthanol et de butan-1-ol fournies
7.
Dans 4 flacons bouchés introduire les volumes suivants à la pipette jaugée :
1 10 ml de A 30 ml de B
2 20 ml de A 20 ml de B
3 25 ml de A 15 ml de B
4 30 ml de A 10 ml de B
Homogénéiser les mélanges.
Préparations de l’échantillon à analyser
Filtrer les boissons gazeuses et la bière deux fois à l’aide d’un entonnoir en verre et d’un filtre en
papier plissé.
Dans un jaugé de 50 ml , ajouter à la pipette jaugée 20 ml de solution B et un volume précis de la
boisson choisie (cf. ci-dessous). Mettre au trait de jauge avec de l’eau.
- Pour la bière (∼5%), doser 25 ml (prélever à la pipette jaugée)
- Pour le vin (∼12%), doser 10 ml (prélever à la pipette jaugée).
- Pour les alcools secs (∼40%), doser 3 ml (prélever à la pipette automatique).
1.3. Etalonnage et analyse de l’inconnue
Conditions d’analyse :
Éluant : azote (N2)
Phase stationnaire : polydiméthylsiloxane (phase liquide immobilisée sur les parois internes d'un
capillaire).
Programmation en température : 50 °C (mode isotherme).
Injecter 1 µl de chacune des 4 solutions étalons ainsi que 1 µl de la solution de boisson
(l’utilisation de la micro-seringue et de la GC est décrite dans les annexes 1 à 3).
Compléter les tableaux ci-dessous : calculer les concentrations des différents étalons, reporter les
surfaces lues sur les chromatogrammes, calculer les rapports de surface.
Etalons [éthanol] en g/100ml [butan-1-ol] en g/100ml [éthanol] / [butan-1-ol]
1
2
3
4
8.
Etalons Surface pic éthanol Surface pic butan-1-ol Séthanol / Sbutan-1-ol
1
2
3
4
Etablir la droite d’étalonnage en portant le rapport des surfaces en fonction du rapport des
concentrations.
Pour le chromatogramme de la boisson, calculer le rapport des surfaces des pics de l’éthanol sur
celui du butan-1-ol.
Reporter sur le graphique le rapport de surface pour la boisson et en déduire le rapport des
concentrations, qui correspond aussi au rapport des masses dissoutes dans la préparation de
l’échantillon. Appelons ce rapport Y :
masse (inconnue) d'éthanol
Y =
masse (connue) de standard interne (butan -1- ol)
La masse d’éthanol présente dans le volume prélevé de boisson (3, 10 ou 25 ml) peut donc être
facilement calculée puisque la masse dissoute de standard interne est connue.
€ Calculer ensuite la masse d’éthanol par 100 ml de boisson.
Enfin, connaissant la densité de l’éthanol (0,789 g/ml), calculer la concentration en ml d’éthanol
pur par 100 ml de boisson (ce qui correspond aux ‘degrés’ indiqués sur la bouteille).
9.
1.4. Exemple de chromatogramme
1.5. Exemple d’étalonnage
10.2. Dosage du toluène dans l’essence par GC-FID
_____________________________________________________________________________________
2.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
6 tubes à essais + portoir
1 pipette automatique 1 ml + pointes jetables
1 pipette graduée de de 5 ml et de 10 ml + propipette
2 pipettes Pasteur + poire
1 jaugé de 50 ml
1 seringue GC
Produits :
Essence, indice d’octane 95 ou 98
n-Pentane
Toluène
Nonane
2.2. Analyse qualitative de l'essence
Le but de cette analyse est d'observer les différents constituants de l'essence commerciale et
d’identifier certains produits, dont le toluène, à l'aide d’un chromatogramme de référence.
Pour cette analyse, l’essence est diluée dans du n-pentane.
- Solution A : dans un tube à essais, introduire 0,5 ml d'essence (pipette automatique) et 5 ml de
n-pentane (pipette graduée), homogénéiser. Il s’agit d’un mélange qualitatif, les volumes ne
doivent pas être mesurés avec une grande précision.
11.Conditions d’analyse:
Éluant : azote (N2)
Phase stationnaire : polydiméthylsiloxane (phase liquide immobilisée sur les parois internes d'un
capillaire).
Programmation en température : 5 min à 40°C suivi d’un gradient de 5°C/minute jusqu’à une
température finale de 110°C.
Injectez 1 µl de la solution A (l’utilisation de la micro-seringue et de la GC est décrite dans les
annexes 1 à 3).
2.3. Dosage du toluène dans l'essence.
Le standard interne choisi pour ce dosage est le n-nonane.
- Solution B : dans un jaugé de 50 ml, peser avec précision environ 1,000 g de n-nonane (pipette
Pasteur), porter au trait à l'aide de n-pentane et homogénéiser.
- Solution C : dans un tube à essais, introduire 1 ml d'essence (pipette automatique) et 10 ml de
solution B (pipette graduée), homogénéiser.
Conditions d’analyse:
Éluant : azote (N2)
Phase stationnaire : polydiméthylsiloxane (phase liquide immobilisée sur les parois internes d'un
capillaire).
Programmation en température : 5 min à 40°C suivi d’un gradient de 5°C/minute jusqu’à une
température finale de 110°C.
Injecter 1 µl de la solution C.
Identifier le pic correspondant au n-nonane par comparaison avec le chromatogramme obtenu
lors de l’analyse qualitative.
Etalonnage et analyse de l’inconnue
- Solution D : dans un jaugé de 50 ml, peser 1,000 g de toluène (pipette Pasteur) et porter au trait
à l'aide de n-pentane.
