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BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Revue Agrobiologia
www.agrobiologia.net
ISSN (Print): 2170-1652
e-ISSN (Online): 2507-7627
IMPACT DE LA FORMULATION SUR LE POTENTIEL ANTIFONGIQUE DE
L’HUILE ESSENTIELLE DU BIGARADIER CITRUS AURANTIUM L.
BENDALI Abdelaziz1*, OULEBSIR Chahinez1, El HADI Djamel2 et DJAZOULI Zahr-Eddine3
1. Université Blida 1, Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Département de Biotechnologie, Laboratoire de Recherche des Plantes
Aromatiques et Médicinales. B.P. 270, Route de Soumaâ, Blida, Algérie
2. Université Blida 1, Département de Chimie Industrielle, Laboratoire d'Analyses Fonctionnelles des Procédés Chimiques. B.P. 270, Route
de Soumaâ, Blida, Algérie
3. Université de Blida 1. Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie. Département de Biotechnologie. Laboratoire de Biotechnologie des
Productions Végétales, B.P. 270, Route de Soumaâ, Blida, Algérie
Reçu le 23/08/2019, Révisé le 11/10/2019, Accepté le 19/11/2019
Résumé
Description du sujet : Les produits biologiques sont recherchés pour leur efficacité dans plusieurs secteurs
pharmaceutiques et agricoles. La formulation permet de sécuriser, de réduire et de préserver les ressources
phytogénétiques tout en protégeant le principe actif
Objectifs : Notre étude a porté sur l’évaluation de l’activité antifongique de quatre formulations de l’huile
essentielle des feuilles de Citrus aurantium (L.) à savoir la formulation en gel, au Tween, au DMSO et à
l’acétone vis à vis d’un champignon phytopathogène (Fusarium oxysporum f.sp lycopersici) suivant deux modes
d’administration, diffusion par disque et diffusion par micro-atmosphère.
Méthodes : L’huile essentielle de Citrus aurantium (L.) a été extraite par hydrodistillation-entrainement à la
vapeur. 4 formulations ont été préconisée à partir de l’HE du bigaradier (F1 : Formulation en gel, F2 :
Formulation au Tween, F3 : Formulation au DMSO, F4 : Formulation à l’Acétone). L’activité antifongique a été
estimée selon une gradation positive de concentration (200, 400, 800, 1600 et 3200 µl/ml).
Résultats : Les résultats ont montré que les diverses formulations expriment un fort pouvoir inhibiteur suivant le
gradient des concentrations du principe actif. La caractéristique propre aux différentes formulations se voit
distincte entre diffusion par disque et diffusion par micro-atmosphère. La formulation en gel est performante
suivant les concentrations de l’huile essentielle pour les deux méthodes. Tandis que les préparations au DMSO et
à l’acétone sont très performantes par diffusion par disque.
Conclusion : Cette approche nous permet de valider l’utilisation des huiles essentielles dans divers domaines
relatifs à la gestion antimicrobienne
Mots clés : feuilles d’oranger amer, CG/SM, adjuvent, Fusarium, diffusion par disque, diffusion par micro-
atmosphère.
IMPACT OF THE FORMULATION ON THE POTENTIAL ANTI FUNGAL
ACTIVITY ESSENTIAL OIL OF CITRUS AURANTIUM L.
Abstract
Description of the subject: Organic products are explored for their phytophamaceutical impact. The
formulation helps to secure, reduce and preserve phytogenetic resources while protecting the active ingredient.
Objective: Our study evaluated the antifungal activity of four (04) formulations of Citrus aurantium L the
essential oil. namely the formulation on gel, Tween, DMSO and acetone against a phytopathogenic fungus
(Fusarium oxysporum f. sp lycopersici) according to two modes of administration, by diffusion by disk and by
micro-atmosphere.
Methods : Citrus aurantium L. essential oil was extracted by steam hydrodistillation. 4 formulations were
recommended from the HE of the bigarade orange (F1: Gel formulation, F2: Tween formulation, F3: DMSO
formulation, F4: Acetone formulation). The antifungal activity was estimated according to ascending
concentration (200, 400, 800, 1600 and 3200 µl / ml).
Results : The results showed that the various formulations express a strong inhibitory power according to the
gradient concentrations of active principle. The specific characteristic of the different formulations is distinct
between diffusion by disk and diffusion by micro-atmosphere. The gel formulation was effective according to
essential oil concentrations for both methods. While the preparation from DMSO and acetone was highly
efficient by disk diffusion.
Conclusion : This approach allows us to validate the use of essential oils in various areas related to
antimicrobial management.
Keywords : leaves of bigarade orange, CG/MS, adjuvant, Fusarium, disk diffusion, micro-atmosphere diffusion.
* Auteur correspondant: BENDALI Abdelaziz, E-mail: Aziz.Bendali@hotmail.com
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INTRODUCTION Elles sont utilisées pour leurs propriétés
L’intérêt pour les biopesticides d’origine antioxydantes, germicides et anticancérigènes
végétale, comme alternatifs aux applications [10, 11]. Les huiles essentielles de Citrus
fortuites d’une pharmacopée aveugle s’est aurantium (L.) occupent un large spectre des
développé, en particulier ceux qui préservent propriétés antifongiques qui sont dévoilées par
un environnement sain, biodégradables, non les différentes formulations en leur permettant
toxiques et spécifiques dans leur action, d'être considérées comme des agents
gagnent une attention considérable [1]. Ils sont antimicrobiens efficaces dans le traitement de
également nécessaires pour combattre certaines infections et dans la lutte contre
l'évolution de la résistance aux produits de certains organismes phytopathogènes. Le but
synthèses [2]. principale de la présente étude et d’évaluer les
Les nouvelles recherches ont soulevé la potentialités antifongiques d’une même huile
possibilité d'employer de nouveaux composés essentielle sous diverses formulations. Le
naturels qui peuvent agir en tant que recours à ce type d’étude apportera une valeur
biofongicides [3, 4, 5]. La lutte contre les ajoutée aux secteurs pharmaceutique et
champignons par l’application de fongicides agricole, compte tenu de l'importance
naturels a pris un envol très important dans les économique de la disponibilité du matériel
stratégies alternatives aux fongicides de végétal dans la production de produits
synthèse. Ces derniers sont à l’origine de antimicrobiens naturels
beaucoup de maladies de plantes. Ils causent
de grandes pertes de rendement dans les MATÉRIEL ET MÉTHODES
champs et affectent la qualité des aliments en
conservation [6]. 1. Présentation du matériel végétal et
Les huiles essentielles avec leurs larges reconnaissance botanique
spectres d’action vis-à-vis d’un grand nombre Les échantillons de Citrus aurantium (L.) ont
d’espèces fongiques constituent une alternative été collectés pendant la phase phénologique de
très prometteuse, sans être une source de feuillaison (avant floraison), durant les mois de
danger pour la santé humaine ou de pollution mars et avril de l’année 2018. Les collectes ont
pour l’environnement [7]. eu lieu au même endroit, au niveau du jardin
Le potentiel d’utilisation des huiles essentielles botanique de la Station Régionale de la
et de leurs constituants comme fongicides est Protection des Végétaux de Boufarik. La
renforcé par leur biodégradabilité. En outre, station est située à 3 km de la sortie nord du
l’apparition de souches fongiques résistantes chef-lieu de la commune (36° 34′ 00″ Nord, 2°
aux fongicides à base d’huiles essentielles est 55′ 00″ Est) à 63 mètres d’altitude. Ledit jardin
fortement improbable à cause de la botanique, s’étale sur une superficie de 5
composition souvent polymoléculaire de ces hectares composé de rangés de bigaradier,
huiles et de l’action synergique de leurs clémentinier, pommier, poirier, néflier,
constituants [8]. abricotier, pécher, prunier et grenadier. En
L’exploitation des huiles essentielles dans la bordure de ce jardin sont plantées des lignes
protection des végétaux est encore dans ses d’oliviers et de figuiers envahi par une
débuts, mais ces produits ont un potentiel broussaille d’églantier et très infesté de
fongicide prémuni pour remplacer les phragmites et de chiendent.