Dans des tubes à essais, préparer les mélanges suivants :
ml D ml B [toluène] g/100 ml [n-nonane] g/100 ml [toluène] / [n-nonane]
1 1 9
2 2 8
3 4 6
4 6 4
5 8 2
12.Conditions d’analyse:
Éluant : azote (N2)
Phase stationnaire : polydiméthylsiloxane (phase liquide immobilisée sur les parois internes d'un
capillaire).
Programmation en température : 70°C (mode isotherme).
Injecter 1 µl des solutions 1 à 5.
Reporter dans le tableau ci-dessous les surfaces lues sur le chromatogramme des pics
correspondant au toluène et au n-nonane et calculer le rapport des surfaces.
Surface pic toluène Surface pic n-nonane S toluène / S n-nonane
1
2
3
4
5
Etablir la droite d’étalonnage en portant le rapport des surfaces en fonction du rapport des
concentrations.
Sur base de l’analyse quantitative de l’essence (cf. 2.2), calculer le rapport des surfaces des pics
du toluène et du n-nonane.
Reporter sur le graphique ce rapport et en déduire le rapport des concentrations.
Appelons ce rapport Y :
concentration (inconnue) en toluène
Y =
concentration (connue) en standard interne (n - nonane)
La concentration en toluène dans la solution C qui a servi à l’analyse de l’essence peut donc être
calculée aisément.
€ Pour connaître la concentration réelle du toluène dans l’essence il faut encore tenir compte de la
dilution de l’essence dans la solution C.
Remarque : On peut utiliser le même étalonnage pour estimer la concentration en benzène dans
l’essence.
! Les solutions sont à jeter dans le bidon de récupération « solvants non chlorés ».
13.2.4. Chromatogramme de référence
14.2.5. Exemple d’étalonnage
15.3. Identification et dosage du principe actif d’un médicament par HPLC.
_____________________________________________________________________________________
3.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
1 pipette automatique de 1 ml + pointes jetables
1 berlin de 50 ml
2 jaugés de 25 ml
5 tubes à essais + portoir
1 seringue HPLC
Produits :
Solution de paracétamol dans l’acétonitrile = solution A
Solution d’acide acétylsalicylique (aspirine) dans l’acétonitrile = solution B
Solution de phénacétine dans l’acétonitrile = solution C
La concentration exacte des solutions est indiquée sur les flacons (environ 100 mg/ 100 ml).
Mélange eau/ acétonitrile 70/30
Eluant : 30% d’acétonitrile (CH3CN), 70% d’eau + 2% d’acide acétique (CH3COOH)
3.2. Principes actifs dosés et standard interne
Principes actifs envisagés
Acide acétylsalicylique (aspirine) Paracetamol (Dafalgan)
16.Standard interne (SI):
Phénacétine
3.3. Contrôle d’une pipette automatique de 1,000 ml
Peser 5 fois 1,000 ml d’eau déminéralisée délivrés par la pipette automatique utilisée.
Calculer le volume correspondant à la pesée (grâce à la densité de l’eau à la température du jour,
cf. table page 23).
Calculer le volume moyen obtenu et comparer à la valeur attendue :
volume moyen (ml) − 1 ml
Erreur sur la moyenne = x 100
1 ml
qui doit être inférieur à 1 % (en valeur absolue)
€ l’écart relatif afin d’évaluer la dispertion des résultats (précision) :
Calculer également
volume maximum (ml) − volume mininum (ml)
Ecart relatif = x 100
volume moyen (ml)
qui doit être inférieur à 1%
€
3.4. Préparation des solutions
Dilution du paracétamol.
Prélever 1000 µl (à l’aide de la pipette automatique) de la solution A et transférer dans un ballon
jaugé de 25 ml. Porter à 25 ml à l’aide de solvant (mélange d’eau 70% et d’acétonitrile 30%) en
portant au trait à l’aide de la pipette automatique. Calculer la concentration de cette solution (=
solution D).
Dilution de la phénacétine (standard interne, SI).
Prélever 1000 µl (à l’aide de la pipette automatique) de la solution C et transférer dans un ballon
jaugé de 25 ml. Porter à 25 ml à l’aide de solvant (mélange d’eau 70% et d’acétonitrile 30%) en
portant au trait à l’aide de la pipette automatique. Calculer la concentration de cette solution (=
solution E).
17.Préparation des étalons.
Préparer les étalons comme indiqué dans le tableau ci-dessous.
Bien homogénéiser le contenu des tubes (au vortex).
Étalons Volume de solution D Volume de solution B Volume de solution E
(paracétamol) (acide acétylsalicylique) (phénacétine)
1 200 µl 200 µl 600 µl
2 300 µl 300 µl 400 µl
3 350 µl 350 µl 300 µl
4 400 µl 400 µl 200 µl
Dilution de l’inconnue.
Dans un flacon, mettre à la pipette automatique 600 µl d’inconnue et 400 µl de solution E
(standard interne). Homogénéiser.
3.5. Etalonnage et analyse de l’inconnue
Conditions de la chromatographie :
Éluant : 30% d’acétonitrile (CH3CN), 70% d’eau + 2% d’acide acétique (CH3COOH).
Débit 1 ml/min.
Phase stationnaire : C18, particules de 3,5 ou 5 µm.
Détecteur UV : longueur d’onde 254 nm, sensibilité 0,5 AUFS.
Injections :
Chaque chromatographie dure environ 7 min. Il faut commencer à injecter les solutions dès que
possible.
Injecter successivement :
25 µl des solutions D, B et E (permettant d’identifier les composés par leur temps de rétention).
25 µl des 4 étalons et 25 µl de la solution inconnue diluée.
Compléter les tableaux ci-dessous : calculer les concentrations des étalons, reporter les surfaces
lues sur les chromatogrammes, calculer les rapports de surface.