fongicides de synthèse. Des biofongicides à Seulement les feuilles ont été utilisées.
base d’huile essentielle sont mis sur le marché L'identification du spécimen étudié a été
pour les agriculteurs pratiquant de l’agriculture réalisée selon la nouvelle flore de l’Algérie
biologique. Il s’agit du SporanTM [12], par l’équipe du Jardin d’Essai d’EL
(Rosemarinus officianalis), PromaxTM Hamma à Alger.
(Thymus. vulgaris), TrilogyTM (Azadirachta Le matériel végétal obtenu a été séché à
indica) et E-RaseTM (Simmondsia californica) l'abri de la lumière et de l’humidité, à
[9]. température ambiante (24±1°C) pendant 7
Les huiles essentielles de Citrus aurantium jours au laboratoire de Phytopharmacie du
(L.) sont utilisées dans plusieurs produits Département des Biotechnologie, Faculté
comme aromatisants et additives tels que les des Sciences de la Nature et de la Vie
aliments, les jus, les produits cosmétiques et (Université de Blida 1).
médicinaux.
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2. Procédure d’extraction des huiles 3. Caractérisation chimique de l’huile
essentielles du bigaradier essentielle du bigaradier par Couplage
Les huiles essentielles sont des mélanges chromatographie en phase
complexes de substances organiques gazeuse/spectrométrie de masse (CPG/SM)
aromatiques liquides qu’on trouve Une fois l’huile essentielle obtenue, l’analyse
naturellement dans diverses parties des chimique permet d’identifier et de quantifier
végétaux. Elles sont très concentrées, volatiles les produits qui la composent. L’analyse de la
et sensibles à la décomposition sous l’effet de partie volatile est réalisée par deux techniques
la chaleur [13]. Dans la présente étude, Les chromatographiques (CPG & CPG/SM). Le
huiles essentielles ont été obtenues par couplage de la chromatographie en phase
hydrodistillation en utilisant un appareil de gazeuse avec la spectrométrie de masse
type Clevenger, Par référence aux directive de (CPG/SM) permet d’effectuer simultanément
la pharmacopée européenne, l’extraction est la séparation et l’analyse des différents
effectuée durant trois heures, durée nécessaire constituants d’un mélange complexe. Ce
à l’épuisement de la matière première (environ couplage est la technique la plus utilisée dans
90%) en huile essentielle. Le principe de le domaine des huiles essentielles et réunit le
l’hydrodistillation correspond à une distillation meilleur de ces deux techniques et permet de
hétérogène. Le procédé consiste à immerger la connaître, dans la grande majorité des cas, la
matière première végétale dans un bain d’eau. masse moléculaire d’un composé et d’obtenir
L’ensemble est ensuite porté à ébullition des informations structurales relatives à une
généralement à pression atmosphérique. La molécule à partir de sa fragmentation.
chaleur permet l’éclatement et la libération des L’analyse chromatographique est réalisée à
molécules odorantes contenues dans les l’aide d’un chromatographe en phase gazeuse
cellules végétales. Ces molécules aromatiques (GC-2014 Shimasu Gas Chromatograph),
forment avec la vapeur d’eau, un mélange équipé d’un détecteur à ionisation de flamme
azéotropique. Sachant que la température et d’une colonne capillaire DB5 peu polaire de
d’ébullition d’un mélange est atteinte lorsque longueur 30 m, de diamètre interne 25 mm et
la somme des tensions de vapeur de chacun des ayant un film d’épaisseur 0,25 μm. L’injecteur
constituants est égale à la pression fonctionne en mode split avec un ratio de 1/50,
d’évaporation, elle est donc inférieure à chacun le chromatographe est alimenté par trois gaz :
des points d’ébullition des substances pures. l’azote, l’hydrogène et l’air, le gaz vecteur
Ainsi le mélange azéotropique « eau + huile inerte est l’hydrogène ayant un flux total de
essentielle » distille à une température égale 5,61 ml/min, un débit de 1 ml/min et une
100°C à pression atmosphérique alors que les pression de 80,1 kPa. La température de
températures d’ébullition des composés l’injecteur est de 250°C et celle du détecteur
aromatiques sont pour la plupart très élevées. Il est de 270°C, et la température de la colonne
est ensuite refroidi et condensé dans un suit le programme suivant : la colonne à une
essencier. Une fois condensées, eau et température initiale de 50°C qui est maintenue
molécules aromatiques du fait de leurs pendant une minute ; puis de 50 à 175°C, elle
différences de densité, se séparent en une suit un palier à raison de 5°C par minute. La
phase aqueuse et une phase organique : l’huile température de 175°C est maintenue pendant
essentielle. Le stockage des huiles essentielles dix minutes. Ensuite, la température passe de
à -4°C à l’obscurité dans des flacons codés, 175 à 250°C selon un palier, à raison de 15°C
dans l’attente de leur analyse. Le rendement en par minute [15].
huiles essentielles (RHE) est défini comme L’identification des composants individuels est
étant le rapport entre la masse d'huile fondée sur la comparaison des indices de
essentielle obtenue après l'extraction (M') et la rétention (Ir) calculés, sur les colonnes polaires
masse de la matière végétale utilisée (M). et apolaires, avec ceux de composés
Selon Boussaada et Chemli [14], le rendement authentiques ou des données de la littérature
est exprimé en pourcentage, il est exprimé par (National Institute of Standards and
la formule suivante : RHE%=(mh/mv)×100, Technology, 2008), et des bibliothèques
Avec : RHE : Rendement en huile essentielle commerciales [16, 17], et par l’analyse de
en %, M' : Masse d’huile essentielle en chaque spectre de masse des composés
gramme, M : Masse de la matière végétale constitutifs.
sèche utilisée en gramme.
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4. Préparation des différentes formulations de la méthode de diffusion par disques [22] et la
l’huile essentielle du bigaradier méthode par micro atmosphère [23, 24].
La formulation consiste à additionner à l’huile Pour l’ensemble des formulations, les dilutions
essentielle un ou plusieurs adjuvants afin de testées ont été préparés selon une gradation de
faciliter sa conservation et d’homogénéiser son concentration obéissant à une suite
étalement et son absorption par le substrat. géométrique de raison r2 (200, 400, 800,
Nous avons préparé 4 formulations à partir de 1600et 3200 µl/ml) [25].
l’huile essentielle de Citrus aurantium (L.), Les disques sont préparées à partir du papier
comme suit : wattman de 6 mm de diamètre, ensuite elles
-Formulation 1 : L’huile essentielle obtenue a sont mises dans un tube à essai, stérilisés à
été formulée ainsi que son témoin positif en gel l'autoclave 20 minutes à 120°C, puis stockés à
selon le protocole établi par Moussaoui et al. une température ambiante.
[18]. Quelques colonies fongique ont été prélevées à
-Formulation 2 : L’huile essentielle obtenue a l’aide d’une anse de platine, puis disposées sur
été formulée ainsi que le témoin positif par une le centre d’une boite de pétri préalablement
substance le Monooléate de polyoxyéthylène coulée du milieu de culture spécifique pour les
sorbitane selon le protocole établi par Hamdani champignons (PDA) puis incubés a 27c
et Allem [19]. pendant 5 à 6 jours. Après incubation des
-Formulation 3 : L’huile essentielle obtenue a disques mycéliens de 8mm de diamètre issu
été formulée ainsi que le témoin positif par un d’une culture âgée de 7jours de Fusarium
solvant polaire organique (organosulfuré) le oxysporum f.sp. lycopersici ont été prélevé
diméthylsulfoxyde selon le protocole établi par avec un emporte-pièce et inoculés au centre de
Daghbouche et al. [20]. chaque boite de pétri précédemment coulé avec
-Formulation 4 : L’huile essentielle obtenue a 15ml de PDA (1disque/boite).
été formulée ainsi que le témoin positif par un - Pour la méthode par disque ; on a utilisé
solvant organique, l'acétone selon le protocole une pince pour mettre 5 disques dans la boite, à
établi par Daghbouche et al. [20]. l'aide d'une micropipette on a imbibé chaque
disque par 10 μl d’huile essentielle formulée
5. Mise en évidence de l’activité antifongique
[22].
de l’huile essentielle du bigaradier
- Pour la méthode par micro atmosphère ;
5.1. Micro-organisme et conditions de culture on a déposé les disques de papier sur le
L’activité antimicrobienne (activité biocide couvercle de la boite de pétri puis on les a
et/ou biostatique) de l’huile essentielle de imbibé par 10 μl sans que l’huile essentielle
Citrus aurantium (L.) a été évaluée sur une entre en contact avec notre milieu de culture
souche fongique qui provient de l’American (PDA) contenant le disque mycélien, la boite
Type Culture Collection ATCC, USA. Il s’agit est hermétiquement fermée [23, 24]. Après
de Fusarium oxysporum f.sp lycopersici, elle diffusion de l’HE durant 1 heure les boites ont
attaque principalement la plante au début de la été incubées à l’obscurité à une température de
floraison. La plante attaquée présente des 27°C, durant 7 jours.
symptômes de flétrissement et de jaunissement
6. Évaluation de l’activité antifongique de
partiel, puis total du feuillage [21].
l’huile essentielle du bigaradier
La souche fongique a été pré-cultivée avant
son utilisation. La suspension fongique a été 6.1. Cinétique de la croissance mycélienne
préparée en inoculant une boucle de la souche La cinétique de la croissance mycélienne
testée dans 3 ml de bouillon (milieu PDA) et correspond aux variations dans le temps, du
incubée à 37°C pendant 48 h afin d’avoir une diamètre du champignon avec différentes
culture jeune. La turbidité correspond à une concentrations. La cinétique de croissance
densité optique de 0,5 étalon de McFarland à mycélienne a été évaluée toutes les 48 heures
620 nm pour atteindre une concentration de en mesurant la moyenne de cinq diamètres
5×105 CFU/ ml. perpendiculaires passant par le milieu de la
rondelle [26]. Cette lecture est toujours réalisée
5.2. Mise en évidence de l’activité
en comparaison avec les cultures témoins dans
antifongique
les mêmes conditions et en utilisant le logiciel
La mise en évidence de l’activité antifongique
Digimizer avec un support pour respecter le
de Citrus aurantium (L.) a été exprimé par
même pixel.
deux méthodes à savoir ;
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6.2. Croissance mycélienne D’après le tableau 1, on constate que les
La croissance mycélienne a été évaluée à la fin composées majoritaires de l’huile essentielle
de l’expérience, à savoir au bout de 168h (7 de Citrus aurantium (L.), sont le Terpineol et
jours) d’incubation, en mesurant la moyenne le Geraniolacetate avec des taux respectifs de
de cinq diamètres sans prendre en compte le 21% et de 18% suivit de l’Anthranilic acid.
diamètre du disque. Cette lecture est toujours 1,5-dimethyl-1-vinyl-4-hexeryl ester et du
réalisée en comparaison avec les cultures Caryophyllene avec des taux de 12% et
témoins ayant démarré le même jour et dans 11.66%, ainsi que le Phytol qui est moins
les mêmes conditions [26]. disponible par rapport aux premiers composés
cités avec un taux de concentration de 4,36%.