Concentration Concentration Conc. en
Concentration Conc. en para /
Étalons en para en mg / en aspirine en aspirine/ conc en
en SI en mg / ml conc. en SI
ml mg / ml SI
1
2
3
4
18.Étalons Surface pic para Surface pic aspirine Surface pic SI Sasp / SSI SPara / SSI
1
2
3
4
Etablir la droite d’étalonnage en portant le rapport des surfaces en fonction du rapport des
concentrations.
Sur base du chromatogramme de la solution inconnue diluée, déterminer la nature du principe
actif présent dans l’inconnue et calculer le rapport des surfaces du pic du principe actif sur celui
du SI.
Reporter sur la droite d’étalonnage le rapport des surfaces pour la solution inconnue diluée et en
déduire le rapport des concentrations. Appelons ce rapport Y.
Y =
La concentration du standard interne dans la solution inconnue diluée est aisément calculable
(400 µl de solution E portés à 1000 µl).
Déduire la concentration en médicament dans l’inconnue diluée.
Un dernier calcul qui tient compte de la dilution de l’inconnue doit donc encore être fait pour
obtenir la concentration du médicament dans la solution reçue non diluée.
3.6. Exemple de chromatogramme
Paramètres de l’intégrateur :
width 5,
att 2,
min area 1000,
speed 10,
stop time 10 min
slope : faire le S-test (shift down S-
test enter)
19.3.7. Exemple d’étalonnage
3.8. Volume occupé par 1,0000 g d’eau à différentes températures
Volume (ml)
Température, T (°C)
At T Corrected to 20°C
10 1.0013 1.0016
11 1.0014 1.0016
12 1.0015 1.0017
13 1.0016 1.0018
14 1.0018 1.0019
15 1.0019 1.0020
16 1.0021 1.0022
17 1.0022 1.0023
18 1.0024 1.0025
19 1.0026 1.0026
20 1.0028 1.0028
21 1.0030 1.0030
22 1.0033 1.0032
23 1.0035 1.0034
24 1.0037 1.0036
25 1.0040 1.0037
26 1.0043 1.0041
27 1.0045 1.0043
28 1.0048 1.0046
29 1.0051 1.0048
30 1.0054 1.0052
20.4. Dosage des ions Na+ et K+ dans une eau minérale par photométrie de
flamme
_____________________________________________________________________________________
4.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
1 berlin de 100 ml
7 jaugés de 100 ml
1 pipette jaugée de 10 ml + propipette
1 burette graduée de 25 ml
7 tubes à essais + portoir
Produits :
NaCl solide (MM 58,44)
KCl solide (MM 74,55)
4.2. Préparation des étalons et de l’échantillon.
Préparation des étalons
Peser exactement environ 0,25 g de NaCl et 0,20 g de KCl dans un même récipient (berlin).
Dissoudre les deux sels dans un peu d’eau et porter à 100 ml dans un ballon jaugé (= solution
A).
Diluer la solution A exactement 10 fois à l’aide d’une pipette jaugée de 10 ml et d’un ballon
jaugé de 100 ml (= solution B).
Remplir une burette avec la solution B et préparer 5 jaugés de 100 ml (bien les rincer à l’eau
déminéralisée).
Introduire dans chaque jaugé, le volume de solution B indiqué dans le tableau ci-dessous et
compléter avec de l’eau déminéralisée jusqu’au trait de jauge. Bien homogénéiser.
21.Calculer les concentrations en Na+ et K+ des différents étalons.
Volume en ml Concentration en Na Concentration en K dans
Étalons
de solution B dans le jaugé (ppm) le jaugé (ppm)
1 2
2 4
3 6
4 8
5 10
Préparation de l’échantillon / analyse d’une eau minérale en bouteille
Sur l’étiquette de l’eau minérale à analyser, se trouve la concentration en Na et K. Si celles-ci
sont plus élevées que les concentrations maximales de l’étalonnage, procéder à une dilution
appropriée de cette eau avec de l’eau déminéralisée.
4.3. Etalonnage et analyse de l’inconnue
La photométrie de flamme est une méthode très sensible qui demande beaucoup de soin tant dans
la préparation des solutions que lors de la mesure elle-même.
N.B. : Mise en route de l'appareil 10 minutes avant les premières mesures.
Vérifier le débit de l'appareil (cylindre gradué rempli d’eau + chronomètre) et la stabilité de la
flamme. Le débit doit rester constant tout au long du dosage.
Procéder aux mesures :
- Transférer les solutions dans des tubes à essais.
- Régler le filtre pour la mesure du Na.
- Régler le zéro sur l’eau déminéralisée et le 100 sur la solution la plus concentrée.
- Passer toutes les solutions étalons successivement et noter les intensités de lumière émises.
- Faire aspirer enfin la boisson (telle quelle ou diluée suivant le cas).
- Régler le filtre pour la mesure du K.
- Régler le zéro sur l’eau déminéralisée et le 100 sur la solution la plus concentrée.
- Passer toutes les solutions étalons successivement et noter les intensités de lumière émises.
- Faire aspirer enfin la boisson (telle quelle ou diluée suivant le cas).
Pour plus de précision, les séries de mesures peuvent être répétées une ou deux fois. Dans ce cas,
les valeurs moyennes des intensités de lumière seront calculées pour les étalons et l’échantillon à
analyser.
22.Étalons Signal Na mesuré Signal K mesuré
1
2
3
4
5
Porter en graphique les intensités (ou intensités moyennes si plusieurs mesures ont été réalisées)
des étalons en fonction de leurs concentrations exprimées en ppm de Na et de K (deux droites).
Ne pas oublier le point « 0,0 ».
En portant les intensités mesurées pour le Na et le K de l’eau minérale (ou de sa solution diluée)
sur le graphique, on trouve les concentrations recherchées en Na ou K.
23.5. Dosage du fer par titrage potentiométrique
_________________________________________________________________________
6 Fe2+ + Cr2O7 2- + 14 H+ 6 Fe3+ + 2 Cr3+ + 7 H2O
5.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
1 berlin de 100 ml
1 berlin de 250 ml
1 pipette pasteur + poire
2 jaugés de 100 ml
1 pipette jaugée de 10 ml et de 25 ml + propipette
1 burette graduée de 25 ml (1/10)
1 électrode au calomel
1 électrode de platine
1 potentiomètre
1 agitateur magnétique + bareau
Produits :
Solution stock de K2Cr2O7 (environ 0,0200 M).
La concentration exacte est indiquée sur le flacon.
Solution stock de Fe2+ (environ 0,1000 M).
La concentration exacte est à déterminer par titrage.
Solution 1M en H2SO4
5.2. Préparation des solutions de travail
- Solution de K2Cr2O7 :
Diluer précisément la solution stock 10 fois par H2SO4 1M (préparer 100 ml). Le ballon jaugé est
24.rempli avec l’acide sulfurique jusqu’à quelque distance du trait de jauge, ensuite il est complété
avec de l’eau déminéralisée à la pissette.
- Solution inconnue de Fe2+:
Diluer précisément la solution stock 10 fois avec de l’eau dans un ballon jaugé (préparer 100
ml).
5.3. Schéma du montage
Sol K2Cr2O7 (2 10-3M)
Electrode au
Electrode Pt
Calomel
Sol Fe2+ Potentiomètre
5.4. Dosage de la solution de fer
Préparer une burette remplie de la solution diluée en K2Cr2O7.
Prélever exactement 25 ml (pipette jaugée) de solution de Fe+2 et transvaser dans un berlin de
250 ml.
Titrer la solution inconnue en n’oubliant pas d’ajouter un barreau magnétique et en veillant à
bien homogénéiser la solution en cours de titrage. Noter les valeurs des différences de potentiel
après chaque ajout d’agent titrant Le premier titrage sera établi par des ajouts systématiques de 1
ml.
Tracer le graphique expérimental obtenu (différence de potentiel en fonction du volume de
titrant) sur papier millimétré et déterminer la position approximative du point d’équivalence.
Recommencer le même titrage en espaçant les mesures au début et à la fin du titrage, mais par
0,2 ml aux alentours du volume de l’équivalence (de 2 ml avant à 2 ml après).
Tracer à nouveau le graphique expérimental sur papier millimétré et déterminer la position
précise du point d’équivalence.
Grâce au volume à l’équivalence de solution de K2Cr2O7 de concentration exactement connue,
calculer la concentration en Fe2+ de la solution inconnue diluée de fer.
Déchets
Les solutions contenant du chrome ne peuvent pas être jetées à l’évier. Les verser dans le
bidon de récupération prévu à cet effet.
25.5.5. Exemple de courbe de titrage
vol K2Cr2O7 (ml) E (mV) Vol K2Cr2O7 (ml) ΔE/ΔV
0 321
1 350 0,5 29,0
2 370 1,5 20,0
3 380 2,5 10,0
5 394 4 7,0
10 418 7,5 4,8
15 442 12,5 4,8
17 457 16 7,5
18 465 17,5 8,0
19 477 18,5 12,0
19,5 486 19,25 18,0
20 498 19,75 24,0
20,2 512 20,1 70,0
20,5 525 20,35 43,3
20,6 542 20,55 170,0
20,7 562 20,65 200,0
Equivalence 20,8 595 20,75 330,0
20,9 604 20,85 90,0
21 617 20,95 130,0
21,5 638 21,25 42,0
22 647 21,75 18,0
25 680 23,5 11,0
Dérivée première ↓ équivalence
26.6. Dosage d’un mélange cyclohexanone/ diméthylformamide (DMF) par
spectroscopie infrarouge
____________________________________________________________________________
Comme en spectroscopie UV-visible, la relation de Lambert-Beer est applicable dans le domaine
de l'infra-rouge.
A = absorbance ; ε = coefficient d'absorptivité molaire ;
C = concentration (mol/L) du composé analysé
Idéalement, le composé dosé présentera un pic d'absorbance bien isolé et suffisamment intense.
L’objectif de la manipulation est de déterminer :
- le coefficient d'absorptivité molaire de la liaison carbonyle de deux liquides : DMF et
cyclohexanone.
- la composition d'un échantillon (DMF + cyclohexanone) à l'aide des coefficients d'absorptivité
molaire déterminés.
6.1. Matériel et produits
Matériel individuel (ou binôme):
6 tubes rodés + bouchons + portoir
1 pipette automatique de 1 ml + pointes jetables
1 pipette graduée à piston de 10 ml
1 cellule de mesure pour spectre en film
1 cellule de mesure à épaisseur fixe
Produits :
Cyclohexane
N,N-diméthylformamide (DMF)
Cyclohexanone
Solution stock de DMF et de cyclohexanone dans du cyclohexane (environ 2g/l et 5 g/l,
27.respectivement – la concentration exacte est indiquée sur le flacon)
Dichlorométhane
6.2. Enregistrement des spectres IR des produits purs
Utilisation des pastilles rondes de KBr.
! Les cellules de KBr sont hygroscopiques : éviter tout contact avec les doigts ou avec l'eau et les
alcools légers (méthanol, éthanol, propanol). Conserver les cellules de KBr dans un dessiccateur.
Après utilisation, nettoyer immédiatement les fenêtres rondes avec du CH2Cl2 sec (imbiber un
papier absorbant) et les remettre dans le dessicateur.
Mesures.