6.3. Détermination de l’indice antifongique
La proportion des différents groupes de
D’après Sharma et Tripathi [27], le
composés de l’huile essentielle de Citrus
pourcentage d’inhibition de croissance I(%) est
aurantium (L.) comporte une large proportion
exprimé par la réduction du diamètre de la
de Monoterpènes (39%). Les Sesquiterpènes
colonie fongique par rapport au témoin, selon
viennent en seconde position avec des
la formule suivante I(%) = [(D témoin -D test )] /
proportions moins élevées (23,52%).
D témoin ×100. D témoin : témoin diamètre de la
Cependant, les Alcools et les Alcaloïdes
colonie témoin en (mm), D test : diamètre de la
affichent des proportions ajustées
colonie dans le test en (mm)
respectivement à 10,76% et 12%.
6.4. Détermination de la vitesse de 2. Variation temporelle des zones d’inhibition
croissance mycélienne (VC) de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici sous
Selon Cahagnier et Richard-Molard l’effet des différentes formulations de l’huile
[28], la vitesse de la croissance essentielle de Citrus aurantium (L.)
mycélienne de chaque concentration Selon la figure 1, l'évolution temporelle du
est déterminée par la formule taux d’inhibition fongique sous l’effet des
suivante : VC=[D1/Te1]+[(D2- huiles essentielles formulées en gel (F1), au
D1)/Te2]+[(D3-D2)/Te3]+... +[(Dn- Tween (F2), au DMSO (F3), et à l’acétone
Dn-1)/Ten]. D: diamètre de la zone (F4) appliquées par diffusion sur gel et par
de croissance journalière, Te: temps micro-atmosphère montre un effet fongicide
d’incubation. plus important selon le degré de concentration
7. Analyse statistique des données des dilutions utilisées, obéissant à un gradient
Les résultats sont rapportés comme positif D1>D2>D3>D4>D5. L’activité
valeurs de trois répétitions fongicide et/ou fongistatique s’installe dès les
(Moyenne±SE) sur la base d'un C.V. 4 jours de confrontation des bioproduits au
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obéissant à un gradient positif Elle affiche des taux d’inhibitions importantes
D1>D2>D3>D4>D5 pour la formulation au jusqu’au 4ème jour d’incubation dans les deux
DMSO, et la formulation à l’acétone. Le taux méthodes.
d’inhibition signalé sous l’effet de l’HE Les boites graphiques en BoxPlot montrent que
formulé au DMSO par la méthode de diffusion les taux d’inhibition se détachent clairement
par disque se détache nettement du taux sous l’effet des différentes doses de la
d’inhibition signalé sous l’effet de la même formulation du DMSO par la première
formulation par méthode de diffusion par méthode (Q 1 =0, Q 2 =0,22, Q 3 =0,48) et la
micro-atmosphère en termes d’importance. méthode par micro-atmosphère (Q 1 =0,10,
L’efficacité des deux formulations (DMSO et Q 2 =0,66, Q 3 =1,50). En revanche, les doses de
acétone) apparait dès 24h d’incubation. Sous l’huile essentielle formulée à l’acétone
l’effet de l’HE formulée avec l’acétone, expriment une similarité dans les taux
l’activité fongicide du principe actif augmente d’inhibition entre la première méthode testée
graduellement dans le temps. (Q 1 =0, Q 2 =0,22, Q 3 =0,51) et la deuxième
méthode (Q 1 =0, Q 2 =0,17, Q 3 =0,39).
Tableau 1: Composition chimique de l’HE de Citrus aurantium L.
Composés Familles Formule brute %
1 Terpineol Monoterpenols C 10 H 18 O 21
2 Anthranilic acid. 1,5-dimethyl-1-vinyl-4- Alcaloides C 7 H7NO 2 12
hexeryl ester
3 2-Methoxy-4-vinylpheenol Alcools C 9 H 10 O 2 4,3
4 Nerolacetate Ester D Alcool C 12 H 20 O 2 2,1
5 Geraniolacetate Monoterpènes C 12 H 20 O 2 18
6 Caryophyllene Sesquiterpènes C 15 H 24 11,66
7 Elixene Sesquiterpènes / 2,92
8 Nerolidol Sesquiterpènes / 1,48
9 Germacrene D-4-ol Sesquiterpènes C 15 H 26 O 3,96
10 Α-cadinol Sesquiterpenols C 15 H 26 O 3,50
11 Phytol Alcool Diterpènes C 20 H 40 O 4,36
Total des substances identifiées en %
Sesquiterpènes 23,52
Alcools 10,76
Monoterpènes 39
Alcaloïdes 12
Total 85,28
Formulation en gel à 10% (F1)
Méthode de diffusion par
disque
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Méthode de diffusion par micro-
atmosphère
Formulation au Tween (F2)
Par disque
Méthode de diffusion par
micro-atmosphère
Figure 1: Variation des zones d‘inhibition de Fusarium oxysporum fsp lycopersici sous l’effet des
formulations en gel et au Tween
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Formulation au DMSO (F3)
Méthode de diffusion par
disque
Méthode de diffusion par
micro-atmosphère
Formulation à l’Acétone (F4)
Méthode de diffusion par disque
Méthode de diffusion par
micro-atmosphère
Figure 2: Variation des zones d‘inhibition de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici sous l’effet des
formulations au DMSO et à l’Acétone
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3. Etude comparée de l’activité antifongique est partagé entre les formulations 1 et 2. Tandis
de l’huile essentielle de Citrus aurantium (L.) que le quatrième palier est largement visible
sous l’effet des différentes concentrations et comportant les taux d’inhibitions les plus
formulations prononcés, affilié au groupe homogène (d).
Enfin, le test de comparaison désigne pour les
3.1. Méthode de diffusion par disque
différentes concentrations testées la présence
À partir des résultats obtenus, nous
de 6 groupes. Le premier palier est signalé
remarquons que le temps d'incubation
chez le témoin et chez la dernière
enregistre un effet très significatif sur le taux
concentration à savoir la concentration 200
d’inhibition de la souche Fusarium oxysporum
µl/ml, qui montre un taux d’inhibition le plus
f.sp. lycopersici pour l’ensemble des
faible, affilié au groupe homogène (a). Le
traitements (pBENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Figure 4: Evolution temporelle des zones d’inhibitions selon les formulations par la méthode de
diffusion par disque
F1 : Formulation en gel, F2 : Formulation au Tween, F3 : Formulation au DMSO, F4 : Formulation à l’Acétone
3.2.
Méthode de diffusion par micro-atmosphère important, affiliée au groupe homogène (b)
Les résultats graphiques de l'analyse de la tandis que le troisième palier montre que T4
variance type GLM relatifs aux facteurs représente le taux d’inhibition le plus
étudiés sont consignés dans la figure 5. Ils prononcé, affilié au groupe (c) (Fig. 5).
montrent que le temps d'incubation du Concernant, le facteur formulations, le test de
champignon sous l’effet des huiles essentielles comparaison signale la présence de 3 groupes
enregistre un effet très significatif sur le taux homogènes. Le premier palier est signalé chez
d’inhibition. Le test Post-Hoc de Tukey, le témoin qui montre le taux initial de la
désigne la présence de 3 groupes homogènes croissance mycélienne, affilié au groupe
relatifs aux paliers temporels d'efficacité des homogène (a). Le deuxième palier montre une
différentes formulations par la méthode de inhibition similaire chez les formulations 4 et 2
micro-atmosphère. Le premier palier est à savoir (acétone et Tween), affilié au groupe
signalé à T8 d'incubation dévoilant le taux homogène (b). Le troisième palier est visible
d’inhibition le plus faible, affilié au groupe chez la formulation par gel et par le DMSO
homogène (a). Le deuxième palier est exprimant le taux d’inhibition le plus
remarquable pareillement chez T6 où important, affilié au groupe homogène (c)
l’'incubation dévoile une inhibition plus (Fig. 5).
Figure 5: Effets du temps, des concentrations et des formulations sur le pouvoir antifongique de l’huile
essentielle de Citrus aurantium (L.) par la méthode de diffusion par micro-atmosphère
F1 : Formulation en gel, F2 : Formulation au Tween, F3 : Formulation au DMSO, F4 : Formulation à l’Acétone
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Le taux d’inhibition est significativement palier exprime la plus importante inhibition
différent sous l'effet du facteur concentration constaté chez la C 1 qui représente la
des huiles essentielles formulées. Globalement, concentration la plus élevée, affilié au groupe
le Test de Tukey désigne la présence de 3 homogène (c) (Fig. 5).
groupes homogènes d’efficacité à savoir : le L'analyse ANOVA nous a dressé les profils
premier pallier qui est partagé entre 3 temporels des taux d’inhibition selon les
concentrations C0 (témoin), C4 (400 µl) et C5 différentes formulations testées par la méthode
(200 µl/ml) qui affiche les taux d’inhibition les de diffusion par micro-atmosphère. L'effet de
plus faibles, affilié au groupe homogène (a). la formulation en gel est significativement
Le deuxième palier annonce un taux différent car elle est durable dans le temps
d’inhibition modéré chez les C3 et C2 , affilié (Fig. 6).
au groupe homogène (b). Enfin, le troisième
Figure 6: Evolution temporelle des zones d’inhibitions selon les formulations par la méthode de
diffusion par micro-atmosphère
F1 : Formulation en gel, F2 : Formulation au Tween, F3 : Formulation au DMSO, F4 : Formulation à l’Acétone
4.
Etude comparée de l’indice d’inhibition des méthode de diffusion par disque, fait ressortir
différentes formulations de l’huile essentielle le facteur formulation comme élément de
de Citrus aurantium (L.) à l’égard de restriction de la croissance mycélienne. Ce
Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici constat est confirmé par le rapprochement
Dans l’esprit de mieux visualiser l’effet d’effet entre F1 et F2 pour les concentrations
fongicide/et ou fongistatique des bioproduits C1 et C2. Aussi, sous l’effet des concentrations
formulés à base d’huile essentielle de Citrus C3, C4 et C5 nous signalons le rapprochement
aurantium (L.), nous avons été conduits à entre F1, F2 et F4 (groupe homogène
confronter les mêmes paliers de concentrations identique). En revanche, selon la méthode de
des différentes formulations. Cette dernière a diffusion par micro-atmosphère, à la forte
permis d’avancer que certaines formulations concentration C1, F1 se rapproche de F4 tandis
affectent pareillement la croissance que F2 se rapproche de F3. Concernant les
mycélienne. Par ailleurs, les formulations concentrations moyennement faibles et faibles,
expriment des effets divergents sous mode de le comportement des formulations présente une
diffusion par disque te diffusion par mico- multitude de rapprochement (voir les groupes
atmosphère (Tableau 2). La lecture homogènes) (Tableau 2).
individualisée des taux d’inhibitions selon la
1687BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Tableau 2 : Taux d’inhibition de la croissance mycélienne
Test One-way ANOVA
Concentrations F1 F2 F3 F4
F-Ratio p (value)
54,30± 2,03 51,16±3,84 89,3±1,14 88,7±1,20
6,64×10-10
Méthode de diffusion par
C1 (3200µl/ml) 81,38
a a b b
34,63±2,63 34,86±2,33 88,98±0,21 76,6±1,80
C2 (1600µl/ml) 203,5 5,96×10-13
a a c b
disque
33,25±6,26 25,68±5,78 86,44±1,74 31,34±3,54
C3 (800µl/ml) 36,46 2,21×10-7
a a b a
23,74±3,92 16,86±3,63 86,32±1,64 21,48±2,56
C4 (400µl/ml) 114,8 4,95×10-11
a a b a
23,40±6,95 13,76±2,63 86,26±1,55 20,3±3,14
C5 (200µl/ml) 67,62 2,63×10-9
a a b a
84,32±1,33 59,22±2,66 59,36±1,34 89,38±0,84
2,94×10-10
Méthode de diffusion par
C1 (3200µl/ml) 90,72
b a a b
micro-atmosphère
69,92±1,51 28,7±3,23 52,88±2,26 38,18±1,50
C2 (1600µl/ml) 64,64 3,67×10-9
d a c b
68,94±3,01 18,3±3,05 40,68±2,25 31,72±1,63
C3 (800µl/ml) 70,4 1,95×10-9
c a b b
66,6±2,04 18,16±3,04 42,18±3,62 22,66±1,01
C4 (400µl/ml) 5,55 8,2×10-3
c a b a
37,64±3,28 9,74±0,93 38,62±3,67 10,14±1,54
C5 (200µl/ml) 38,47 1,52×10-7
b a b a
F1 : Formulation en gel, F2 : Formulation au Tween, F3 : Formulation au DMSO, F4 : Formulation à l’Acétone
5.Evaluation de la vitesse de croissance de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici sous l’effet des
différentes formulations de l’huile essentielle de Citrus aurantium (L.)