Enregistrer dans un premier temps le BACKGROUND (spectre de l’air) en ne plaçant aucune
cellule dans l’appareil (balayage entre 400 et 4000 cm-1)
Prendre ensuite le spectre en film des produits à l’état pur entre deux pastilles de KBr:
cyclohexane, cyclohexanone et DMF :
-Prendre deux pastilles de KBr et nettoyer leurs surfaces à l’aide de CH2Cl2.
-Déposer à la surface d’une des deux pastilles une goutte de produit à analyser.
-Recouvrir à l’aide de la deuxième pastille et monter les deux pastilles dans une cellule.
-Enregistrer le spectre.
Repérer la bande C=O des composés à doser et déterminer le nombre d’onde pour lequel
l’absorption est maximale.
6.3. Etalonnage et analyse de l’inconnue
Les solutions étalons sont préparées à partir d’une solution stock de cyclohexanone et de DMF
dans du cyclohexane (= solution A).
Préparer les solutions nécessaires à l’étalonnage comme indiqué dans le tableau suivant:
Volume sol. A (ml) Volume de cyclohexane (ml)
(pipette automatique) (pipette graduée à piston)
Cyclohexane pur - -
Étalon 1 0.50 10.00
Étalon 2 0.50 7,00
Étalon 3 1.00 10,00
Étalon 4 1.00 8,00
Étalon 5 1,50 7.50
Utilisation de la cellule IR à épaisseur fixe (à ne jamais démonter !)
Remplir la cellule à épaisseur fixe de cyclohexane.
Enregistrer le spectre de cette cellule comme BACKGROUND, en restreignant la plage de
28.nombres d’ondes à la zone d’intérêt (de 1800 à 1600 cm-1).
Ouvrir une nouvelle fenêtre et enregistrer le spectre du cyclohexane. Ceci permet d’établir la
ligne de base.
Dans la même fenêtre, prendre successivement le spectre IR des différentes solutions étalons
(afficher tous les étalons sur la même feuille).
Choisir l’absorbance comme ordonnée et relever les valeurs d’absorbances du pic du carbonyle
de la cyclohexanone et du DMF pour chacune des solutions.
[cyclohexanone] A cyclohexanone
Cyclohexane pur 0 0
Étalon 1
Étalon 2
Étalon 3
Étalon 4
Étalon 5
[DMF] A DMF
Cyclohexane pur 0 0
Étalon 1
Étalon 2
Étalon 3
Étalon 4
Étalon 5
Etablir la droite d’étalonnage de la cyclohexanone et du DMF en portant en graphique
l’absorbance mesurée en fonction de la concentration.
L'inconnue est un mélange de cyclohexanone et de DMF dans du cyclohexane.
Diluer la solution inconnue 5x (2 ml inconnue + 8 ml cyclohexane).
Prendre le spectre IR dans la cellule à épaisseur fixe (BACKG : cyclohexane identique à
l’étalonnage). Les absorbances des deux pics analysés doivent être compris dans l’étalonnage.
Dans le cas contraire, adapter la dilution.
Sur base des droites d’étalonnage, déterminer les coefficients d’absorptivité molaire de la liaison
carbonyle de la cyclohexanone et du DMF ainsi que les concentrations en cyclohexanone et en
DMF de la solution inconnue.
Nettoyer la cellule à épaisseur fixe à l’aide de CH2Cl2 et la sécher, sans la démonter, puis la
replacer dans le dessicateur.
29.6.4. Exemple d’étalonnage
30.7. Dosage d’un acide fort et d’un acide faible par titrage pH-métrique.
_____________________________________________________________________________
7.1. Matériel et produits
Matériel pour deux élèves :
1 pH-mètre + 1 électrode de verre combinée
1 agitateur magnétique + 1 barreau magnétique
1 erlen de 250 ml
1 berlin de 250 ml
1 pipette jaugée de 20 ml
1 propipette
1 burette graduée de 25 ml + 1 pince + 1 statif
1 mortier + 1 pilon
Produits pour deux élèves :
1 solution d’indicateur (phénolphtaléine)
200 ml de NaOH 0,2 M
100 ml d’acide chlorhydrique 23% (« Forever Products », disponible en droguerie), dilué 50X
2 gélules contenant environ 500 mg de vitamine C (« C-will », Will Pharma)
31.7.2. Dosage d’une solution d’acide chlorhydrique
7.2.1. Introduction
L’acide chlorhydrique (HCl) est un acide fort car il est
totalement dissocié en solution, en ions H3O+ et Cl- .
L’hydroxyde de sodium (NaOH) est une base forte car elle
est totalement dissociée en solution en ions OH- et Na+ .
La réaction entre HCl et NaOH est :
HCl + NaOH → H2O + NaCl
Ou sous forme ionique
H3O+ + Cl- + Na+ + OH- → 2 H2O + Cl- + Na+
Cl- + Na+ étant des ions spectateurs, l’équation ionique nette se réduit à :
H3O+ + OH - → 2H2O
A l’équivalence, c’est-à-dire lorsque le nombre de moles de base ajoutées est exactement égal au
nombre de moles d’acide initialement présent, le pH de la solution sera égal à 7. En effet,
lorsqu’une mole d’HCl a réagi avec une mole NaOH, la solution ne contient que des ions Na+ et
Cl-. On obtiendrait la même solution en dissolvant une mole de NaCl dans de l'eau.
Une courbe de titrage de l’acide chlorhydrique par de l’hydroxyde de soude représente la
variation de pH au cours de l'addition progressive de NaOH à une solution d'HCl (cf. ci-
dessous).