Dans le but d’appréhender l’activité biocide bioproduits formulés, es résultats montrent que
des bioproduits formulés, nous avons eu chaque formulation s’individualise par son
recours à l’estimation de la vitesse de effet sur la croissance mycélienne. Cette
croissance mycélienne. Cette dernière permis à caractéristique propre aux différentes
travers le rythme d’évolution mycélienne de formulations se voit distincte entre diffusion
définir un certain nombre de paramètres de par disque et diffusion par micro-atmosphère.
toxicité d’une matière active à savoir : (i) effet F1 est performante suivant les concentrations
Knock Down (effet choc) (ii) concentration de l’huile essentielle pour les eux méthodes. F3
létale ou inhibitrice (Fig. 7). Par référence à la et F4 sont très performantes par diffusion par
figure 7, et sur le plan degré de toxicité des disque.
Méthode de diffusion par disque Méthode de diffusion par micro-atmosphère
Formulation en gel à 10%
(F1)
1688BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Formulation au Tween (F2)
Formulation au DMSO (F3)
Formulation à l’ acétone
(F4)
Figure 7: Variation de la vitesse de croissance de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici sous l’effet
des différentes formulations et des modes d’administration
DISCUSSION Les résultats ont montré aussi que toutes les
La formulation permet de sécuriser, de réduire formulations ont un fort pouvoir inhibiteur sur
et de préserver les ressources phylogénétiques la croissance mycélienne, dont les
tout en protégeant le principe actif. Notre concentrations allant de 800 µl/ml à 3200
présent travail à porter sur les potentialités des µl/ml s’avèrent les plus importantes envers
formulations dans l’expression de l’activité l’espèce représentative du genre Fusarium
antifongique, les résultats de l’évaluation de (Fusarium oxysporum f.sp lycopersici). Ce qui
l’activité fongicide et/ou fongistatique nous ont nous permet d’avancer l’hypothèse sur la forte
permet de dégager les hypothèses suivantes : présence de composés volatils regroupant les
monoterpènes comme composés majoritaire
1. Effet des dilutions sur l’activité anti dans les concentrations les plus élevées. Il a été
fongique de l’huile essentielle de Citrus signalé que les monoterpènes représentent une
aurantium (L.) activité anti bactérienne très importante,
La susceptibilité fongique à l’huile essentielle l’hypothèse avancée, est confirmée par
de Citrus aurantium (L.) montre des plusieurs études qui relient le pouvoir
pourcentages d'inhibition élevés. antifongique des huiles essentielles des citrus à
leur composition chimique.
1689BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Matasyoh et al. [31], annoncent que l'activité est principalement due à l’action synergique et
antimicrobienne des huiles essentielles est solubilisant de certains adjuvants avec l’huile
censée être associée à des composants essentielle comme l’acétone et le DMSO, qui
phytochimiques tels que les monoterpènes. ont montré une performance remarquable lors
Une réduction dans la concentration de l’huile de leurs utilisation dans la méthode de
essentielle entraine une diminution dans le diffusion par disque. Tandis que pour
pouvoir inhibiteur de celle-ci avec toutes les l’application par la méthode de diffusion par
espèces fongiques. Les huiles essentielles des micro-atmosphère, c’est la formulation en gel
citrus sont un mélange complexe de composés qui a donné un meilleur résultat. Par
volatils qui présentent une activité conséquent, on peut avancer l’hypothèse que
antifongique en réduisant ou inhibant les formulations testées constituent une
totalement la croissance fongique [33]. synergie potentielle avec l’huile essentielle de
Caccioni et al. [34], ont déduit une corrélation Citrus aurantium (L.) et que ces dernières ne
positive entre l’activité antifongique et la retiennent pas les composés volatils qui sont
teneur en monoterpènes. Singh et al. [35], responsables de l’activité antifongique, de
rapportent que ces derniers sont reconnus même le choix de la méthode d’évaluation des
comme de bons composés fongitoxiques activités biologiques de certaines huiles
Les composés chimiques tels le limonène, essentielles agissent différemment vis-à-vis des
caryophyllene oxide, α-pinène, β-pinène, α- souches fongiques. On se basant sur
terpinéol et le citral ont des activités l’hypothèse avancée, nous pouvons l’accorder
antifongiques et antibactériennes ; composés avec les travaux de plusieurs chercheurs qui
largement présents dans la composition ont mentionné que l’activité antifongique est le
chimique des huiles essentielles des Citrus résultat du synergisme ou l'antagonisme des
[31]. divers composés d’huile essentielle des Citrus
Van Hung et al. [36], rapportent que la [41, 42]. Aussi, Bajpai et al. [43], estiment que
croissance mycélienne diminue avec les performances antimicrobiennes dévoilées
l’augmentation de la concentration en huile par les huiles essentielles pourraient être le
essentielle de Citrus reticulata. Ils obtiennent résultat d'un certain équilibre quantitatif des
un PIc de 50.9 % vis-à-vis de Fusarium divers composants.
proliferatum. Baser et Buchbauer [44], considèrent que le
Cox et al. [37], ont montrés que la présence choix de la technique d’évaluation de l’activité
des monoterpènes dans les huiles essentielles antifongique peut influencer le résultat obtenu.
est capable d'affecter l'intégrité cellulaire des Sharma et Tripathi [27], obtiennent deux
champignons, ce qui entraîne une inhibition de Concentrations Minimales Inhibitrices (CMI)
la respiration et une altération de la différentes pour l’huile essentielle de Citrus
perméabilité. sinensis avec Alternaria alternata, et ceci
De copieuses études ont montrés que l'activité lorsqu’ils emploient deux techniques
antimicrobienne de l'huile essentielle est différentes pour l’étude de la fongitoxicité de
souvent le résultat de l'activité des l’huile essentielle. Nakahara et al. [24],
monoterpènes plutôt que des sesquiterpènes remarquent que l’huile essentielle de
[38]. Il a été prouvé que la même activité est Citronellae aetheroleum était inactive vis-à-vis
apparemment liée à sa teneur élevée en alcools de neuf espèces de champignons avec la
et en esters et d'autres composés mineurs entre méthode de dilution, mais elle a inhibé la
autres le linalool, le terpinène-4-ol, le camphre, croissance de la totalité des espèces fongiques
le trans-pinocarveol, le t- Cadinol, l’α-cadinol dans la méthode micro atmosphère. Les huiles
et le β-caryophylléne oxide qui agissant de essentielles des Citrus sont un mélange
manière synergique ou additive [39, 40]. complexe de composés volatils qui présentent
une activité antifongique en réduisant ou
2. Evaluation de l’efficacité des formulations
inhibant totalement la croissance fongique
sur les taux d’inhibitions de la croissance
[33].