Titrage de 5 10-3 mole
d’HCl par une solution de
NaOH 0,1M
32.7.2.2. Mode opératoire
a. Titrage d’orientation
- Remplir la burette à l’aide de la solution de NaOH 0,2 M, mettre au trait de jauge (0 ml)
- Dans un erlen de 250 ml, introduire à la pipette jaugée 20 ml de la solution d’HCl à doser
- Ajouter quelques gouttes de phénolphtaléine
- Titrer la solution d’HCl par ajout progressif de NaOH (bien homogénéiser la solution lors de
chaque ajout de NaOH) jusqu’au changement de couleur de la solution (virage de l’incolore au
rose)
- Noter le volume de titrant (celui ci devrait être d’environ 14 ml).
b. Titrage pH-métrique
- Remplir la burette à l’aide de la solution de NaOH 0,2 M, mettre au trait de jauge (0 ml)
- Dans un berlin de 250 ml, introduire à la pipette jaugée, 20 ml de la solution d’HCl à doser
- Placer dans le berlin l’électrode de verre (cf. montage ci-dessous)
Electrode de verre
pH-mètre
Agitateur magnétique
- Ajouter un peu d’eau pour immerger convenablement l’électrode de verre, noter le pH initial
- Ajouter la solution de NaOH par ajout successif de 1 ml, noter à chaque ajout la valeur du pH
(bien homogénéiser la solution lors de chaque ajout de NaOH)
- 1 ml avant l’équivalence (déterminé au point « a » ci-dessus), procéder à des ajouts successifs
de 0,2 ml jusqu’à 1 ml après l’équivalence, noter à chaque ajout la valeur du pH
- Terminer le titrage par des ajouts de 1 ml
7.2.3. Exploitation des résultats
- Sur papier millimétré, tracer le graphique du pH en fonction du volume de NaOH ajouté
- Déterminer le volume équivalent par la méthode des tangentes
- Calculer la concentration molaire de la solution d’HCl diluée et de la solution d’HCl concentrée
« forever »
33.7.3. Dosage de la vitamine C contenue dans une gélule
7.3.1. Introduction
La vitamine C ou acide ascorbique est un acide faible de force comparable à l’acide acétique.
C6H8O6 + H2O C6H7O6- + H3O+
Remarque : L’acide ascorbique ne possède pas de fonction acide carboxylique mais l’ion
ascorbate est stabilisé par délocalisation de la charge négative, ce qui rend la fonction -OH acide.
L’acide ascorbique étant un acide faible la molécule est très peu dissociée. Une solution d’acide
ascorbique contient donc beaucoup plus de molécules de C6H8O6 que d'ions C6H7O6- et H3O+
Si une base forte est ajoutée à la solution d’acide ascorbique, la quasi-totalité des ions OH- (aq)
additionnés seront écartés de la solution à la suite de la réaction :
34.C6H8O6 + OH- C6H7O6- + H2O
Lorsqu'une mole de NaOH a réagi avec une mole d’acide ascorbique (point d’équivalence), la
solution a la même composition que si on y avait dissous une mole d’ascorbate de sodium,
C6H7O6Na. Cette solution n'est pas neutre puisque C6H7O6- est un ion basique et Na+ un ion
neutre. A l’équivalence, la solution sera donc basique comme le montre la courbe ci-dessous.
Titrage de 500 mg de
vitamine C
par une solution de NaOH
0,2 M
7.3.2. Mode opératoire
a. Mise en solution de la vitamine C
A réaliser pour chaque titrage :
- Broyer dans un mortier le contenu d’une gélule « C-
will » contenant environ 500 mg de vitamine C
- Transférer quantitativement le contenu du mortier
dans un berlin de 250 ml
- Ajouter environ 100 ml d’eau pour mettre en
solution l’acide ascorbique
b. Titrage d’orientation
- Remplir la burette à l’aide de la solution de NaOH 0,2 M, mettre au trait de jauge (0 ml)
- Ajouter quelques gouttes de phénolphtaléine au berlin contenant le comprimé de vitamine C
broyé et dissous
- Titrer la solution par ajout progressif de NaOH (bien homogénéiser la solution lors de chaque
ajout de NaOH) jusqu’au changement de couleur de la solution (virage de l’incolore au rose).
- Noter le volume de titrant (celui-ci devrait être d’environ 14 ml)
35.c. Titrage pH-métrique
- Remplir la burette à l’aide de la solution de NaOH 0,2 M, mettre au trait de jauge (0 ml)
- Placer dans le berlin contenant le comprimé de vitamine C broyé et dissous, l’électrode de verre
(cf. montage réalisé lors du titrage de la solution d’HCl)
- Ajouter si nécessaire un peu d’eau pour immerger convenablement l’électrode, noter le pH
initial
- Ajouter la solution de NaOH par ajout successif de 1 ml, noter à chaque ajout la valeur du pH
(bien homogénéiser la solution lors de chaque ajout de NaOH)
- 1 ml avant l’équivalence (déterminé au point « b » ci-dessus), procéder à des ajouts successifs
de 0,2 ml jusqu’à 1 ml après l’équivalence, noter à chaque ajout la valeur du pH
- Terminer le titrage par des ajouts de 1 ml
7.3.3. Exploitation des résultats
- Sur papier millimétré, tracer le graphique du pH en fonction du volume de NaOH ajouté
- Déterminer le point d’équivalence par la méthode des tangentes
- Calculer la quantité de vitamine C présente dans un comprimé (MM acide ascorbique : 176,12
g/mole)
_________________________________
36.8. Dosage de la vitamine C dans les jus de fruits par titrage iodométrique.
_____________________________________________________________________________
8.1. Matériel et produits
Matériel commun :
Presse-fruits
Matériel pour deux élèves :
1 burette de 25 ml
2 erlens de 250 ml
1 entonnoir+ filtre plissé
1 pipette jaugée de 20 ml
1 pipette jaugée de 25 ml
1 propipette
1 cylindre gradué de 5 ml
1 cylindre gradué de 50 ml
Produits pour deux élèves :
2 oranges ou 4 citrons ou du jus de fruits en carton à apporter par les élèves
200 ml d’une solution d’iode contenant environ 1,3 g/litre d’iode (MM I2 : 253,81 g/mole) et
2g/litre d’iodure de potassium
100 ml d’une solution d’acide ascorbique à exactement 1,000 mg/ml (MM acide ascorbique:
176,12 g/mole)
1 solution d’acide acétique 0,1 M
1 solution d’amidon à 0,5%
37.8.2. Dosage de la vitamine C
8.2.1. Introduction
La vitamine C ou acide ascorbique est une molécule soluble dans l’eau qui agit comme
antioxydant ainsi que comme co-facteur enzymatique. Une carence importante en vitamine C est
à l’origine de la maladie appelée scorbut.
Contenu
en
vitamine
C
de
différents
fruits
(mg/100g)
oranges
49
citrons
39
kiwis
85
fraises
49
goyaves
273
Source : Table belge de composition des aliments – Nubel, quatrième édition, juin 2014
Le dosage de la vitamine C dans les jus de fruits peut se faire par titrage redox. En effet la
vitamine C peut être facilement oxydée par différent oxydants.
L’oxydant qui sera utilisé ici sera de l’iode (I2) suivant la réaction :
C6H8O6 + I2 C6H6O6 + 2 I- + 2 H+
Au cours de la réaction, l’iode est réduit en ion iodure (I-). La fin du titrage peut être détectée à
l’aide d’amidon. Cet indicateur forme un complexe bleu-mauve avec l’iode lorsque ce dernier
n’est plus consommé par la réaction et est présent en excès.
8.2.2. Mode opératoire
a. Détermination de la concentration de la solution titrante d’iode.
La préparation d’une solution d’iode au départ d’iode solide ne peut se faire de manière précise
par pesée. Il est nécessaire de déterminer la concentration de la solution en titrant cette solution à
l’aide d’un autre réactif. Une solution standard de vitamine C (c’est-à-dire une solution dont on
connaît exactement la concentration) peut être utilisée à cette fin.
- Introduire à la pipette jaugée 20 ml de solution standard d’acide ascorbique à 1,000 mg/ml dans
un erlen de 250 ml
- Ajouter 1 ml d’acide acétique 0,1M.
- Ajouter quelques gouttes de solution d’amidon
38.- Remplir la burette avec la solution d’iode, mettre au trait (0 ml)
- Titrer jusqu’à coloration stable de la solution en mauve (bien homogénéiser la solution lors de
chaque ajout d’iode)
- Déterminer le volume titrant (celui-ci devrait être de l’ordre de 20 à 25 ml)
- Répéter ce titrage afin d’obtenir deux résultats concordants
b. Préparation des jus de fruits
- Jus en carton : utiliser tel quel
- Jus frais : presser les fruits et récolter les jus.
Dans les deux cas, si la pulpe est abondante, filtrer les jus à l’aide d’un entonnoir et d’un papier
filtre plissé dans un erlen de 250 ml.
c. Dosage de la vitamine C dans les jus de fruits
- Introduire à la pipette jaugée 25 ml de jus de fruits dans un erlen de 250 ml
- Ajouter 75 ml d’eau déminéralisée au cylindre gradué
- Ajouter 4 ml d’acide acétique 0,1M.
- Ajouter quelques gouttes de solution d’amidon
- Remplir la burette avec la solution d’iode, mettre au trait (0 ml)
- Titrer jusqu’à coloration stable de la solution en mauve (bien homogénéiser la solution lors de
chaque ajout d’iode)
- Déterminer le volume titrant (celui-ci devrait être compris entre 10 et 20 ml)
- Répéter ce titrage afin d’obtenir deux résultats concordants
8.2.3. Exploitation des résultats
a. détermination du titre de la solution d’iode
- Calculer le volume titrant moyen d’iode nécessaire pour titrer 20 mg d’acide ascorbique
- Calculer le nombre de mg d’acide ascorbique titré par ml de solution d’iode
b. détermination de la concentration en vitamine C des jus de fruits
- Calculer le volume titrant moyen d’iode nécessaire pour titrer 25 ml de jus
- Calculer le nombre de mg d’acide ascorbique titré dans 25 ml de jus
- Calculer le nombre de mg d’acide ascorbique par 100 ml de jus
_________________________________
39.Annexes
Annexe 1. Mode d’emploi de la micro-seringue GC
Avant l’injection
Inspecter la seringue : vérifier la mobilité parfaite du piston et contrôler la propreté de
l’extrémité de l’aiguille (absence de peluches, morceaux de septum…).
NB : l’aiguille d’une seringue GC a une extrémité pointue
alors que celle d’une aiguille HPLC est droite
Signaler toute anomalie au professeur avant de poursuivre
Rincer la seringue : 3 à 5 fois en la remplissant complètement avec un solvant adapté aux
substances analysées. Lors du remplissage, le piston doit être déplacé doucement. A chaque
rinçage, vérifier que du liquide sort de l’aiguille. Ne pas immerger complètement la seringue
dans le solvant (cela pourrait dissoudre la colle utilisée pour assembler les différentes pièces de
la seringue).
Injection
Remplir doucement la seringue avec la solution à analyser.
Enfoncer le piston jusqu’au volume souhaité.
Essuyer l’aiguille avec un papier absorbant.
Remonter le piston à mi-hauteur de manière à vider l’aiguille.
Contrôler la présence de liquide dans le corps de la seringue (si ce n’est pas le cas : refaire le
prélèvement).
Placer l’aiguille perpendiculairement à l’injecteur ( ! chaud = 200°C).
Percer le septum et enfoncer l’aiguille – si on rencontre une résistance ne pas forcer : retirer
l’aiguille et recommencer le mouvement.