mycélienne de Fusarium oxysporum f.sp
Ces résultats semblent valider certaines
lycopersici.
utilisations des huiles essentielles de Citrus
Une efficacité variable a été enregistrée vis-à-
aurantium (L.) en pharmacognosie et en
vis de l’espèce fongique testée selon les deux
agriculture biologique.
méthodes d’application et selon les différentes
formulations,
1690BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
Les différences dans les niveaux de [2]. Isman MB. (2000). Plant essential oils for pest
chémotypes et dans les activités biologiques and disease management. Crop Protect,
ont montré l'importance de la formulation dans 19:603–608
la promotion des agents antimicrobiens. Le [3]. Regnault- Roger C. (2012). Trends for
Commercialization of Biocontrol Agent
large spectre des propriétés antifongiques des
(Biopesticide) Products. Plant Defense
huiles essentielles de Citrus aurantium (L.) Biological control. 12(6) : 139- 60
dévoilé par les différentes formulations leur [4]. Kassi FM., Badou OJ., Tonzibo ZF., Salah
permet d'être considérées comme des agents Z., Lndge A., et Kone D. (2014). Action du
antimicrobiens efficaces dans le traitement de fongicide naturel NECO contre la
certaines infections et dans la lutte contre cercosporiose noire (Mycosphaerella
certains organismes nuisibles aux plantes. Les fijiensis Morelet) chez le bananier plantain
propriétés antifongiques dévoilées peuvent être (AAB) en Côte d’Ivoire. J. Applied
significativement importantes pour les secteurs Biosciences,75 (8): 6183– 6191.
pharmaceutique et agricole, compte tenu de [5]. Xue A .G.,Chen Y., Voldeng H.D ., Fedak G
., Savard M .E ., Langle T ., Zhang J ., et
l'importance économique de la disponibilité du
Harman G .E. (2014). Concentration and
matériel végétal dans la production de produits cultivar effects on efficacy of CLO-1
antimicrobiens naturels avec des formulations biofungicide in controlling Fusarium head
combinées tout en prenant en compte des blight of wheat. Biological Control, 73(22):
facteurs environnementaux influençant la 2-7
composition et l'efficacité des huiles [6]. Laplace J.P. (2006). Agriculture et
essentielles. alimentation Réflexions croisées. Cahiers
CONCLUSION Agricultures, 15(4): 375 -78.
[7]. Broydé H. et Doré T. (2013). Effets des
L’ensemble des formulations ont montré un pratiques agricoles sur la contamination des
fort pouvoir inhibiteur sur la croissance denrées par les mycotoxines issues de
mycélienne qui est proportionnel avec les Fusarium et Aspergillus spp. Cahier
concentrations et ceci avec l’espèce Agriculture, 2(2): 182-94.
représentative du genre Fusarium. Cette [8]. Bagamboula C.F., Uyttendaele M., et
démarche, nous a permis de prouver que Debevere J. (2004). Inhibitory effect of
l’action biocide est fortement liée à la forte thyme and basil essential oils, carvacrol,
présence en composés volatils regroupant les thymol, estragol, linalool and p-cymene
monoterpènes comme composés majoritaire towards Shigella sonnei and S. flexneri.
Food Microbio., 2(1): 33- 42.
dans l’huile essentielle de Citrus aurantium
[9]. Isman A. (2011). Instructional Design in
(L.) et la capacité de sa libération. Selon les Education: New Model. TOJET: The
taux d’inhibitions obtenues, l’efficacité a été Turkish Online Journal of Educational
démontrée pour toutes les formulations. Cette Technology, 10(1).
caractéristique propre aux différentes [10]. Mukhopadhyay M. (2000). Natural extracts
formulations se voit distincte entre diffusion using Supercritical Carbon Dioxide. 1Ed,
par disque et diffusion par micro-atmosphère. CRC Press LLC, Boca Raton, Florida. 339p.
La formulation en gel est performante suivant [11]. Sawamura M. (2010). Citrus essential oils
les concentrations de l’huile essentielle pour flavor and fragrance. Ed John Wiley. New
les deux méthodes. Tandis que les préparations Jersey, 398p.
[12]. Quezel P. et Santa S. (1962). Nouvelle flore
au DMSO et à l’acétone sont très performantes
de l’Algérie et des régions désertiques
par diffusion par disque. méridionales, ed, C.N.R.S. Vol. 1, Paris.
À la lumière des résultats obtenus, le travail 1170p.
ouvre la voie à d’autres perspectives. [13]. Bruneton J. (1999). Pharmacognosie,
Notamment, la proposition de formulations Phytochimie – Plantes médicinales – 3ème Ed
biofongicide commerciale et d’approfondir les Techniques et documentations. Paris. pp:
recherches concernant la relation entre la 227-310-312-313-314.494.
composition chimique et l'activité antifongique [14]. Boussaada O. et Chemli R. (2007). Seasonal
des huiles essentielles. Variation of Essential Oil Composition of
Citrus aurantium L. var. amara. Journal of
RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES Essential Oil Bearing Plants, 10(2): 109-
[1]. Sharma N. et Tripathi A. (2008). .Effects of 120.
Citrus sinensis (L.) Obseck epecarp essential [15]. Proestos C., Sereli D. and Komaitis M.
oil one growth and morphogenesis of (2006). Determination of phenolic
Aspergillus Niger (L.) Van Tieghem . compounds in aromatic plants by RP-HPLC
Microbiological Research, 163(3): 337-344 and GC-MS. Food Chemistry, 95: 44-52.
1691BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
[16]. NIST/EPA/NIH. (2002). Mass Spectral [27]. Sharma N. et Tripathi A.; (2008). Effects of
Library Gaithersburg. National Institute of Citrus sinensis (L) Obseck epecarp essential
Standard and Technology oil one growth and morphogenesis of
[17]. Adams R.P. (2007). Identification of Aspergillus niger (L). Van Tieghem
Essential Oil Components by Gas Microbiological Research, 163(3): 337-344
Chromatography/mass Spectrometry. 4th [28]. Cahagnier B. et Richard-Molard D. (1998).
Edition Allured Publishing Corporation, Moisissures des aliments peu-hydratés, les
Carol Stream. moisissures. Collection sciences et
[18]. Moussaoui K., Ahmed Hadjlal O., Zitouni techniques agroalimentaires. Ed. :
G. et Djazouli Z.E. (2014). Estimation de la Lavoisier. pp: 39-41.
toxicité des huiles essentielles formulées de [29]. SPSS, Inc. (2016). SYSTAT 12.00 for
Thym et d’Eucalyptus et d’un produit de windows, statistics and graphics
synthèse sur le parasite de l’abeille tellienne [30]. Hammer Øyvind, David A.T., Harper, et
Varroa destructor (Arachnida, Varroidae). Paul D. Ryan. (2001). Past: Paleontological
Revue Agrobiologia, 4(1) :17-26 Statistics Software Package for Education
[19]. Hamdani F.Z. et Allem R. (2017). and Data Analysis. Palaeontologia
Antifungal activity of the leaf essential oil of Electronica, vol. 4, issue 1, art. 4: 9pp.,
Citrus against Alternaria alternata and 178kb. .
Penicillium sp in vivo. Phytothérapie, [31]. Matasyoh J .C., Kiplimo J. J., Karubiu
15:263–266. N.M. et Hailstorks T.P. (2007). Chemical
[20]. Daghbouche S., Daghbouche A., composition and antimicrobial activity of
Boulessnam A., Snoussi S.A. et Djazouli essential oil of Tarchonanthus camphorates.
Z.E. (2017). Variation phénologique du Food Chemistry, 101(3): 1183–1187.
contenu phytochimique et de l’activité [33]. Viuda-Martos M., Ruiz-Navajas Y.,
antibactérienne de Cytisus triflorus l’Her. Fernandez-Lopez J. et Perez-Alvarez J.
Revue Agrobiologia, 7(2): 548-561. (2008). Antifungal activity of lemon (Citrus
[21]. Joffin N. (2013). Les techniques de limon L.), mandarin (Citrus reticulate L.),
laboratoires utilisées en mycologie, pp. 1- grapefruit (Citrus paradisi L.) and orange
20. (Citrus sinensis L.) essential oils. Food
http://www.techmicrobio.eu/index.php/micr Control, 19(8): 1130–1138.
obio/mycologie/laboratoire [34]. Caccioni D.R.L., Guizzardi M., Biondi
[22]. Aouni M., Pelen F. et Soulimani R. D.M., Renda A. et Ruberto G. (1998).
(2013). Étude de l’activité antimicrobienne Relationship between volatile components of
d’un mélange de 41 huiles essentielles et citrus fruit essential oils and antimicrobial
domaines d’application. Phytotérapie, 11(4): action on Penicillium digitatum and
225-236. Penicillium italicum. Food Microbiology,
[23]. Inouye S., Takizawa T. et Yamaguchi H. 4(3) :73–79.
(2001). Antibacterial activity of essential [35]. Singh P., Shukla R., Prakash B., Kumar A.,
oils and their major constituents against Singh S., Mishra A.K. et Dubey N.K.
respiratory tract pathogens by gaseous (2010). Chemical profile, antifungal,
contact. Journal of Antimicrobial antiaflatoxigenic and antioxidant activity of
Chemotherapy, 47(5): 565–573. Citrus maxima Burm. and Citrus sinensis
[24]. Nakahara K., Alzoreky N.S., Yoshihashi T., (L.) Osbeck essential oils and their cyclic
Nguyen H.T.T. et Trakoontivakorn G. monoterpene, DL-limonene. Food and
(2003). Chemical composition and Chemical Toxicology, 48(12): 1734–1740.
antifungal activity of essential oil from [36]. Van Hung P., Thi Lan Chi P. et Thi Lan
Cymbopogon nardus (Citronella grass). Phi N. (2013). Comparison of antifungal
Japan Agricultural Research Quaterly. activities of Vietnamese Citrus essential oils.
37(4) : 249-252. Natural Product Research Formerly Natural
[25]. Kucukbay F, Yildiz B, Kuyumcu E. et Product Letters, 27(4-5): 506-508,
Gunal S. (2011). Chemical Composition [37]. Cox S.D., Mann C.M., Markham J.L., Bell
and Antimicrobial Activities of the Essential H.C., Gustafson J.E., Warmington J.R. et
Oils of Teucrium orientale var. orientale Wyllie S.G. (2000). The mode of
and Teucrium orientale var. puberulens. antimicrobial action of the essential oil of
Chemistry of Natural Compounds, 47(5): Melaleuca alternifolia (Tea tree oil). J. Appl.
833-836. Microbiol. 88: 170–175.
[26]. Trong L. et Elsner S. (1986). Etude de [38]. Haddouchi F., Lazouni H., Ahammer KA.,
croissance mycélienne de 4 champignons Carson CF. et Riley TV. (1999).
d'origines africaine, océanienne et Antimicrobial activity of essential oils and
européenne utilisées dans les essais au other plant extracts. J. Appl. Microbiol. 86,
CTFT-Nogent. Kourou : CIRAD-CTFT, 12 pp: 985-990.
p.
1692BENDALI et al. Revue Agrobiologia (2019) 9(2): 1677-1693
[39]. Muanda FN. (2010). Identification de [42]. Deba F., Xuan T.D., Yasuda M. et Tawata
polyphénols, Evaluation de leur Activité S. (2007). Chemical composition and
Antioxydante et Etude de leurs Propriétés antioxidant, antibacterial and antifungal
Biologiques. Thèse de Doctorat. Université activities of the essential oils from Bidens
Paul Verlaine-Metz. 239p. pilosa. Food Control, 19(2) : 346–352.
[40]. Milane H. (2004). La quercétine et ses [43]. Bajpai V.K., Sharma A. et Baek K.H.
dérivés : molécules à caractère pro-oxydant (2013). Antibacterial mode of action of
ou capteurs de radicaux libres; études et Cudrania tricuspidata fruit essential oil,
applications thérapeutiques, Thèse de affecting membrane permeability and
Doctorat. Université Louis Pasteur surface characteristics of food-borne
Strasbourg. 263 p. pathogens. Food Control., 3(2): 582-90.
[41]. Sonboli A., Babakhani B. et Mehrabian [44]. Baser K.H.C. et Buchbauer G. (2010).
A.R. (2006). Antimicrobial activity of six Handbook of Essential Oils: Science,
constituents of essential oil from Salvia. Technology, and Applications. Ed Taylor &
Zeitschrift fur Naturforschung Section C. Francis Group.994p.
Biosciences, 61(5): 160–164.
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