Compter 2 secondes (chauffage de l’aiguille) et injecter rapidement le contenu de la seringue
(attention : ne pas « taper » le piston en fin de course).
Attendre 1 seconde et retirer l’aiguille de l’injecteur.
40.Après l’injection
Rincer la seringue (contrôler l’entrée et la sortie du liquide) avec le solvant adéquat et la poser
dans sa boîte.
NB : Les seringues GC sont fragiles et chères – les aiguilles peuvent être remplacées – les
pistons ne peuvent jamais être interchangés.
Conseils supplémentaires
Ne jamais forcer un piston quand il coince (les surpressions peuvent endommager le corps de la
seringue et on risque de tordre le piston). Essayer de le retirer puis de le nettoyer avec un chiffon
et un peu de solvant. Essuyer le piston correctement avant de le remonter dans la seringue.
Eviter les mouvements du piston quand la seringue est à sec.
Les pistons ne sont jamais interchangeables !
Annexe 2. Procédure d'analyse sur GC
(appareils GC N° 1, 5 et 6)
a. Programmation
Interrupteur général (à l'arrière en bas à droite, un large en plastic, pas un petit en métal).
Programmation des paramètres d'analyse :
Choisir un N° de programme dans le pavé "Programming" ( témoin vert allumé).
Créer un isotherme:
Appuyer sur la touche ISOTH: si une programmation de température est déjà encodée, initialiser
le programme en appuyant sur INIT / ENTER et sélectionner à nouveau le N° de programme.
Appuyer sur la touche ISOTH.
Oven security: par exemple 280°C / ENTER.
Wait: --.-- (rien) / ENTER.
Oven temp.: taper la température / ENTER.
Duration: --.--.-- (rien) / ENTER.
Créer une programmation de température:
Appuyer sur la touche TEMP PROG: si un isotherme est déjà encodé, initialiser le programme
en appuyant sur INIT / ENTER et sélectionner à nouveau le N° de programme.
Appuyer sur la touche TEMP PROG.
Oven security: par exemple 280°C / ENTER.
Wait: --.-- (rien) / ENTER.
T 1: taper la T°C initiale / ENTER.
D 1: taper le temps désiré à la T°C initiale (pour une min., taper 00.01.00) / ENTER.
R 1: taper la vitesse de chauffe en °C/min / ENTER.
T 2: taper la T°C finale / ENTER.
D 2: introduire le temps désiré à la T°C finale / ENTER.
R 2, T 3 et D 3: si on désire une deuxième chauffe / ENTER à chaque entrée.
D. Analyse: information sur la durée totale de l'analyse (ne rien faire) / ENTER.
41.Cooling: taper la vitesse de refroidissement (par ex. 20,0°C/min) / ENTER.
Heating zones:
Injector 1: taper la T°C (200°C par ex.) / ENTER.
Détector 1: taper la T°C (280°C par ex.) / ENTER.
Auxiliary 1: ------ °C (rien) / ENTER.
Auxiliary 2: ------ °C (rien) / ENTER.
Detect:
Détector FID : ENTER.
Range: 11 (A/mV) / ENTER.
Auto zéro: Y/N: taper YES / ENTER.
Appuyer à nouveau sur le N° de prog. dans le pavé "Programming" (témoin vert éteint).
Envoyer les paramètres à l'appareil:
Ouvrir les deux vannes d'azote (la principale au mur et la secondaire de la
canalisation noire).
Appuyer sur le N° de programme correspondant dans le pavé " Analysis"
(témoin rouge allumé).
Appuyer sur la touche START.
Vérifier le chauffage des différentes zones en appuyant plusieurs fois sur la touche STATUS du
haut.
Remarques:
La touche ESCAPE permet à tout moment de quitter le menu en cours de programmation ou
après la modification d'un paramètre, par exemple.
Après la modification d'un paramètre d'analyse, il faut à nouveau appuyer sur le N° de
programme correspondant dans le pavé " Analysis" et sur la touche START.
b. Allumage de la flamme
Attendre que le détecteur soit chaud (voir la touche START).
Ouvrir les vannes principales et secondaires de l'hydrogène et de l'air.
Tirer délicatement vers soi quelques secondes le bouton d'amorçage du filament situé en dessous
à gauche de l'appareil. La flamme s'allume en faisant un petit bruit, vérifier avec un verre de
montre. Si nécessaire, baisser la pression de l'air en tournant la petite vanne de l'air située sur le
dessus de l'appareil puis la faire remonter tout en allumant le filament d'amorçage.
Annexe 3. Utilisation des intégrateurs.
Interrupteur général à l'arrière à droite (attendre que les témoins lumineux ne clignotent plus).
L'appareil est prêt lorsque le témoin READY est vert.
Choisir un N° de File: taper sur FILE / N° / ENTER.
Les paramètres intéressants sont:
WITH: largeur du pic en dessous de laquelle le pic n'est pas intégré.
MIN. AREA: surface minimale du pic en dessous de laquelle le pic n'est pas intégré.
STOP. TM: durée du déroulement du papier.
ATTEN: valeur de l'atténuation.
SPEED: vitesse de déroulement du papier en mm/min.
42.Pour lister un paramètre: PRINT / appuyer sur le paramètre / ENTER.
Pour lister tous les paramètres: SHIFT DOWN / LIST / WIDTH / ENTER.
Pour modifier un paramètre: appuyer sur le paramètre / introduire la valeur / ENTER.
START: démarre le déroulement du papier.
STOP: arrête le déroulement du papier.
ZERO: repositionne la ligne de base à sa place (juste après avoir appuyer sur START par
exemple).
FEED: fait avancer le papier sans impression, appuyer une seconde fois pour l'arrêter.
43.Vous pouvez aussi lire
